医学生物化学与分子生物学实验教程 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:

作者:揭克敏 编

出品人:

页数:166

译者:

出版时间:2008-6

价格:19.80元

装帧:

isbn号码:9787030218346

丛书系列:

图书标签:

• 生物化学
• 分子生物学
• 医学实验
• 实验教程
• 医学生
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• 教学参考
• 科研
• 医学
• 生物学

《生物学前沿技术与应用：从基础理论到实践操作》 图书简介 本书旨在为生物科学及相关领域（如生物医学、生物工程、药学等）的本科生、研究生以及科研人员提供一个全面、深入且高度实用的技术指南。本书聚焦于当前生物学研究中最核心、最具前沿性的实验技术与方法，并强调理论知识与实际操作的紧密结合，致力于培养读者独立设计、执行和分析复杂生物学实验的能力。 第一部分：分子生物学核心技术：深度解析与优化 本部分系统梳理了分子生物学领域最为基础和关键的技术体系，并引入了近年来发展起来的高效优化策略。 第一章：核酸的分离、纯化与定量 高质量核酸提取的挑战与策略： 详细阐述了从不同生物样本（如血液、组织、细胞培养物、植物组织等）中提取高纯度、高完整性DNA和RNA的最新方法。重点对比了硅胶柱法、酚氯仿萃取法以及磁珠法在效率、成本和适用性上的差异。 核酸的微量定量与质量评估： 深入探讨了紫外分光光度法、荧光定量法（如Qubit、NanoDrop）的应用细节，特别是如何利用A260/A280、A260/A230比值评估核酸的纯度，并介绍了使用毛细管电泳（如Agilent Bioanalyzer）进行片段分析和完整性评估的流程。 基于电泳和杂交的技术： 涵盖了琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的原理、操作技巧及结果判读。对Southern Blotting、Northern Blotting的原理、探针设计、高灵敏度检测方法的优化进行了详尽的讲解。 第二章：聚合酶链式反应（PCR）及其衍生技术 基础PCR的优化参数： 详细分析了Taq酶的选择、引物设计的原则（Tm值、二聚体预测）、退火温度的精确控制以及缓冲液体系对扩增效率和特异性的影响。 实时荧光定量PCR（qPCR/RT-qPCR）： 深入讲解了SYBR Green染料法和TaqMan探针法的反应动力学、标准曲线的建立、Ct值的可靠性分析，以及用于基因表达差异分析的$DeltaDelta$Ct法操作规范和潜在误差来源。 高级PCR技术： 涵盖了高保真PCR（如Pfu酶的应用）、反转录PCR（RT-PCR）的优化、长片段PCR（Long PCR）的挑战，以及数字PCR（dPCR）在绝对定量中的突破性应用。 第三章：基因克隆与重组DNA技术 限制性内切酶的策略应用： 不仅是酶的选择，更侧重于“粘性末端”与“平末端”的连接策略，以及酶切反应体系的优化。 载体选择与构建： 详述了原核表达载体（如pET系列）、真核表达载体（如CMV启动子载体）和慢病毒载体（Lentiviral Vectors）的结构特点、功能元件分析及其在特定研究中的适用性。 高效连接技术： 对传统T4 DNA连接酶法进行了细致讲解，并重点介绍了更快速、更高效的连接方法，如Gibson Assembly、TOPO克隆和Gateway重组系统的工作原理与操作流程。 转化与筛选： 比较了感受态细胞的制备（热激法、电穿孔法）的优劣，以及抗生素筛选、蓝白斑筛选的精确操作指南。 第二部分：蛋白质组学基础：从表达、纯化到功能验证 本部分侧重于蛋白质的制备、分离纯化、结构分析及相互作用研究。 第四章：蛋白质的表达与获取 原核表达系统优化： 针对异源蛋白在E. coli中易形成包涵体的难题，详细介绍了诱导剂（IPTG/阿拉伯糖）浓度、诱导温度、共表达伴侣蛋白对溶解性表达的改善策略。 真核表达系统： 比较了哺乳动物细胞（CHO, HEK293T）、昆虫细胞（Baculovirus系统）的表达优势，特别是糖基化模式对下游功能的影响。 体外翻译系统（Cell-Free Systems）： 介绍了利用Wheat Germ Extract (WGE) 或Rabbit Reticulocyte Lysate (RRL) 进行快速、无细胞表达的优势与局限性。 第五章：蛋白质的分离与纯化 层析技术深度解析： 详细拆解了凝胶过滤（尺寸排阻）、离子交换（IEX）、疏水作用层析（HIC）和亲和层析（Affinity Chromatography，特别是His-tag，GST-tag的捕获与洗脱策略）的理论基础和操作流程。 一步纯化与多步串联层析： 提供了针对高丰度和低丰度目标蛋白的“捕获-中纯化-抛光”三步纯化策略设计实例。 膜蛋白的提取与纯化： 专门讨论了去污剂的选择（Detergent Screening）、去污剂的置换技术在维持膜蛋白活性中的关键作用。 第六章：蛋白质结构与相互作用分析 电泳与印迹技术： 详述了SDS-PAGE的分辨率优化，Western Blotting的抗体选择、封闭条件、显影技术（化学发光、荧光检测）的灵敏度提升。 质谱（MS）在蛋白质组学中的应用： 概述了蛋白质的酶解（胰酶/胰凝蛋白酶）、肽段分离（LC）和质谱分析（MALDI-TOF, ESI-MS/MS）的基本流程，侧重于蛋白质鉴定和翻译后修饰（PTM）的分析。 蛋白质相互作用研究： 深入介绍酵母双杂交（Y2H）的筛选策略、Co-IP/Co-IP-MS技术的操作细节，以及表面等离子共振（SPR）和生物层干涉（BLI）等生物物理学方法在定量分析结合动力学方面的应用。 第三部分：细胞生物学与成像技术：可视化与功能探究 本部分聚焦于活细胞和固定样本的观察、标记与功能分析。 第七章：细胞培养与无菌操作的严谨性 基础培养技术： 涵盖了原代细胞分离、传代培养、细胞冻存与复苏的最佳实践，以及对污染源的识别与控制。 无菌环境的维护与验证： 强调了层流罩、CO2培养箱的日常维护规范，以及微生物污染（细菌、支原体）的快速检测方法。 特殊细胞体系培养： 介绍了干细胞（如iPSC, MSC）的维持培养、分化诱导的标准化操作流程。 第八章：细胞和组织的原位分析与成像 免疫组织化学（IHC）与免疫细胞化学（ICC）： 详细讲解了固定（甲醛、石蜡包埋）、抗原修复（热修复/酶修复）的重要性，以及一抗/二抗的滴度优化与染色背景的控制。 免疫荧光（IF）技术： 重点对比了单色、多重荧光标记的技术方案，并介绍了共定位分析（如Colocalization Coefficient）的方法。 荧光显微成像原理与实践： 覆盖了明场、相差、DIC等传统模式，并深入阐述了共聚焦显微镜（Confocal Microscopy）的光栅扫描原理、Z轴堆叠（Z-stacking）技术、以及荧光漂白和光毒性的规避。 第九章：细胞功能研究的动态方法 流式细胞术（FACS）： 详细解释了荧光激活细胞分选的基本原理，包括补偿（Compensation）的设置、补偿矩阵的建立，以及基于大小（FSC/SSC）和荧光参数的多参数分群策略。 细胞增殖与凋亡检测： 介绍了MTT/CCK-8法、BrdU掺入法、Annexin V/PI联合染色法在评估细胞活力和死亡率中的标准化操作。 钙信号与报告基因系统： 探讨了使用荧光探针（如Fura-2/AM）监测细胞内钙离子动态变化的技术，以及基于报告基因（如Luciferase, GFP）的转染效率评估和信号输出分析。 第四部分：生物信息学基础与数据整合 本部分将实验操作与数据解读相结合，是现代生物学研究不可或缺的环节。 第十章：序列数据处理与分析 基因/蛋白质数据库检索： 教授如何熟练使用NCBI（GenBank, PubMed）、UniProt、Ensembl等核心数据库进行信息获取和比对。 BLAST分析的参数设置与结果解读： 强调了选择合适的BLAST程序（blastn, blastp, tblastn）以及有效利用E值、覆盖率进行同源性判断。 RNA-Seq数据初步分析： 概述了从原始测序数据（FASTQ）到差异表达基因列表（DEG）的简化流程，包括质量控制、比对和标准化计数。 结论与展望 本书的最终目标是搭建一座连接实验室操作台与前沿科学发现的桥梁。通过对这些核心技术的系统学习和反复实践，读者将能掌握现代生物学研究的“通用语言”，为未来在学术界或工业界的研究打下坚实的基础。本书特别强调了实验设计中的可重复性、数据质量控制的重要性，并对未来（如单细胞测序、基因编辑技术在临床转化中的应用）的发展趋势进行了简要的展望。

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关于实验安全和规范性方面，这本书的处理达到了专业水准。在每一个实验项目开始前，都有专门的安全注意事项和废弃物处理指南，措辞严谨，毫不含糊。它强调的不仅仅是“不要做什么”，更是“为什么不能做”，比如操作生物安全柜时的气流要求、如何正确佩戴防护用具等，这些都是在真实实验室环境中至关重要的生存法则。我个人认为，一本好的实验教程，除了传授技术，更重要的是培养科学家的严谨态度和责任心，这本书在这方面做得非常出色。它成功地将实验室的“规矩”和“科学精神”无缝地融入了实验步骤之中，让人在操作的同时，就能形成良好的习惯。

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另一个值得称赞的地方是其配套资源的丰富性（虽然我主要看的是纸质版，但能感受到背后的支持）。书中的许多实验步骤都明确指出了可参考的权威文献或标准操作流程（SOP），这为我后续想要深入研究某个技术点提供了清晰的导航。此外，书中对实验结果的分析和数据处理部分也给予了足够的篇幅，很多关于统计学在生物实验中应用的部分讲解得非常透彻，避免了学生在拿到数据后不知所措的窘境。这本书不仅仅是一本操作手册，更像是一位经验丰富的导师，它不仅教你如何把实验做对，更教你如何科学地解读实验结果，并在此基础上提出新的假设，这种启发性，是许多纯粹技术手册所不具备的宝贵财富。

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从内容覆盖的广度来看，这本书的编排逻辑非常流畅。它并没有将生物化学和分子生物学割裂开来，而是巧妙地将两者结合，形成了一个从基础物质代谢到基因调控的完整知识体系。课程的组织结构仿佛是一条精心铺设的路径，从宏观的细胞结构入手，逐步深入到蛋白质的功能分析、核酸的提取与定量，再到更高级的基因表达调控实验。这种递进式的安排极大地减轻了我的学习负担，因为每学完一个模块，都能感觉到知识点之间是相互支撑的，而不是孤立的知识点堆砌。而且，书中还穿插了一些经典的科学案例，这些案例的引入，让原本枯燥的实验操作变得生动起来，让人更能体会到科研的魅力和实际应用价值。

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翻开内页，最让我印象深刻的是它详尽的实验指导部分。这不是那种只告诉你“A加B等于C”的简单罗列，而是深入到了每一步操作背后的原理，以及可能出现的误差来源和应对策略。比如在进行DNA提取时，它不仅列出了试剂的配比，还细致地解释了为什么需要使用特定的缓冲液，不同温度对酶活性的影响，甚至还配有大量流程图和实物照片的对比，这对于初学者来说简直是救星。我记得有一次我在做PCR扩增时遇到了扩增效率低的问题，翻阅这本书后，我找到了针对性的排查步骤，很快就锁定了可能是引物二聚体的问题。这种手把手的、带着“为什么”的指导，让我感觉自己不是在照本宣科，而是在真正理解生物化学的运作机制。

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这本《医学生物化学与分子生物学实验教程》的封面设计得非常专业，色彩搭配稳重大气，一看就知道是严肃的学术用书。我拿到手的时候，首先被它厚实的质感吸引了，纸张的质量也很好，印刷清晰，即便是复杂的分子结构图和实验流程图，也看得非常清楚，这对于我们动手操作实验来说太重要了。书脊的处理也很到位，翻阅起来非常顺手，不会有那种新书太紧绷的感觉。而且，它的大小适中，方便携带，放在实验台上也不会占用太多的空间。整体来看，这本书在装帧设计上就已经体现了对读者的尊重和对实验严谨性的追求，这是很多基础教材不太注意的细节，但恰恰是这些细节，让我在开始学习之前就建立起了对它的信任感。

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