生物大分子离心分离技术

生物大分子离心分离技术 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:湖南科学技术出版社
作者:叶正祥
出品人:
页数:251
译者:
出版时间:1990-1
价格:0
装帧:平装
isbn号码:9787535704450
丛书系列:
图书标签:
  • 离心
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具体描述

生物学和化学研究中离心技术基本专业知识. 很实用.

好的,这是一份关于《分子结构与功能调控》的详细图书简介: 图书名称:分子结构与功能调控 ISBN: 978-7-5357-9876-5 (示例) 出版信息: 科学技术出版社 (示例) 图书简介 导言:解码生命物质的基石 《分子结构与功能调控》是一部深入探讨生命系统中最基本单元——分子——的物理化学特性、空间构象及其动态功能机制的专著。本书旨在超越对宏观生物现象的简单描述,深入到原子和分子层面,揭示生命活动的内在逻辑。我们聚焦于生物大分子(如蛋白质、核酸、脂质)如何通过其精妙的三维结构来决定其生物学功能,以及这些功能如何在细胞内外复杂的信号网络中被精确调控。 本书的编写遵循了从基础结构原理到高级功能实现的逻辑递进,特别强调了结构信息与功能表现之间的直接因果关系。它不仅是生物化学、生物物理学研究人员的案头工具书,也是高年级本科生、研究生以及从事药物设计、生物技术开发人员的理想参考读物。 第一部分:分子结构基础与物理化学原理 本部分奠定了理解分子功能的结构基础。我们首先回顾了分子间作用力(如氢键、范德华力、疏水作用)在生物大分子自组装和稳定性中扮演的核心角色。 氨基酸与蛋白质的初级与次级结构: 详细解析了二十种标准氨基酸的侧链特性如何影响肽链的整体折叠路径。重点讨论了α-螺旋、β-折叠等二级结构单元的形成驱动力和稳定性分析。 蛋白质的三维折叠与构象动力学: 深入探讨了蛋白质的天然三级结构(Tertiary Structure)的形成热力学与动力学过程,包括分子伴侣(Chaperones)在正确折叠中的作用。引入了构象柔性(Conformational Flexibility)的概念,解释了分子在执行功能过程中如何利用亚稳态结构进行转换。 核酸的拓扑学与结构层次: 阐述了DNA和RNA在原子尺度上的精细结构,包括碱基堆积、螺旋参数的微小变化如何影响其作为遗传信息载体的准确性。对tRNA、rRNA等复杂RNA结构的稳定性机制进行了专题分析。 膜脂质双分子层与膜蛋白的相互作用: 探讨了脂质的几何结构(如鞘胺磷脂、胆固醇)如何影响膜的流动性和相变温度,进而影响嵌入其中的膜蛋白的活性与空间排布。 第二部分:结构决定功能:机制解析 本部分是本书的核心,聚焦于结构如何直接编码特定的生物学活性。我们将结构分析工具与具体的功能案例相结合。 酶催化机制的结构基础: 详细剖析了活性位点(Active Site)的几何排布、酸碱催化残基的精确位置及其电子效应。通过案例研究(如丝氨酸蛋白酶、金属酶),展示了过渡态稳定化机制在加速生化反应中的核心作用。 分子识别与结合亲和力: 深入分析了受体-配体、抗体-抗原系统中的分子对接(Molecular Docking)过程。阐述了结合界面(Binding Interface)的形状互补性、电荷匹配以及结合熵变对结合亲和力(Affinity)的贡献。 聚合与去聚合过程的结构调控: 以肌动蛋白丝的组装、微管的形成以及病毒衣壳的自组装为例,探讨了结构亚基之间通过非共价键的协同作用如何实现宏观结构的高效构建与解体。 信号传导中的结构转换: 重点分析了通过磷酸化、构象变化(Conformational Switch)触发的信号级联反应。例如,G蛋白偶联受体(GPCRs)的激活涉及跨膜螺旋的微妙位移,从而引发细胞内效应分子的启动。 第三部分:分子功能的动态调控 生命系统的高度复杂性来源于其对环境刺激的快速、精确响应能力。本部分探讨了调控分子功能的主要机制。 共价修饰的信号转导: 详细阐述了磷酸化、泛素化、甲基化等共价修饰如何通过引入新的电荷中心或空间位阻基团,瞬时改变目标蛋白的构象,从而开启或关闭其生物学活性。我们讨论了激酶和磷酸酶的底物特异性调控。 变构调控(Allosteric Regulation): 深入解析了变构位点(Allosteric Site)与活性位点之间的结构耦合机制。解释了小分子效应物如何通过诱导或折叠(Induced Fit)机制,远程影响催化效率或结合选择性,这是药物设计的重要靶点。 分子机器的组装与时空调控: 考察了依赖于能量输入(如ATP水解)的分子马达(如肌球蛋白、驱动蛋白)的循环工作机制。强调了它们如何通过周期性的结构变化,将化学能转化为机械功,并受细胞骨架等支架结构的限制。 核酸转录与翻译的调控: 阐述了转录因子如何通过特定的DNA结合结构域识别启动子序列,以及染色质重塑复合体如何利用构象变化来改变DNA的可及性,实现基因表达的时空特异性。 本书特色与价值 本书整合了最新的结构生物学数据(如冷冻电镜、核磁共振、X射线晶体学解析的成果),并强调了计算模拟在理解分子动态过程中的辅助作用。我们力求以严谨的物理化学视角,系统梳理从单体到复杂组装体的结构-功能关系。阅读本书,读者将能建立起一套从分子基础到复杂调控的完整认知框架,为解决生物医学前沿问题提供坚实的理论支撑。

作者简介

目录信息

1仪器
1.1离心机
2离心操作的一般知识
3离心作用的基本理论
5密度梯度离心技术:速率区带离心
6密度梯度离心技术:等密度梯度离心
7区带离心技术
8沉降系数的测定
9细胞器和膜的分离
10生物大分子的分离
1.2转头
1.3离心管及其盖子
2.1转头的选择
2.2离心管的选择
2.3过速保护系统
2.4操作
2.5转头和离心管的保养
3.1沉降理论
3.2沉降系数
3.3离心力
3.4离心时间的预测
4差速离心分离技术
5.1一般概念
5.2非离子梯度物质
5.3梯度的形状
5.4梯度的制备
5.5梯度离心
5.6梯度的收集
5.7梯度分析
6.1一般概念
6.2离子梯度物质
6.3梯度的形状
6.4梯度的形成
6.5梯度离心
7.1旋转密封区带转头
7.2重新定向的区带转头
7.3连续流动转头
7.4梯度的设计
7.5区带离心技术的应用
8.1沉降系数
8.2测定沉降系数的方法
本章附录
9.1匀浆
9.2差速离心分离
9.3简易蔗糖密度屏障法
9.4非连续和连续梯度的应用
10.1大分子的速率区带离心分离
10.2大分子等密度分离条件的选择
10.3大分子的等密度梯度离心分离
附录
一、相对离心力的计算公式
二、计算相对离心力的列线图
三、超速离心转头性能表
表1小容量角度转头
表2中等容量角度转头
表3大容量角度转头
表4垂直转头
表5小容量水平转头
表6中等容量水平转头
表7大容量水平转头
表8区带转头
表9连续流动转头
四、高速离心转头性能表
表1角度转头
表2水平转头
表3垂直转头
表4区带转头
主要参考文献
· · · · · · (收起)

读后感

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用户评价

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从本科阶段接触到分子生物学实验开始,我就对各种复杂的实验技术产生了浓厚的兴趣,而生物大分子的分离纯化,始终是我认为最核心也最具有挑战性的环节之一。《生物大分子离心分离技术》这本书,在我看来,就是一本能够帮助我攻克这一难关的宝贵教材。我希望能够在这本书中,系统地学习离心分离背后的物理学原理,例如离心力、沉降系数、斯托克斯定律等,并且能够理解这些原理是如何应用于不同类型的生物大分子(如蛋白质、核酸、多糖、脂质等)的分离过程中的。我特别期待书中能够对“差速离心”和“密度梯度离心”这两种最常用的离心技术进行深入的剖析,包括它们的适用范围、操作步骤、优缺点以及可能遇到的问题。例如,如何根据不同生物大分子的密度和大小,选择合适的离心速度和时间,以达到最佳的分离效果?如何构建稳定有效的密度梯度,以分离那些密度相近的生物大分子?书中是否会提供一些实际的实验案例,来演示如何将这些理论知识应用到具体的生物大分子分离纯化过程中?对我而言,能够掌握这些基础且关键的实验技能,将为我日后在生物技术、药物研发、食品科学等领域从事相关研究打下坚实的基础。

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我对《生物大分子离心分离技术》这部著作的兴趣,源于我对生命奥秘的探求,以及在实验室实践中遇到的瓶颈。我一直对生命体内的那些微小而强大的“工作单元”——生物大分子——怀有浓厚的兴趣。它们是生命活动的执行者,是细胞功能的基石。然而,要深入研究它们的结构、功能,甚至参与到疾病的诊断和治疗中,就必须先将它们从混乱的细胞混合物中“捞”出来,并且保证它们的活性和纯度。离心分离,作为一种看似简单实则蕴含深奥物理原理的技术,在我看来,是实现这一目标的重要途径。我渴望在这本书中看到,对于不同类型生物大分子(比如,膜蛋白、细胞器、病毒颗粒、核酸复合物等)的离心分离,有哪些系统性的策略和方法。我尤其关注书中对于“高速离心”和“超速离心”技术的阐述,以及它们在分离小型、低密度生物大分子(如核酸、病毒、小型蛋白质)方面的独特优势。书中是否会详细介绍离心管的选择、样品预处理、梯度介质的配制与使用,以及离心机的日常维护和校准?这些实践性的细节,对于确保实验的可靠性和可重复性至关重要。我也希望书中能够提供一些关于如何优化离心参数(如转速、离心时间和温度)的指导,以及如何评估离心结果的有效性(如通过SDS-PAGE、Western Blot、PCR等方法)。我对书中的每一个细节都充满了好奇,希望能通过这本书,建立起一套全面而扎实的生物大分子离心分离知识体系,从而在未来的科研道路上,少走弯路,更快地抵达目标。

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我对《生物大分子离心分离技术》这部作品的关注,很大程度上源于我对生物大分子在生命过程中扮演的“幕后英雄”角色产生了浓厚的兴趣,以及在实验室实践中对分离纯化技术愈发深刻的认识。我曾多次在分离研究过程中遇到瓶颈,例如,目标蛋白在离心过程中出现沉淀,或者与一些低分子量的杂质共沉淀,导致最终产物的纯度大打折扣。这让我意识到,仅仅了解生物大分子的基本性质是远远不够的,掌握高效、精确的分离技术才是关键。离心分离,作为一种能够有效利用密度、大小等差异来分离物质的方法,在我看来,是解决这些问题的核心手段。我希望这本书能够提供一套系统性的方法论,指导我如何针对不同类型的生物大分子(如膜蛋白、细胞器、病毒颗粒、核酸复合物等),选择最合适的离心策略。我特别关注书中对于“梯度离心”的详细阐述,我希望能够了解如何在不同的密度介质(如蔗糖、氯化铯、甘油等)中,精确地控制目标分子的沉降速度,从而实现高分辨率的分离。书中是否会提供关于如何避免在离心过程中出现“对流”和“扩散”等现象的技巧?或者如何处理含有多种生物大分子、但目标分子含量较低的样品,以提高分离效率?对我而言,掌握这些精密的离心技术,将极大地提升我的实验成功率,并为我深入探究生物大分子的功能机制提供坚实的基础。

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在我看来,一本好的技术书籍,不应该仅仅停留在理论的堆砌,更需要有深刻的实践指导意义。我对《生物大分子离心分离技术》这本书的期待,正是如此。我深知,生物大分子,无论是蛋白质、核酸、多糖还是脂质,它们在细胞中的存在状态千差万别,所处的微环境也异常复杂,这使得它们的提取和分离成为一项极具挑战性的任务。而离心分离,作为一种经典且高效的分离手段,其精髓恰恰在于对这些复杂性的精妙利用。我非常想了解,书中是如何系统地阐述不同种类生物大分子(例如,不同大小、密度、电荷特性的蛋白质,或者不同长度、结构特征的核酸)在离心过程中所表现出的独特性质,以及如何根据这些特性设计最优化的离心方案。我尤其关注书中关于“梯度离心”的章节,因为在我过去的实验中,这种方法似乎是解决棘手分离问题的“秘密武器”,但我对其原理和操作细节却知之甚少。如何构建稳定而有效的密度梯度介质?如何准确控制离心过程中梯度介质的形成和维持?梯度介质的种类和浓度如何影响目标分子的沉降轨迹?这些都是我迫切希望在这本书中找到答案的问题。此外,我也非常期待书中能够详细介绍一些“非标准”的离心技术,例如利用生物大分子自身性质(如溶解度、结合能力)来辅助离心的“特异性离心”技术,或者如何结合其他分离手段(如色谱、电泳)来提升离心分离的整体效果。对于我而言,掌握这些进阶的技术,将是提升我科研能力的关键一步。

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作为一名对生物技术和生物制药领域充满热情的学生,我一直深知扎实的实验技能是取得科研成果的关键。《生物大分子离心分离技术》这本书,在我看来,正是这样一本能够提升我实验能力、深化我对生物大分子分离过程理解的宝贵著作。我希望能够在这本书中,系统地学习离心分离的理论基础,例如离心力、沉降系数、离心介质的选择与制备,以及不同离心模式(如差速离心、密度梯度离心、等密度离心)的原理和应用。我特别关注书中关于“如何根据生物大分子的理化性质(如大小、密度、电荷、溶解度等)选择最合适的离心策略”的论述。例如,对于不同分子量的蛋白质,其最优化的离心条件会有哪些不同?对于核酸,如何避免在离心过程中发生断裂?书中是否会提供关于如何优化离心参数(如离心时间、温度、溶剂体系等),以最大化目标产物的回收率和纯度?此外,我也非常期待书中能够介绍一些“高级”的离心技术,例如连续流离心机在大规模生产中的应用,或者如何将离心技术与其他分离技术(如超滤、层析)相结合,以实现更高效率和更高纯度的生物大分子分离。掌握这些精密的离心技术,将为我未来在生物制药、疫苗研发等领域的研究打下坚实的基础。

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作为一名对生命科学研究充满热情的学生,我对《生物大分子离心分离技术》这本书的期待,更多地体现在对实验技能的精进和对科研方法的探索上。我一直深信,在科研领域,扎实的理论基础是必不可少的,但更重要的是能够将这些理论转化为实际操作,并能够灵活运用以解决具体问题。在我接触到的生物大分子分离技术中,离心分离无疑是最基础也最常用的一种。然而,看似简单的离心操作,背后却隐藏着丰富的物理学原理和精细的操作技巧。我希望在这本书中,能够深入地了解到,离心力是如何产生、如何作用于生物大分子,以及影响离心效果的关键因素(如离心半径、角速度、样品粘度、密度等)。我对于书中关于“差速离心”的介绍尤为期待,因为在实验室中,我们常常需要通过不同速度的离心来逐步分离细胞内的各种组分,比如核、线粒体、核糖体等。书中是否会提供关于如何根据目标组分的沉降系数来确定最佳离心速度和时间的详细指南?此外,我也非常想知道,如何在高细胞裂解液或者高盐浓度等复杂体系中,有效地进行离心分离,以避免目标分子发生沉淀或降解。对于我来说,掌握这些“硬核”的实验技能,将是我未来从事生物技术、生物制药等领域研究的坚实基础。

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刚拿到这本《生物大分子离心分离技术》,我心里其实是抱着一种忐忑又期待的心情。毕竟,离心分离这三个字,对于我这样一个还在实验室摸索阶段的学生来说,就如同一个庞大而神秘的未知领域。我一直以来在文献中接触到的,大多是关于各种生物大分子的性质、功能,以及它们在生命活动中的重要作用,但这些“明星分子”是如何从复杂的生物基质中被精确提取、分离和纯化的,却像笼罩着一层面纱,让我在实验操作时常常感到力不从心,效率低下。我曾尝试过各种方法,但结果总是差强人意,要么产率低得可怜,要么纯度不尽如人意,这极大地打击了我科研的热情。我希望能在这本书里找到一种能够让我事半功倍的“魔法”,一种能够解锁生物大分子分离难题的金钥匙。我特别关注书中所提到的各种离心机型号,以及它们各自适用的分离对象和条件。我很好奇,不同转速、不同离心力、不同离心管材质,甚至不同时间长度的离心操作,会对生物大分子的沉降速度、分布状态产生怎样的影响。尤其是一些我之前闻所未闻的“特殊离心技术”,比如密度梯度离心、区域离心等等,它们是如何利用生物大分子在不同介质中的密度差异来达到分离目的的,这一点让我尤为着迷。我希望能通过这本书的学习,真正理解离心分离的底层原理,掌握各种离心方法的优劣势,并且能够根据自己所要分离的特定生物大分子,选择最合适的离心策略,从而优化实验流程,提高分离效率和产品质量。我期待能够看到书中详细的实验案例分析,以及针对常见问题的故障排除指南,这些对我来说将是无比宝贵的财富。

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我一直以来对生物大分子的研究抱有浓厚的兴趣,尤其是在蛋白质组学和分子生物学领域。但每次在实验中分离目标蛋白或核酸时,总是会遇到各种各样的问题,例如目标分子沉降不完全、与杂质共沉淀、或者在离心过程中活性丧失等。这让我意识到,仅仅了解生物大分子的基本性质是远远不够的,更重要的是掌握高效、可靠的分离纯化技术。而离心分离,作为一种能够有效利用密度、大小等差异来分离物质的方法,在我看来,是解决这些问题的关键。我非常希望《生物大分子离心分离技术》这本书能够提供一套系统性的方法论,指导我如何针对不同类型的生物大分子(比如,亲水性蛋白、疏水性蛋白、核酸、糖蛋白等),选择最合适的离心策略。我特别关注书中对于“密度梯度离心”的详细阐述,我希望能够了解如何在不同的密度介质(如蔗糖、氯化铯、甘油等)中,精确地控制目标分子的沉降速度,从而实现高分辨率的分离。书中是否会提供关于如何避免在离心过程中出现“对流”和“扩散”等现象的技巧?或者如何处理含有多种生物大分子的复杂样品,确保目标分子能够被有效分离,同时保持其生物活性?对我而言,掌握这些精密的离心技术,将极大地提升我的实验成功率,并为我深入探究生物大分子的功能机制奠定坚实的基础。

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我一直以来都对生物大分子在生命活动中所扮演的关键角色充满了好奇,尤其是在基因工程、蛋白质工程以及分子诊断等领域。然而,要深入研究这些“生命明星”,首先需要将它们从复杂的生物样品中分离出来,并确保其完整性和活性。离心分离,作为一种基础而重要的分离技术,在我看来,是实现这一目标的关键步骤。我希望《生物大分子离心分离技术》这本书能够提供一套系统性的知识体系,帮助我理解离心分离的原理,以及如何在实际操作中将其应用于各种生物大分子的分离纯化。我特别关注书中关于“密度梯度离心”的详细介绍,因为我了解到这种技术在分离不同密度、但又彼此非常相似的生物大分子时具有独特的优势。例如,如何构建稳定有效的密度梯度,如何控制梯度介质的种类和浓度,以及如何在梯度中精确地定位和收集目标分子?书中是否会提供关于如何处理含有多种生物大分子、但目标分子含量较低的样品,以提高分离效率的建议?对于我而言,掌握这些精密的离心技术,将为我未来的科研工作提供强有力的技术支撑,并帮助我更好地理解生命活动的奥秘。

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我之所以对《生物大分子离心分离技术》这部著作充满期待,是因为它触及了我目前在实验室研究中遇到的一个核心瓶颈:如何从海量的细胞碎片和复杂的生物基质中,精确地“捕获”我所研究的特定生物大分子,并保证其纯度和活性。我曾尝试过多种分离方法,但常常因为操作不当或者理论理解不足,导致结果不尽如人意。离心分离,作为一种历史悠久且极为高效的分离手段,其背后蕴含的物理原理和操作技巧,是我一直渴望深入学习的。我希望这本书能够详细阐述,不同类型生物大分子(如蛋白质、核酸、病毒颗粒、细胞器等)在离心过程中所表现出的独特沉降行为,以及如何根据这些行为来设计最优化的离心方案。我尤其好奇书中关于“超速离心”的章节,因为我了解到这种技术能够分离非常微小的颗粒,对于研究核酸、蛋白复合物等至关重要。书中是否会详细介绍离心机的工作原理、不同类型离心机的特点(如台式离心机、高速离心机、超速离心机、连续流离心机等),以及如何根据实验需求选择合适的设备?同时,我也期待书中能够提供一些关于如何优化离心参数(如转速、离心时间、温度、溶剂体系等)的指导,以及如何评估离心结果的准确性和有效性。掌握这些精密的离心技术,将是我在生物科学研究领域更上一层楼的关键。

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