植物基因工程实验手册

植物基因工程实验手册 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:清华大学出版社
作者:何光源
出品人:
页数:156
译者:
出版时间:2007-4
价格:19.00元
装帧:
isbn号码:9787302141594
丛书系列:
图书标签:
  • 植物基因工程
  • 基因工程
  • 植物生物技术
  • 分子生物学
  • 实验指导
  • 生物技术
  • 植物科学
  • 遗传学
  • 农业生物技术
  • 实验室手册
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具体描述

本书介绍了植物基因工程中常用的实验方法和技术,全书共分6章,详细阐述了目的基因的分离、载体构建、目的基因的转化、转基因植物鉴定、转基因植物的基因安全评价、计算机在植物基因工程研究中的应用等内容。本末还附有植物基因工程实验中常用溶液、缓冲液和培养基的配制,常用抗生素及使用浓度,凝胶浓度的有效分离范围和常用的分子质量标准以及核酸的量与质量间的换算等资料数据。

本书既可作为高等学校相关专业本科生、研究生的实验教材,也可供有关单位研究人员参考使用。

《现代分子生物学技术应用指南》 本书全面梳理了现代分子生物学研究领域的核心技术及其在不同学科中的实际应用。内容涵盖了基因克隆、基因表达调控、蛋白质组学、生物信息学等多个关键方向。 第一部分:基因操作与分析 1. 核酸提取与纯化:详细介绍了从不同生物材料(如植物组织、细菌、哺乳动物细胞)中提取高质量DNA和RNA的多种方法,包括酚-氯仿抽提法、离心柱纯化法、磁珠分离法等,并对各种方法的原理、步骤、优缺点及适用范围进行了深入分析。同时,强调了核酸质量检测(如A260/A280比值、凝胶电泳)的重要性。 2. PCR及其衍生技术:从最基础的聚合酶链式反应(PCR)原理讲起,详细阐述了定量PCR(qPCR)、反转录PCR(RT-PCR)、巢式PCR、长片段PCR等关键技术。重点介绍了PCR反应体系的优化策略、引物设计原则、常见问题及解决方案,以及不同PCR技术在基因鉴定、基因表达分析、基因突变检测等方面的应用实例。 3. 核酸纯化与分子克隆:深入讲解了DNA片段的酶切、连接(粘性末端、平末端)、载体构建、转化(感受态细胞制备、热激法、电转化法)等经典分子克隆技术。同时,介绍了TA克隆、Gibson组装、Golden Gate等高效、高通量的克隆方法,并提供了实用的载体选择指南。 4. 基因测序技术:回顾了第一代DNA测序技术(Sanger测序)的基本原理与应用,并重点介绍了新一代测序技术(NGS),包括短读长测序(如Illumina)和长读长测序(如PacBio、Oxford Nanopore)。详细阐述了NGS技术的测序流程、数据预处理、比对、变异检测等步骤,以及其在全基因组测序、转录组测序、宏基因组测序等领域的革命性影响。 5. 核酸-蛋白质相互作用研究:介绍了多种研究核酸与蛋白质之间相互作用的方法,包括凝胶迁移率实验(EMSA)、染色质免疫沉淀(ChIP)、酵母单杂交/双杂交(Y2H)、下拉实验(Pull-down assay)等。解释了这些技术背后的生物学原理,并提供了实验设计和数据解读的建议。 第二部分:基因表达与调控研究 1. 基因表达水平的检测:除了qPCR外,详细阐述了 Northern Blot、微阵列(Microarray)技术,并重点介绍了RNA测序(RNA-Seq)在全转录组范围进行基因表达定量分析的优势和应用。讨论了如何从海量数据中挖掘差异表达基因,并进行功能富集分析。 2. 蛋白质表达与检测:涵盖了蛋白质的提取、纯化(亲和层析、离子交换层析等)、SDS-PAGE电泳分离、Western Blotting(免疫印迹)进行特异性蛋白检测、ELISA(酶联免疫吸附测定)进行定量分析。 3. 蛋白质组学技术:介绍了质谱(Mass Spectrometry, MS)技术在蛋白质鉴定、定量、翻译后修饰研究中的核心作用,包括二维凝胶电泳(2D-PAGE)结合质谱、液相色谱-质谱联用(LC-MS)等技术。 4. 基因沉默与过表达技术:深入探讨了RNA干扰(RNAi)技术(siRNA、shRNA)、反义寡核苷酸(Antisense Oligonucleotides)用于基因功能抑制,以及通过载体介导的基因过表达技术研究基因功能。 5. CRISPR/Cas9基因编辑技术:详细介绍了CRISPR/Cas9系统的构成、工作原理、靶向设计、递送方法(如质粒、病毒、核糖核蛋白复合物)以及其在基因敲除、基因敲入、点突变引入等方面的应用。讨论了基因编辑的脱靶效应及规避策略。 第三部分:生物信息学与数据分析 1. 生物信息学基础:介绍了基因组数据库(如GenBank, EMBL, DDBJ)、蛋白质数据库(如UniProt, PDB)的使用方法。讲解了序列比对工具(如BLAST)、基因预测、功能注释、系统发生树构建等基本生物信息学分析流程。 2. 基因组与转录组数据分析:聚焦于高通量测序数据的处理流程,包括原始数据质量控制、reads比对、基因组组装、变异检测、转录本组装、差异表达分析、通路富集分析等。 3. 蛋白质组学数据分析:介绍了质谱原始数据的处理、肽段和蛋白质鉴定、定量分析、翻译后修饰分析等。 4. 可视化工具与数据管理:推荐并讲解常用可视化工具,如Primer3(引物设计)、SnapGene(分子克隆模拟)、IGV(基因组可视化)、Cytoscape(网络可视化)等,并强调了实验数据的高效管理和共享的重要性。 第四部分:前沿技术与综合应用 1. 单细胞技术:介绍了单细胞DNA测序、单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术,揭示了其在肿瘤异质性研究、发育生物学、免疫学等领域的巨大潜力。 2. 合成生物学:简述了合成生物学的设计、构建、测试(Design-Build-Test)循环,以及基因线路、人造基因组等概念,展望了其在医药、能源、环境等领域的未来发展。 3. 实验设计与数据解读:提供了一系列基于实际研究问题的实验设计框架,强调了对照组设置、重复性、统计学分析的重要性。指导读者如何从复杂的实验数据中提取有意义的结论,并规避潜在的误读。 本书特色: 理论与实践相结合:每个技术都附有详细的实验原理阐述,并辅以清晰的操作步骤和注意事项。 面向应用:强调各项技术在具体科研问题解决中的作用,提供丰富的案例分析。 全面性:覆盖了分子生物学研究的多个维度,满足不同领域研究者的需求。 前沿性:引入了近年来发展迅速的新技术,如CRISPR/Cas9、单细胞测序等。 易于理解:力求用简洁明了的语言解释复杂的科学概念,降低学习门槛。 无论您是从事生命科学基础研究的研究人员、研究生,还是在生物技术、医药、农业等行业进行研发的专业人士,本书都将为您提供宝贵的指导和参考,帮助您熟练掌握现代分子生物学技术,高效地开展科研工作。

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读后感

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用户评价

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对于我们这些需要经常进行跨学科合作的科研人员而言,这本书在方法论的规范性和可重复性上的强调,显得尤为重要。我发现,很多实验室之间的实验差异,往往源于对关键步骤的理解不一致。这本书在这方面做得非常出色,它对试剂配制的浓度、缓冲液的pH值,甚至是孵育环境的温湿度,都给出了明确的参考范围和建议。这对于建立一个标准化的实验流程至关重要。举个例子,关于农杆菌介导的转化,书中详细对比了几种不同的预培养条件对转化效率的影响,这种对比分析非常严谨,让读者可以根据自己的实验材料选择最优方案,而不是盲目照搬。这种严谨性,保证了实验结果的可信度和可复现性,这是科学研究的基石。阅读过程中,我感觉作者对实验细节的把控达到了吹毛求疵的程度,这对我们来说是极大的福音。

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这本关于植物基因工程的实验手册,从我一个刚刚接触分子生物学的学生角度来看,简直是打开了一扇通往微观世界的大门。我尤其欣赏它对基础操作的细致描述,比如质粒的提取和转化步骤,图文并茂,步骤清晰得让人倍感踏实。以前看教科书上的理论,总觉得有些抽象,但这本书把每一步的“为什么”和“怎么做”都讲得非常透彻。我记得有一次实验失败,翻阅这本书后,才意识到可能是酶切的温度控制出了偏差,书中对此类细节的强调确实能帮助我们避免很多不必要的弯路。而且,它不光是罗列步骤,还融入了一些实际操作中的“小窍门”,比如如何判断DNA是否完全沉淀,如何优化PCR的退火温度等,这些都是经验之谈,对于我们这些还在摸索阶段的人来说,价值连城。它不像有些冷冰冰的指南,更像是一位经验丰富的导师在耳边细语,让人在面对复杂的分子操作时,心里更有底气。这种详实而又兼顾实践的编排方式,极大地提高了我的实验成功率。

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从一个教学者的角度来看,这本书是培养下一代植物生物技术人才的绝佳教材。它没有过度依赖复杂的数学模型或过于深奥的理论阐述,而是将重点放在了动手能力的培养上。书中对于安全规范的强调也让人印象深刻,它清晰地列出了涉及生物安全级别的操作要求、化学试剂的毒性等级以及废液的处理流程。这对于在校学生来说,是树立正确实验价值观的关键一步。此外,书中穿插的“历史背景”和“技术演进”的小插曲,虽然不属于核心实验步骤,却极大地激发了学生的学习兴趣,让他们了解到这些技术的来龙去脉。这种理论与实践、历史与前沿相结合的叙事方式,使得枯燥的实验过程变得生动起来,真正做到了寓教于乐,让学生在学习具体技能的同时,也对整个领域的发展脉络有了宏观的认识。

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这本书的版式设计和阅读体验也值得称赞,它显然考虑到了实验室的实际使用场景。很多实验手册在印刷和装订上都很简陋,拿到手上翻几次就容易破损,尤其是在实验室这种潮湿多油烟的环境中。而这本书的纸张质量和装订都非常结实耐用,内页排版逻辑清晰,索引系统做得非常完善,即便是在紧急查找某个特定步骤时,也能迅速定位。更让我喜欢的是,它在介绍完一个主要实验模块后,往往会附带一个“故障排除”的小节。比如,当我第一次尝试进行花粉管表达载体转化时,遇到了孢子体发育抑制的问题,书中立刻给出了可能的原因分析,比如载体构建不完善或转化过程中的渗透压不适宜等,这种前瞻性的指导,极大地减少了调试时间。这种以用户为中心的编辑思维,让阅读和使用过程都变得非常顺畅和愉悦。

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这本书的深度和广度都让我感到震撼,尤其是在涉及到一些前沿技术,比如CRISPR/Cas9在植物基因编辑中的应用部分,简直是教科书级别的梳理。它不仅介绍了原理,还非常负责任地讨论了不同植物物种中应用该技术时可能遇到的特异性挑战和解决方案。我注意到作者在讨论启动子选择和遗传转化效率提升策略时,引用了大量的最新文献,这说明编撰者对领域内的最新动态把握得非常精准。对于我这样的研究者来说,查阅分散在不同期刊上的信息往往耗时巨大,而这本书如同一个高效的信息聚合器,将复杂的知识点进行了系统性的整合和提炼。特别是在探讨转基因植株的稳定表达和表型分析时,书中提出的多维度验证方法,为我后续的论文写作提供了极好的思路框架。它不仅仅是一本“怎么做”的手册,更是一本引导“如何思考”的学术工具书。

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