Two Dimensional Electrophoresis Protocols pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:

作者:Sheehan, David (EDT)

出品人:

页数:560

译者:

出版时间:2009-4

价格:$ 145.77

装帧:

isbn号码:9781588299376

丛书系列:

图书标签:

• 蛋白质组学
• 二维电泳
• 蛋白质分析
• 生物化学
• 分子生物学
• 实验方案
• 蛋白质分离
• 生物技术
• 分析化学
• 生命科学

《蛋白质组学的前沿技术：高分辨率分离与鉴定》 本书简介 在生命科学的广袤领域中，理解蛋白质的功能、结构及其在生命活动中的动态变化，是揭示生命奥秘的核心。蛋白质组学（Proteomics）作为一门新兴学科，正以前所未有的深度和广度，解析细胞、组织乃至整个生物体中所有蛋白质的集合。本书《蛋白质组学的前沿技术：高分辨率分离与鉴定》旨在为该领域的科研工作者、技术人员及高年级学生提供一套全面、深入且极具实践指导意义的技术手册和理论参考。 本书的核心聚焦于蛋白质组学研究中至关重要的分离、纯化与鉴定技术链条，特别是那些在当前研究中展现出强大分离能力和高通量潜力的先进方法。我们规避了对基础电泳原理的冗余阐述，转而将笔墨集中于多维分离策略的优化、新型色谱介质的应用，以及高分辨率质谱（MS）数据分析的精深技巧。 第一部分：蛋白质组学基础与研究设计 本部分首先快速回顾了蛋白质组学研究的整体流程，强调了在实验设计阶段，如何根据研究目标（如差异表达分析、翻译后修饰鉴定或蛋白质相互作用组研究）来选择最优化的技术组合。我们深入探讨了样本制备的“陷阱”与“突破点”，包括细胞裂解液的优化、去污染策略（如磷脂、核酸去除）的精细控制，以及如何确保蛋白质的完整性和可分析性，尤其是在处理复杂生物学基质（如组织匀浆、体液或微生物样品）时。 第二部分：高分辨率分离技术——超越传统二维方法的策略 传统的蛋白质分离技术在面对复杂样本时，其分辨率和载样量已逐渐成为制约分析深度的瓶颈。本部分是本书的技术核心，详细阐述了当前最前沿的、旨在实现更高分离效率的多维策略。 2.1 液相色谱（LC）的精细调控与集成 我们详尽介绍了超高效液相色谱（UHPLC）在蛋白质组学中的应用，重点分析了不同粒径填料（如亚2微米或纳米级颗粒）对保留时间稳定性和峰形分离度的影响。更进一步，本书系统梳理了亲水作用色谱（HILIC）在分离极性肽段和特定修饰肽段中的独特优势，并将其与反相色谱（RP-LC）进行高效的二维联用（2D-LC）策略设计。对于更复杂的批次分析，本书提供了关于多维色谱柱串联（e.g., Nano-LC x Nano-LC）的系统搭建指南，包括流动相缓冲液的梯度设计、pH控制的微妙影响，以及如何实现数小时超长梯度的系统稳定性。 2.2 离子交换与疏水相互作用的智能组合 我们详细探讨了强阳离子交换（SCX）和弱阳离子交换（WAX）在初级分离中的应用，着重于如何利用这些技术来平衡不同pI值蛋白质的分离。此外，本书专门开辟章节讨论了混合模式色谱（Mixed-Mode Chromatography），这种技术结合了离子交换和疏水作用力，极大地拓宽了分离的维度，尤其适用于对pH敏感的蛋白质亚基分离。 第三部分：质谱鉴定与定量分析的深度挖掘 分离的目的是高效的质谱分析。本书假设读者已掌握基础的质谱原理，并将重点放在如何利用先进的质谱平台来最大化数据质量和分析深度。 3.1 肽段的酶解策略与修饰富集 我们深入剖析了胰蛋白酶（Trypsin）以外的多种酶（如Glu-C, Asp-N, Lys-C）在特定研究目的下的应用选择，强调了酶切效率与肽段覆盖度之间的平衡。对于翻译后修饰（PTMs）的研究，本书详尽介绍了磷酸化、糖基化、乙酰化等关键修饰的高效富集技术。这包括新型亲和层析材料（如TiO2、金属氧化物亲和层析FeIMAC）的选择性优化，以及如何通过化学修饰手段（如特定试剂的选择性标记）来增强目标修饰肽段的质谱信号。 3.2 高分辨率质谱的数据采集与处理 本书详细介绍了数据依赖采集（DDA）和数据非依赖采集（DIA）的优劣势，并重点介绍了靶向定量策略（Targeted Proteomics）的实施。对于高通量数据，我们提供了关于如何使用Orbitrap、Q-TOF等高分辨率/高准确度质谱仪进行参数优化的指导，例如如何精确控制扫描速度、碰撞能量（HCD/ETD）以获取高质量的碎片离子谱（MS/MS）信息。 3.3 生物信息学：从原始数据到生物学结论 在数据分析部分，本书摒弃了对基础数据库搜索软件（如Mascot, Sequest）的简单介绍，转而聚焦于高阶统计分析与数据整合。我们详细阐述了如何使用现代统计模型（如MaxQuant, Proteome Discoverer中的特定算法）进行定量的偏差校正、缺失值处理，以及如何进行多组学数据集成（如结合转录组数据）以提升生物学解释的可靠性。特别地，本书包含了关于网络拓扑分析和通路富集分析中参数设定的详细指南，确保研究者能够从海量数据中提炼出具有显著生物学意义的蛋白组学特征。 目标读者 本书面向所有致力于开展蛋白质组学研究的科研人员，特别是那些希望将研究推向高分辨率、高通量前沿的实验室，以及需要深入理解复杂分离和质谱数据解读的高级研究生和博士后。通过本书的学习，读者将能够设计出更具深度和可重复性的蛋白质组学实验方案，有效克服现有技术瓶颈，从而推动基础生命科学和临床转化医学的研究进展。

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我对《Two Dimensional Electrophoresis Protocols》这本书充满了好奇。作为一名即将进入实验室进行毕业设计的学生，我接触到的许多实验技术都需要依靠具体的实验手册来指导。二维电泳是我将要接触的一项重要技术，但我对其了解还非常有限，仅仅停留在理论课本上。这本书的名字让我感到非常贴切，因为它强调的是“Protocols”，也就是详细的操作规程。我希望这本书能够像一位经验丰富的老师一样，一步一步地教我如何进行二维电泳。我希望它能够从最基础的样品准备开始，详细讲解如何提取和溶解蛋白质，如何选择合适的等电聚焦范围，以及如何进行第二维的 SDS-PAGE 分离。我特别需要书中能够包含清晰的图示和详细的步骤说明，让我能够准确地模仿操作。此外，我也希望这本书能够提供一些关于常见错误和注意事项的提示，帮助我避免在实验中走弯路。我希望这本书能够让我对二维电泳有一个全面而深刻的认识，并能够独立完成相关的实验操作，为我的毕业设计打下坚实的基础。

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我最近刚入手了一本名为《Two Dimensional Electrophoresis Protocols》的书，虽然我还没来得及深入阅读，但仅从初步的翻阅来看，我对它充满了期待。作为一名初涉蛋白质组学研究的学生，二维电泳对我来说就像一座神秘而充满挑战的大山，我一直渴望找到一本能够带领我攀登的向导。这本书的标题就直接点明了主题，让我感到非常有针对性。我特别关注它的“Protocols”部分，这通常意味着书中会提供详细、步骤化的操作指南，而不是泛泛而谈的理论介绍。我希望它能够细致地讲解从样品制备、第一维等电聚焦到第二维 SDS-PAGE 的每一个环节，包括可能遇到的问题以及如何解决。我尤其希望能看到针对不同类型样品（例如组织、细胞、血液等）的优化方案，因为我的实验课题涉及到多种生物样品。此外，如果书中还能提供一些关于凝胶成像、图像分析以及数据解读的建议，那就更完美了。目前，我最大的担忧是技术细节的严谨性和实用性，我希望这本书能够真正反映实验室的实际操作经验，而不是纸上谈兵。从封面设计和排版上看，这本书显得比较专业，这让我对内容的质量有了初步的信心。我非常期待能够通过这本书，掌握二维电泳这项核心技术，为我的科研之路打下坚实的基础。

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这本书的出现，无疑是我近期科研生涯中的一抹亮色。我所在的实验室在蛋白质组学研究方面有很强的需求，而二维电泳作为一种经典而强大的技术，一直是我们关注的重点。尽管我们有资深的导师和技术人员，但总觉得在某些细节的处理上，尤其是对于一些复杂的样品，我们仍然缺乏系统性的指导。《Two Dimensional Electrophoresis Protocols》这本书恰好填补了这一空白。我之所以选择它，是因为它不仅仅提供理论知识，更重要的是它提供了“Protocols”，也就是具体的实验方案。我非常看重这一点，因为在实验操作中，细节决定成败。我希望这本书能够详细阐述如何准备不同类型的样品，如何选择合适的等电聚焦缓冲液和 pH 梯度，以及如何进行 SDS-PAGE 分离。更重要的是，我期待它能提供一些关于优化实验条件的建议，例如温度、电压、时间等参数的调整，以及如何处理常见的副反应，如蛋白质沉淀、条带模糊等。当然，一本好的实验指导书也应该包含图像分析和数据解读的部分，因为二维电泳的最终目的是为了鉴定和量化蛋白质。我希望这本书能在这方面给出一些实用的指导，帮助我们更好地理解和利用实验结果。总的来说，我对这本书的期望很高，希望它能成为我们实验室进行二维电泳研究的得力助手。

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作为一名长期在蛋白质组学领域摸爬滚打的研究者，我深知二维电泳技术的复杂性和精密度。市场上关于二维电泳的书籍不少，但真正能够称得上是“实用指南”的却并不多。《Two Dimensional Electrophoresis Protocols》这本书，以其直观的书名，立刻吸引了我的注意。我过去在操作二维电泳时，常常会遇到一些难以预料的问题，例如样品的溶解度、等电点的重叠、以及第二维分离的效率等等。我希望这本书能够深入浅出地解析这些问题，并提供切实可行的解决方案。我特别关注它的“Protocols”部分，我希望能看到涵盖各种情况下的详细实验流程，包括不同来源样品的处理方法（例如，膜蛋白、分泌蛋白、核蛋白等），以及针对不同分辨率需求的凝胶配置。我期待书中能提供一些关于选择合适的IPG条、选择合适的SDS-PAGE凝胶浓度以及电泳条件的建议。此外，对于二维电泳结果的分析，例如如何有效地进行斑点切割、质谱鉴定，以及如何进行定量分析，我都希望能从中获得更深入的指导。我希望这本书不仅仅是一本操作手册，更能帮助我们理解背后的科学原理，从而更好地优化实验设计和结果解读。

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我一直对二维电泳技术在蛋白质组学研究中的应用非常感兴趣，并且一直在寻找一本能够系统性地介绍这项技术的书籍。《Two Dimensional Electrophoresis Protocols》这本书，以其明确的主题和“Protocols”的定位，让我看到了深入掌握这项技术的希望。我期望这本书能够提供全面的实验操作指南，涵盖从样品制备、蛋白质提取、等电聚焦、SDS-PAGE 分离到最终的凝胶成像和数据分析的全过程。我特别希望能看到书中能够提供针对不同类型样品（如植物组织、细菌、酵母等）的优化方案，以及应对特殊挑战（如低丰度蛋白质的检测、高背景干扰等）的策略。我希望书中能够详细解释不同参数（如 pH 梯度、SDS 浓度、电压、时间等）对分离效果的影响，并提供相应的优化建议。此外，我也希望这本书能够包含一些关于二维电泳结果的解读和生物信息学分析的指导，帮助我更好地理解和利用实验数据。我希望这本书能够成为我进行蛋白质组学研究的可靠参考，帮助我更有效地设计和执行实验，并从中获得有价值的科学发现。

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