Principles and Technical Aspects of PCR Amplification pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:

作者:Van Pelt-verkuil, Elizabeth/ Van Belkum, Alexander/ Hays, John P.

出品人:

页数:344

译者:

出版时间:2008-3

价格:$ 134.47

装帧:

isbn号码:9781402062407

丛书系列:

图书标签:

• PCR
• 分子生物学
• DNA扩增
• 聚合酶链式反应
• 生物技术
• 基因检测
• 实验室技术
• 生命科学
• 遗传学
• 生物医学

好的，以下是一份关于 不包含 《Principles and Technical Aspects of PCR Amplification》内容的图书简介，旨在详细介绍另一本聚焦于分子生物学实验技术、涵盖广泛主题的专业书籍。 --- 书名： 高级分子生物学实验技术：从基因克隆到蛋白质组学分析 作者： [此处可填入虚构的专家姓名，例如：Dr. Eleanor Vance, Prof. Kenji Tanaka] 出版社： [此处可填入虚构的专业出版社名称，例如：Apex Scientific Publishing] ISBN： [此处可填入虚构的ISBN，例如：978-1-945678-90-1] 页数： 约 1200 页 --- 图书简介：全面深入的分子生物学实验指南 《高级分子生物学实验技术：从基因克隆到蛋白质组学分析》 是一部为分子生物学、生物化学、生物技术以及相关生命科学领域的研究人员、高级本科生和研究生精心打造的权威参考书。本书旨在超越基础实验方法的描述，深入探讨现代分子生物学实验室中所需掌握的复杂技术、优化策略以及前沿应用。 本书的宗旨是提供一个实践性强、理论基础扎实的综合平台，覆盖从核酸操作到蛋白质功能研究的全链条核心技术。它不局限于单一技术领域，而是致力于构建一个跨学科的知识体系，使用户能够理解不同实验方法之间的内在联系，并在设计复杂实验方案时做出最优决策。 第一部分：核酸操作与基因组学基础 本部分奠定了分子生物学实验的基石，重点在于对遗传物质的精确获取、修饰与分析。 第一章：高质量核酸的提取与纯化 详细阐述了从不同生物材料（包括植物组织、血液、细菌和冷冻组织块）中提取高纯度、高分子量DNA和RNA的优化流程。内容涵盖了苯酚-氯仿抽提的理论优化、基于硅胶柱的快速纯化系统的选择标准，以及应对复杂样本（如富含多糖或蛋白质酶的样本）的特殊策略。特别强调了RNA完整性评估（如Agilent Bioanalyzer的应用）及其对下游逆转录和定量分析的影响。 第二章：现代分子克隆策略 本书对传统的限制性内切酶克隆方法进行了回顾，但核心聚焦于高效、无缝的现代克隆技术。深入探讨了Gibson组装、CPEC (Circular Polymerase Extension Cloning) 和 SLIC (Sequence and Ligation Independent Cloning) 的机制、适用范围及疑难解答。详细比较了不同载体系统（如酵母双杂交载体、哺乳动物表达载体）的元件设计，以及如何通过Gateway™ 或 TOPO® 系统实现高通量、模块化的基因操作。 第三章：基因组分析与测序前准备 本章侧重于基因组范围内的分析。除了标准的Southern Blotting技术外，重点介绍了宏基因组学文库的构建，包括DNA打断、加尾、接头连接的参数控制。关于新一代测序（NGS）文库制备的讨论尤为详尽，分析了不同测序平台（Illumina, PacBio, Oxford Nanopore）对文库质量的具体要求，并教授如何诊断和解决文库质量偏差导致的测序失败问题。 第二部分：转录组学与基因表达调控研究 本部分深入探讨基因表达的各个层面，从RNA的定量到功能验证。 第四章：精确的RNA定量与差异表达分析 虽然不详述PCR本身（此为另一专著领域），但本章详细论述了实时荧光定量技术（qPCR）在标准化表达分析中的应用，包括内参基因的选择、绝对定量与相对定量的验证步骤。更重要的是，本章投入大量篇幅讲解全长cDNA文库制备和RNA-Seq文库构建的复杂流程，包括如何有效捕获mRNA或分析非编码RNA。内容包含了处理批次效应（Batch Effect）和数据归一化（Normalization）的先进统计学方法。 第五章：表观遗传学标记的检测 表观遗传学是当前研究热点。本章细致描述了ChIP-seq (Chromatin Immunoprecipitation followed by Sequencing) 的全流程优化，重点在于交联效率的验证、抗体选择的严格标准，以及染色质免疫沉淀后DNA片段的选择性富集技术。此外，书中还涵盖了MeDIP-seq（甲基化DNA免疫沉淀测序） 和ATAC-seq（Assay for Transposase-Accessible Chromatin using sequencing） 的技术原理及数据解读。 第六章：基因沉默与编辑技术 本部分聚焦于功能研究的强有力工具。详细解析了siRNA/shRNA 设计和转染效率优化的实验参数。在基因编辑方面，本书提供了关于CRISPR/Cas9 系统的深入应用指南，包括sgRNA的设计软件选择、靶向脱靶效应的评估方法（如GUIDE-seq），以及Prime Editing 和 Base Editing 技术的最新进展和实验室操作注意事项。 第三部分：蛋白质研究：分离、鉴定与功能分析 本部分将读者的视野从核酸转移至蛋白质世界，涵盖了蛋白质组学分析的核心技术。 第七章：蛋白质的提取、分离与鉴定 本章详述了从细胞裂解到蛋白质分离的精细步骤。内容涵盖了不同裂解液（温和型、强变性型）的选择、膜蛋白提取的优化技巧，以及二维凝胶电泳（2D-PAGE） 的高分辨率分离技术。在蛋白质鉴定方面，重点在于液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS） 的前处理优化（如酶切、标记），以及如何利用肽段谱图数据进行可靠的蛋白质定量和翻译后修证（PTM）分析。 第八章：蛋白质相互作用研究 蛋白质的相互作用网络是理解细胞功能的关键。本书详细介绍了酵母双杂交（Y2H）系统（包括构建文库的注意事项和假阳性筛选策略）和共免疫沉淀（Co-IP） 的优化。对于体内相互作用的分析，重点介绍了基于抗体的蛋白质相互作用分析（AP-MS） 的实验设计，强调了对照组设置的严格性以避免非特异性结合。 第九章：功能性蛋白质分析与细胞成像 本章关注于蛋白质的功能性验证和定位。深入探讨了Western Blotting 的抗体孵育优化、信号检测的线性范围确定，以及如何使用荧光标记和FRET/BRET技术实时监测蛋白质的动态过程。对于蛋白质的体外活性测定，本书提供了针对特定酶类（如激酶、磷酸酶）的高通量筛选（HTS） 实验平台的建立指南。 总结与展望 《高级分子生物学实验技术》的特点在于其深度、广度与前沿性。它不仅是一本实验手册，更是一个解决复杂问题的思维框架。通过对每项技术的原理、潜在陷阱（Troubleshooting）以及最新仪器平台的整合描述，本书确保读者能够掌握从基础操作到尖端研究的全部关键技能，为推动生命科学的未来发现奠定坚实的技术基础。本书是每一个严肃的分子生物学家工具箱中不可或缺的资源。

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