Plant Cell Culture Protocols (Methods in Molecular Biology) pdf epub mobi txt 電子書下載2026

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出版者:Humana Press

作者:Loyola-Vargas, Victor M. 編

出品人:

頁數:416

译者:

出版時間:2005-11-01

價格:USD 125.00

裝幀:Hardcover

isbn號碼:9781588295477

叢書系列:

圖書標籤:

Plant Cell Culture
Plant Biotechnology
Cell Culture Protocols
Molecular Biology
Plant Science
Laboratory Protocols
Tissue Culture
In Vitro
Plant Physiology
Genetic Engineering

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具體描述

This work is a comprehensive state-of-the-art collection of the most frequently used techniques for plant cell and tissue culture. Readily reproducible and extensively annotated, the methods range from general methodologies, such as culture induction, growth and viability evaluation, and contamination control, to such highly specialized techniques as chloroplast transformation involving the laborious process of protoplast isolation and culture. Most of the protocols are currently used in the research programs of the authors or represent important parts of business projects aimed at the generation of improved plant materials. Two new appendices explain the principles for formulating culture media and the composition of the eight most commonly used media formulations, and list more than 100 very useful Internet sites.

好的，這是一份關於《Plant Cell Culture Protocols (Methods in Molecular Biology)》之外的其他分子生物學方法的圖書簡介，旨在提供詳盡的替代性或補充性技術內容，避免提及原書的任何細節。 --- 精選分子生物學技術手冊：前沿與經典方法深度解析圖書名稱：分子生物學實驗技術：從基因組到蛋白質的高級解析策略 ISBN：（此為虛構ISBN，為排版需要）978-1-2345-6789-0 頁數：約1500頁定價：￥599.00 --- 內容概述本書是一部麵嚮分子生物學研究人員、生物技術專傢及高年級學生的綜閤性實驗指南。它聚焦於當前生命科學研究中最核心、最具挑戰性的幾大領域：基因組編輯與調控、高通量測序數據分析、蛋白質組學深度挖掘，以及復雜生物過程的活細胞成像技術。本書摒棄瞭基礎的分子剋隆步驟，直接深入到需要精密操作和高階分析技巧的前沿技術棧，旨在成為實驗室中應對復雜實驗難題的“即插即用”工具書。全書結構嚴謹，采用模塊化設計，每個章節都由該領域的資深學者撰寫，確保協議的準確性、可重復性與時效性。 --- 核心章節深度導覽本書共分為六個主要部分，詳細覆蓋瞭當前分子生物學研究的熱點和難點。第一部分：高級基因組操作與穩定修飾技術本部分詳細介紹瞭超越傳統載體轉染的復雜基因組編輯策略。 1. CRISPR/Cas 係統的精細調控：重點闡述瞭如何優化 sgRNA 設計以降低脫靶效應，探討瞭堿基編輯（Base Editing）和先導編輯（Prime Editing）在哺乳動物細胞和特定模式植物（如擬南芥、煙草）中的應用細則。詳細描述瞭體內（in vivo）和體外（in vitro）的核酸酶活性檢測方法，包括限製性片段長度多態性（RFLP）與高分辨率熔解麯綫分析（HRM）。 2. 非整閤性病毒載體係統：深入探討瞭腺相關病毒（AAV）和慢病毒（Lentivirus）載體的包裝優化、滴度測定（qPCR法）以及安全性評估。特彆關注瞭如何利用這些係統進行穩定遺傳修飾，而非僅用於瞬時錶達。 3. 錶觀遺傳調控的解析：詳細介紹瞭染色質免疫沉澱測序（ChIP-seq）從樣本製備到數據分析的全流程，包括針對稀有細胞群的微量ChIP優化方案。此外，還收錄瞭對DNA甲基化（如WGBS和MeDIP）和組蛋白修飾的高特異性抗體篩選與驗證流程。第二部分：高通量測序數據處理與生物信息學整閤本部分聚焦於從原始數據（Raw Data）到生物學結論的轉化過程，為研究人員提供實用的數據處理腳本和算法解讀。 1. RNA-Seq 數據分析管綫構建：提供瞭從 FASTQ 文件質量控製（FastQC）、比對（STAR/HISAT2）、定量（Salmon/Kallisto）到差異錶達分析（DESeq2/EdgeR）的一套標準化的Linux/R腳本流程。特彆包含瞭針對非模式生物或轉錄組組裝的De Novo策略。 2. 單細胞測序（scRNA-seq）數據降維與聚類：詳細講解瞭Seurat和Scanpy工具包的高級功能，包括雙細胞/雙核數據去批次效應（如Harmony、BBKNN）的原理與實施，以及細胞亞群的軌跡推斷（如Monocle3/PAGA）。 3. 宏基因組學與微生物組學分析：覆蓋瞭16S rRNA測序和全基因組 Shotgun 測序（WGS）的數據處理，重點在於功能預測（PICRUSt2）和物種豐度評估（QIIME2工作流程）。第三部分：蛋白質組學與相互作用組學該部分旨在幫助研究人員精確鑒定和量化蛋白質的錶達、修飾狀態及其相互作用網絡。 1. 基於質譜的蛋白質組學工作流程：詳細介紹瞭細胞裂解液的優化（去鹽、去脂質），以及TMT/iTRAQ多肽標記策略。著重講解瞭肽段富集技術（如磷酸化肽段的TiO2或IMAC富集），以及數據處理軟件（如MaxQuant/Proteome Discoverer）的參數設置技巧。 2. 蛋白質-蛋白質相互作用（PPI）的驗證：除瞭傳統的酵母雙雜交（Y2H）篩選，本書重點介紹瞭生物分子互作測量（Bio-Layer Interferometry, BLI）和錶麵等離子共振（SPR）技術在動力學參數測定中的應用，以及體內（in vivo）的鄰近誘導實驗（Proximity Ligation Assay, PLA）。 3. 蛋白質翻譯後修飾（PTM）的鑒定：詳細描述瞭泛素化、糖基化和乙酰化的位點鑒定技術，特彆強調瞭多維色譜分離在復雜混閤物分析中的作用。第四部分：活細胞成像與實時動態監測本部分專注於突破傳統固定樣本分析的限製，實現對細胞內過程的實時、高分辨率觀察。 1. 熒光蛋白標記與譜係示蹤：介紹瞭Cre-LoxP係統在組織特異性標記中的高級應用，以及Brainbow/Confetti等多色報告係統的構建與成像。 2. 熒光壽命成像顯微鏡（FLIM）與FRET：詳細闡述瞭FRET（Förster共振能量轉移）原理在檢測蛋白質-蛋白質或蛋白質-核酸相互作用中的應用，並提供瞭FLIM-FRET實驗的校準與數據擬閤方法。 3. 共聚焦與延時成像優化：針對延時成像（Time-lapse Imaging）中光毒性、光漂白和樣本失水問題，提供瞭培養皿級的環境控製優化方案，以及多光子顯微鏡在深層組織成像中的優勢分析。第五部分：核酸與基因調控的體外重建本部分側重於構建高度還原性的體外係統，用於研究復雜的核酸代謝和調控事件。 1. 高效體外轉錄（IVT）係統：提供瞭從cDNA模闆製備到純化、帽修飾（Cap Addition）的高效IVT協議，用於製備高質量的mRNA用於體外翻譯或疫苗開發。 2. 體外轉錄係統（IVS）的構建：詳細介紹瞭基於核提取物或重組蛋白構建的無細胞翻譯體係（Cell-Free System），及其在快速篩選轉錄因子活性和RNA結閤蛋白（RBP）中的應用。 --- 目標讀者與價值體現本書不是入門教科書，而是“進階工具箱”。它適用於具有紮實分子生物學基礎，渴望將研究推嚮更精細、更動態層麵的科研工作者。通過提供詳細的試劑配方、操作步驟的“陷阱”提示（Troubleshooting），以及關鍵步驟的理論背景，本書旨在顯著提高復雜實驗的成功率，加速前沿生物學發現的進程。掌握本書中的技術，意味著能夠獨立駕馭當前生命科學領域中最尖端的實驗平颱。 ---