分子生物学基本技能和策略

分子生物学基本技能和策略 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:科学出版社发行部
作者:周俊宜
出品人:
页数:230
译者:
出版时间:2003-8
价格:23.00元
装帧:简裝本
isbn号码:9787030113023
丛书系列:
图书标签:
  • 分子生物学
  • 生物技术
  • 实验技术
  • 科研方法
  • 基因工程
  • DNA/RNA
  • 蛋白质
  • 生物化学
  • 生命科学
  • 实验室技能
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具体描述

《分子生物学基本技能和策略》以分子生物学理论为指导,以基因工程技术流程为主导路线,系统介绍了基因克隆、基因表达、蛋白质分析等经典理论和实用技术,既包括简明扼要的纲领性技术原理,又覆盖了生物化学与分子生物学领域最常见和最实用的技术方法和实验方案。

《分子生物学基本技能和策略》适合于高等院校生命科学专业的师生和从事生命科学研究的工作者使用。

深入理解细胞的奥秘:现代生物化学前沿探索 本书聚焦于生命活动的基础——生物化学领域,旨在为读者提供一个全面、深入且与时俱进的知识框架。 我们将超越基础的分子结构描述,深入探讨生命系统中复杂的调控网络、能量转换机制以及信息传递的精妙设计。本书的构建逻辑清晰,从宏观的生物体系统视角切入,逐步向下解构至分子层面,最后聚焦于新兴的生物技术应用,确保读者不仅知其然,更能知其所以然。 第一部分:生命物质的基础构建与多样性 本部分着眼于构成生命体的核心物质,但着重于其功能性而非仅仅是化学式的堆砌。 第一章:氨基酸、多肽与蛋白质结构的功能导向解析 我们将详细分析20种标准氨基酸的理化性质,特别是侧链基团(R基)如何决定其在不同环境下的行为(如疏水性、酸碱性)。重点将放在蛋白质折叠的驱动力:疏水效应、氢键、范德华力和离子键的协同作用。本书不会停留在四级结构的简单罗列,而是深入讨论伴侣蛋白(Chaperones)在正确折叠过程中的关键作用,以及错误折叠如何引发淀粉样变性疾病(如阿尔茨海默病)的分子机制。 此外,蛋白质修饰(PTMs)如磷酸化、泛素化和糖基化,将被视为动态调控信号通路的核心“开关”,详细剖析它们对蛋白质活性、定位和稳定性的影响。 第二章:核酸化学的动态视角:从结构到信息载体 本章超越了DNA和RNA的基本双螺旋结构,关注核酸在活细胞内的动态行为。我们将探讨DNA的拓扑学——超螺旋、扭曲和解旋酶的作用,以及这些结构变化如何影响基因组的稳定性与复制起始。RNA的部分将侧重于其功能多样性,特别是新型非编码RNA(ncRNA)的作用,如siRNA、miRNA和长链非编码RNA(lncRNA)如何通过表观遗传机制调控基因表达。对于RNA世界假说,我们将结合最新的体外演化实验证据,探讨其在生命起源中的推测地位。 第三章:糖类与脂质的代谢调控与信号功能 糖类和脂质远非单纯的能量储备。在糖类章节,我们将详细解析糖酵解、三羧酸循环(TCA)的精细调控,重点讨论关键酶(如磷酸果糖激酶-1)的变构调节机制,以及糖异生通路在维持血糖稳态中的逆转作用。更重要的是,本章将引入糖生物学(Glycobiology),探讨细胞表面糖链(糖萼)在细胞识别、免疫应答和病原体入侵中的非凡作用。 脂质章节将聚焦于细胞膜的流动性调控,以及鞘脂类(如神经酰胺)作为第二信使在细胞凋亡通路中的信号转导功能。 第二部分:能量代谢与生物合成的精巧工程 本部分深入解析细胞如何获取、转化和储存能量,并如何利用这些能量构建复杂的生物大分子。 第四章:线粒体:呼吸链与氧化磷酸化的能量工厂 我们将对电子传递链(ETC)中的各个复合物(I至IV)进行结构与功能的详细剖析,着重解释质子梯度是如何建立的。不同于仅描述ATP合酶的“旋转马达”模型,本章将探讨亚基间的耦合机制以及非偶联蛋白(UCPs)如何通过解偶联调节产热和代谢效率。 此外,线粒体DNA、其特有的复制和转录机制,以及线粒体在细胞凋亡中的“生死之门”角色,也将得到详尽论述。 第五章:光合作用的能量捕获与碳固定 针对真核生物和蓝细菌,本章将详细描绘光反应的两个半反应(PSI和PSII)如何协同工作,实现水的光解和NADPH的生成。重点讨论Z方案的能量流向,以及电子在细胞色素b6f复合体中的循环机制。 在碳固定部分,我们将深入分析卡尔文循环(C3途径)的三个关键阶段,并对比C4和景天酸代谢(CAM)植物为适应干旱环境而发展出的空间和时间分离的碳固定策略。 第六章:生物大分子的合成与组装 本章整合了遗传信息到功能蛋白的实现过程。在DNA复制方面,我们将探讨复制叉的结构、引物酶的角色以及DNA聚合酶的校对机制。转录部分将深入探究RNA聚合酶如何识别启动子,以及真核生物中复杂的转录因子调控网络。翻译部分将超越核糖体的基本工作流程,重点分析tRNA的身份识别机制、起始和终止密码子的识别细节,以及真核生物中对mRNA翻译的精确调控,如iRES(内部核糖体进入位点)介导的翻译调控。 第三部分:信号转导与细胞间通讯的复杂网络 生命系统依赖于精准的信号接收与传递,本部分将剖析这些网络的设计原理。 第七章:跨膜信号转导的层级放大 本章着重于细胞表面受体如何应对胞外信号。我们将详细分类G蛋白偶联受体(GPCRs)的激活机制,并解析第二信使系统(如cAMP/PKA和IP3/DAG/PKC)的级联放大效应。对于受体酪氨酸激酶(RTKs),我们将深入探讨其二聚化、自磷酸化以及下游招募信号分子(如Grb2-SOS-Ras)的精确时序。 信号转导中的负反馈与交叉对话机制,将被视为维持系统稳定性的关键设计。 第八章:细胞周期调控与癌症的分子基础 我们将把细胞周期视为一个高度精确的分子时钟。重点分析周期蛋白(Cyclins)和周期蛋白依赖性激酶(CDKs)的动态激活与失活。本书将详细阐述DNA损伤检查点(G1/S, G2/M)如何通过激活ATM/ATR通路,使p53等肿瘤抑制因子发挥作用。 癌症部分将从分子水平解释遗传的“失控”——原癌基因的激活(如Ras突变)与抑癌基因的失活(如Rb和p53的功能丧失)如何协同作用,导致细胞增殖失控。 第九章:免疫系统与分子识别 本章关注免疫系统的分子基础,特别是适应性免疫的关键。我们将探讨B细胞和T细胞受体(BCR/TCR)的基因重排(V(D)J重组)如何产生惊人的多样性。重点分析主要组织相容性复合体(MHC)I类和II类分子如何提呈抗原给CD8+和CD4+ T细胞。 此外,T细胞激活所需的共刺激信号(如CD28/B7)和免疫检查点(如PD-1/PD-L1)的分子机制,将被用来解释自身免疫病的分子根源和现代肿瘤免疫疗法的原理。 第四部分:生物化学方法学的未来展望 本部分将介绍现代生物化学研究中不可或缺的工具和技术,它们是推动前沿科学发现的驱动力。 第十章:结构解析与高通量组学技术 我们将介绍如何利用X射线晶体学、冷冻电镜(Cryo-EM)来解析大分子复合物的原子分辨率结构,并讨论这些技术在解析膜蛋白和动态过程中的优势与局限。在组学层面,本书将聚焦于蛋白质组学(Proteomics)的最新进展,特别是质谱技术(如SILAC, TMT)如何实现蛋白质的定量分析和翻译后修饰的位点鉴定。 此外,对代谢组学(Metabolomics)在追踪细胞内稳态变化中的应用也将进行阐述。 第十一章:生物化学在生物工程中的应用 本章探讨基础知识如何转化为实际应用。我们将深入分析基因编辑技术CRISPR-Cas9系统的分子机制——从细菌的免疫记忆到其在靶向修复和基因功能研究中的应用。酶工程部分将讨论如何通过定向进化和理性设计来优化工业用酶的催化效率和稳定性。 最后,我们将讨论基于生物化学原理的药物设计,包括小分子抑制剂如何精确地与活性位点结合,以及基于蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs)的靶向治疗策略。 本书力求以严谨的科学态度,融合最新的研究成果,为读者构建一个全面、深入且富有启发性的生物化学知识体系,使其能够理解和参与到生命科学的前沿对话中。

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用户评价

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这本书的排版和印刷质量简直是一场灾难。我拿到手的时候,就觉得纸张非常薄,有一种廉价感,翻页的时候甚至能听到纸张摩擦发出的那种令人不悦的沙沙声。更要命的是,图表的清晰度低得令人发指,很多关键的分子结构图和实验流程图,线条模糊不清,颜色也暗淡得厉害,看着它们就像是在努力辨认一团涂抹开的颜料。我记得有一次试图对照书中的一个电泳结果图来核对我的实验数据,结果因为图上条带的边界模糊,我足足浪费了半个小时去猜测那个真正的分子量范围。而且,书中的索引系统也设计得极其反人类,很多核心概念的交叉引用做得非常混乱,想快速定位某个特定技术步骤,简直比徒手从一堆酵母菌中分离出需要的菌株还要困难。说实话,对于一本厚重的专业参考书来说,这种糟糕的物理呈现直接影响了阅读体验和学习效率,让人怀疑出版社在制作过程中是否真的投入了哪怕是最基本的质量控制。我甚至在想,难道他们不是想出版一本工具书,而是想出版一本需要靠“想象力”来阅读的艺术品吗?

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这本书的叙述风格,恕我直言,简直就像是在听一位年迈的、思维跳跃的教授在午后进行一场没有明确重点的冗长独白。作者似乎认为读者已经对所有基础知识了如指掌,因此在介绍关键概念时,常常是三言两语带过,直接跳到了复杂模型的讨论,缺乏必要的循序渐进。例如,在讲解PCR的退火温度优化部分,作者直接抛出了一个复杂的离子强度校正公式,却没有花足够篇幅解释为什么这个公式在特定酶切体系中会失效,或者更基础地,为什么改变镁离子浓度会直接影响Taq酶的活性。我不得不频繁地停下来,查阅我收藏的那些被我视若珍宝的旧版教材,才能勉强跟上作者的思路。更令人沮丧的是,语言的组织结构松散,段落之间缺乏逻辑上的过渡句,读起来总有一种“嗯?我们刚才不是在讨论这个吗?”的错位感。这种阅读体验,对于初学者而言,是极其不友好的,它没有引导,只有不断地抛出挑战,让人感觉自己不是在学习,而是在接受一场突如其来的智力测验。

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我对于这本书中引用的实验案例和数据时效性的部分感到非常担忧。在快速迭代的分子生物学领域,一本出版已久的教材如果不进行及时更新,其参考价值会直线下降。我发现书中有好几处地方仍然在引用一些已经被更先进、更灵敏的技术所取代的经典方法,虽然作为历史背景尚可,但作者却将它们与最新的、主流的技术并置,却没有明确指出哪种方法在当前的实验室实践中更具优势或适用性。比如,对于某些蛋白质相互作用的研究,书中花费了大量篇幅介绍经典的双杂交筛选,而对近年来高通量的蛋白质组学技术如质谱联用(MS-MS)的介绍却寥寥无几,甚至有些过时。这给我一种强烈的错觉,仿佛我手中的是一本珍藏的“古籍”,而非一本指导我进行前沿实验操作的实用手册。对于需要紧跟科研前沿的硕士或博士研究生来说,这种知识的滞后性,无疑会浪费宝贵的时间在学习那些可能很快就会被淘汰的“过时技巧”上。

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这本书的章节组织结构显得非常混乱,完全没有遵循一个标准的、符合逻辑的研究流程来编排内容。通常,我们会期望从样本制备、核酸提取、扩增、克隆、到最终的测序或分析,形成一个清晰的知识链条,但在这本书里,这些步骤被割裂得支离破碎。比如,在介绍完复杂的基因编辑技术之后,作者突然插入了一个关于“细胞培养基配制”的简短章节,然后又跳回了T7启动子的详细讨论。这种“打乱顺序”的编排方式,让我在试图构建一个完整实验设计框架时,总是需要不断地在不同章节间来回翻阅。我不得不自己动手,用便利贴和荧光笔在目录上绘制我自己的逻辑图谱,试图将这些散落的知识点串联起来,否则根本无法形成一个完整的、可操作的技术流程认知。这完全偏离了一本“技能与策略”手册应有的实用性和指导性,更像是一本研究笔记的随意汇编。

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这本书在“策略”层面的探讨,显得极其空泛和缺乏实操性。当我们购买一本关于“技能和策略”的书籍时,我们期待的是能从中学到如何解决那些在实际操作中经常遇到的“灰色地带”问题——那些教科书上不会写明,但却是实验成功的关键。然而,本书在介绍实验设计时,过多地停留在了理论假设的层面,对于如何应对实验失败、如何设计有效的阴性对照或阳性对照的“策略性思考”,却着墨甚少。我最需要的是关于“故障排除”的详尽指导,例如,为什么我的RT-qPCR反应总是Ct值漂移?面对高背景的测序结果,我应该优先排查哪几个环节?这些具体、细微的经验总结在这本书里几乎找不到,取而代之的是一些过于宏大、如同哲学思辨般的讨论,这对于需要立刻解决眼前实验难题的我来说,价值微乎其微。它更像是一部理论综述,而不是一本能陪伴我度过无数个通宵实验的“实战手册”。

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