具体描述
《全国高等农业院校教材•兽医免疫学实验指导》主要内容：在20世纪80年代初，兽医免疫学刚刚从兽医微生物学独立出来时，南京农业大学杜念兴教授主编了我国兽医本科专业第一本《兽医免疫学》教材。在这本教材中，有将近一半的篇幅介绍的是免疫学技术。又有20多年过去了，随着免疫学基础研究的不断深入发展，有关免疫学基本理论的内容积累得越来越多。但是，作为本科专业的教材，其篇幅仍只能限制在一定的范围内。因此，在三年前我们编写《兽医免疫学》(中国农业出版社2004年第一版)时，了能充分反应当代免疫学和兽医免疫学的最新理论，不得不大大缩小免疫学技术的篇幅，将其内容仅限于各种免疫学技术的原理和应用范围，不再具体罗列操作方法。所以尽快编写一本《兽医免疫学实验指导》作为补充教材是非常必要的。
同《兽医免疫学》一样，这本实验指导也是由9所院校的10多年在教学和科研第一线工作的教师编写的。本实验指导几乎包括了对动物疫病的免疫学诊断和免疫试验的各种常用的方法，也包括了在病毒学、细菌学和寄生虫学研究中可能涉及到的不同免疫学技术和方法。对每种技术和方法，不仅详细介绍了工作原理，而且、还详细地列出了具体的操作步骤及相关溶液的配制。因此，本实验指导不仅可作为本科生兽医免疫学实验课的参考书，也可作为兽医 微生物学和免疫学领域的研究生及各级动物疫病诊断实验室工作人 员的参考书。
《现代分子生物学技术：从基础到应用》 导读： 在生命科学日新月异的今天，分子生物学已成为理解生命奥秘、推动生物技术发展的核心驱动力。《现代分子生物学技术：从基础到应用》一书，旨在为生命科学领域的学习者、研究人员以及技术人员提供一份全面、系统且与时俱进的实践指南。本书摒弃了传统教材的理论说教，专注于实验技术的原理、操作流程、结果分析及潜在的应用前景，力求将复杂的分子生物学操作转化为清晰、可执行的步骤。 本书的架构设计，遵循了从基础操作到前沿应用的逻辑顺序，确保读者能够循序渐进地掌握各项关键技术。全书内容深度与广度兼具，不仅涵盖了分子生物学实验室的“基石”技术，如核酸提取、PCR、凝胶电泳等，更深入探讨了当前研究热点领域中不可或缺的高级技术，如新一代测序（NGS）、基因编辑（CRISPR/Cas9系统）、蛋白质组学初步分析等。 第一部分：分子生物学实验的基石——样本制备与核酸操作 本部分着重于确保实验成功的第一步：高质量的起始材料准备。我们深知，样本的质量直接决定了后续实验的成败。 第一章：实验环境与安全规范 详细阐述了分子生物学实验室的通用规范，包括生物安全等级的划分、无菌操作区域的建立、化学试剂的正确存储与废弃物处理流程。重点强调了个人防护装备（PPE）的正确选择与使用，以及在处理高风险样本（如临床或病原体样本）时应遵循的严格规程。 第二章：各类生物样本的优化采集与处理 涵盖了从动物组织、细胞培养物到血液、植物组织等多种来源的样本采集技术。针对不同样本的特性，提供了快速裂解和稳定化的最佳方案。例如，在组织样本中，详细介绍了液氮研磨与CTAB法在植物组织核酸提取中的优缺点比较，以及如何避免内源性酶对核酸的降解。 第三章：核酸的提取、纯化与定量 这是分子实验的核心环节。本书不仅介绍了传统的酚氯仿抽提法，更详细解析了固相萃取（硅胶柱法）的原理，并提供了针对不同污染物的优化方案（如去除多糖或血红素）。在定量方面，除了UV分光光度计的常规使用，还引入了荧光定量方法（如Qubit）的原理与优势，强调了A260/A280比值在评估核酸纯度中的实际意义。 第四章：凝胶电泳与可视化技术 详尽描述了琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的操作细节，包括缓冲液配制、电压控制以及上样技巧。在可视化方面，对比了溴化乙锭（EtBr）、GelGreen等不同染料的安全性和灵敏度，并提供了成像系统（Gel Doc）的校准与图像分析的标准流程。 第二部分：扩增与克隆——信息获取的核心手段 本部分聚焦于如何利用酶促反应，实现对特定核酸片段的特异性放大和功能性重组。 第五章：聚合酶链式反应（PCR）的精细调控 PCR是分子生物学的“工作马”技术。本书深入探讨了Taq酶的性质、退火温度的精确计算（Tm值）以及引物设计的关键原则。更重要的是，针对常见问题（如引物二聚体、非特异性扩增），提供了系统的故障排除指南。此外，还包含了定量PCR（qPCR）的原理介绍，重点讲解了标准曲线的制作、溶解曲线的分析以及内参基因的选择与验证。 第六章：反转录技术（RT-PCR与RTPCR） 针对RNA研究，本书详细介绍了RNA的稳定性处理、反转录酶的选择（一步法与两步法）及其反应条件优化。在RT-qPCR中，着重分析了cDNA的质量对下游实验的影响，并演示了如何通过Ct值的变化来准确推断初始RNA的表达水平。 第七章：分子克隆技术与载体构建 深入剖析了限制性内切酶的反应机制、连接酶的活性以及感受态细胞的制备。对于经典克隆（粘性末端、平末端连接），提供了详细的实验步骤。对于更高级的应用，本书介绍了重组克隆技术（如Gateway、Gibson Assembly）的原理和应用范例，帮助读者高效地构建表达或基因敲除载体。 第三部分：前沿技术与深度解析 本部分将读者引向分子生物学研究的尖端领域，介绍如何利用高通量技术和精准编辑工具解决复杂的生物学问题。 第八章：新一代测序（NGS）文库制备与数据解读 本书不侧重于测序仪的操作，而是聚焦于文库构建的策略。详细阐述了全基因组测序（WGS）、外显子组测序（WES）以及RNA测序（RNA-Seq）文库制备的关键步骤，如片段化、接头连接和富集。在数据分析层面，提供了序列质量评估（FastQC）和比对基础流程的入门指导，帮助研究者理解测序数据背后的生物学意义。 第九章：基因编辑技术：CRISPR/Cas9系统的应用实践 CRISPR/Cas9已成为生物学研究的强大工具。本书详细介绍了sgRNA的设计原则、靶向效率的评估以及Cas9核酸酶的递送方法（质粒、mRNA或RNP复合物）。重点讨论了如何利用同源重组修复（HDR）实现精确基因敲入，并介绍了脱靶效应的检测方法（如CIRCLE-seq）。 第十章：蛋白质印迹（Western Blotting）的优化与定量 作为研究蛋白质表达的金标准技术，本书对WB的每一步都进行了细致的优化指导。从SDS-PAGE的分离条件选择（如梯度胶的应用），到转膜条件的优化（半干法与湿转法），再到一抗和二抗的孵育条件。尤其强调了化学发光信号的线性范围控制以及内参蛋白的合理选择与校正，以实现可靠的蛋白质定量分析。 结语：实验设计的逻辑与报告规范 全书最后一部分回归到科学研究的本质——严谨的实验设计和清晰的报告。本书提供了一系列实验设计模板，教导读者如何设置合理的阳性、阴性对照，如何进行样本量的估算（Power Analysis的初步概念），以及如何运用统计学工具（如t检验、ANOVA）来验证实验结果的显著性。同时，本书还提供了实验记录与图表制作的规范建议，确保研究成果能够清晰、准确地被科学界接受。 《现代分子生物学技术：从基础到应用》不仅仅是一本操作手册，更是一位经验丰富的实验伙伴，旨在培养读者独立思考、高效解决分子实验中复杂问题的能力。
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