细胞生物学实验手册

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出版者:科学
作者:Julio E Celis
出品人:
页数:586
译者:
出版时间:2008-1
价格:138.00元
装帧:
isbn号码:9787030203830
丛书系列:
图书标签:
  • 细胞生物学
  • 实验
  • 生物学
  • 医学
  • 教学
  • 科研
  • 实验室
  • 细胞
  • 分子生物学
  • 生命科学
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具体描述

《细胞生物学实验手册1(导读版)》内容包括细胞和组织培养的相关技术、病毒、抗体、免疫细胞化学。《细胞生物学实验手册(导读版)》涵盖了经典的细胞生物学实验方案,对生命科学研究有重要的指导意义。更新后的第三版书包括165篇新文章,覆盖了经典与最新的实验技术。各项技术以人性化的形式逐步展开,并介绍了一些实用性的技巧及易出现的错误。重要的实验步骤和结果附以插图说明,方便理解和使用。

综合植物生理学研究导论 内容简介 本书旨在为学习植物生理学,特别是从事植物生理学实验研究的人员提供一套全面、深入且高度实用的指导。全书聚焦于植物生命活动的基础机制、环境响应以及现代研究技术,力求构建一个系统化的知识框架,帮助读者从理论走向实践,掌握独立开展科研工作的核心能力。 全书共分为五大部分,共计二十余章,内容覆盖了从宏观的植物生长发育到微观的分子调控等多个层次。 --- 第一部分:植物生理学基础与实验设计原理 (Foundations and Experimental Design) 本部分为全书的理论基石与方法论导向。它首先回顾了植物生命活动的关键要素,如光合作用的原理、水分运输的物理化学基础、矿物质营养的吸收与代谢等,确保读者对核心生理过程有扎实的理论认知。 关键章节包括: 1. 植物生理学的学科范畴与发展趋势: 阐述植物生理学在生态学、分子生物学和农业科学中的交叉定位,重点介绍当前研究热点,如气候变化对植物适应性的影响。 2. 实验设计与数据处理的科学性: 这是本书区别于纯理论教材的关键部分。详细介绍了对照组的设置、样本量的确定、随机化原则以及重复性的重要性。针对生理学实验中常见的变异性问题,提供了统计学基础知识,如方差分析(ANOVA)的应用,以及如何选择恰当的统计模型来验证假设。 3. 生长环境的精确控制: 强调环境因子(光照、温度、湿度、CO2浓度)对实验结果的决定性影响。介绍了人工气候室(Phytotron)的操作规范,以及如何利用传感器和数据记录系统实现对环境参数的实时、精确调控,确保实验的可重复性。 --- 第二部分:能量代谢与光合作用的精细测量 (Energy Metabolism and Photosynthetic Quantification) 光合作用是植物生存的核心,本部分侧重于其实验测量技术。内容不再停留在光反应和碳反应的方程式层面,而是深入到如何通过精确仪器量化其速率和效率。 核心实验技术详解: 1. 气体交换分析(Gas Exchange Analysis): 详细指导如何使用便携式或开放式光合测定系统(如Li-Cor系列)。不仅讲解叶片净光合速率(Pn)、蒸腾速率(E)的测量,更着重于如何通过调整环境参数(光强、CO2浓度)绘制出光响应曲线(Light Response Curve)和CO2响应曲线(CO2 Response Curve),并对饱和点、补偿点进行准确判断。 2. 叶绿素荧光技术(Chlorophyll Fluorescence): 提供了从基础知识到高级参数提取的完整流程。讲解了PAM(Pulse-Amplitude Modulation)荧光仪的工作原理,如何测量最大量子产额(Fv/Fm)、实际光化学量子产额(ΦPSII)以及非光化学猝灭(NPQ)。强调利用这些参数评估植物在胁迫下的光系统II(PSII)损伤程度。 3. 同位素示踪技术在光合碳分配中的应用: 介绍如何安全高效地使用14C或稳定的13C同位素对初级固定产物和碳在植株各器官间的分配进行追踪和定量分析。 --- 第三部分:水分与矿物质营养的运输及响应机制 (Water Relations and Mineral Nutrition Dynamics) 本部分关注植物体内环境的稳定与物质的跨膜运输。 1. 水势(Water Potential)的测定与调控: 详细介绍了热敏法(如气压测量法)和压力室法(Pressure Chamber)测定水势的现场操作规范,并探讨了叶片、茎和根系水势的相互关系。同时,讲解了气孔导度(Stomatal Conductance)的测量及其在水分利用效率(WUE)计算中的地位。 2. 根系生理与吸收动力学: 侧重于营养元素的吸收机制。介绍了使用霍格兰德(Hoagland)营养液的配制与维护的精确要求。重点介绍了利用放射性同位素(如32P, 86Rb)或特定离子选择电极研究特定离子(如硝酸根、磷酸根、钾离子)的吸收速率、动力学模型(如米氏方程)以及载体蛋白的初步鉴定方法。 3. 胁迫生理学导论: 探讨干旱、盐渍、低温等非生物胁迫对水、养分平衡的冲击。如何通过测定脯氨酸、可溶性糖等渗透调节物质的含量来量化胁迫程度。 --- 第四部分:植物激素的提取、定量与生物学效应分析 (Phytohormone Analysis and Bioassays) 植物激素是调控生长发育的关键信号分子,本部分专注于其复杂的分析流程。 1. 激素提取与纯化技术: 强调在生物活性物质提取中保持低温、避光和使用无水有机溶剂的重要性。详细介绍了液-液萃取、固相萃取(SPE)柱的选择与使用,用于将内源激素(如生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯)从复杂的植物基质中分离出来。 2. 定量分析方法: 介绍了高灵敏度的分析平台。重点讲解了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)在痕量激素分析中的应用,包括标准曲线的建立、内标的选择和数据校准流程。 3. 生物学活性测定(Bioassays): 虽然现代分析技术日益普及,但生物学测定仍是验证激素活性的金标准。书中提供了经典生物学实验的详细步骤,如利用IAA氧化酶抑制作用测定生长素活性、利用幼茎伸长实验测定赤霉素活性等,并强调如何对生物学反应进行量化。 --- 第五部分:分子与细胞水平的生理学研究工具 (Tools for Molecular and Cellular Physiome) 本部分面向更前沿的研究领域,介绍了将细胞生物学技术应用于生理学问题的实践方法。 1. 原生质流与细胞内钙信号的观测: 讲解如何制备高质量的活体细胞(如表皮细胞或原生质体),利用荧光染料(如Rhodamine B)结合激光共聚焦显微镜(Confocal Microscopy)观测细胞质流动的方向与速度,以及使用钙指示剂(如Fura-2)记录和分析细胞对外界刺激(如ABA、冷激)的钙信号转导。 2. 关键酶活性的测定: 提供了光合关键酶(如Rubisco、PEPC)和胁迫相关酶(如SOD、CAT、POD)的提取与比色法/酶活性测定流程,确保实验操作符合酶学动力学要求。 3. 基因表达的初步探究: 简要介绍了如何通过RT-qPCR技术分析特定环境因子或激素处理下关键生理基因(如水通道蛋白基因、光合作用相关基因)的转录水平变化,作为理解表型变化背后的分子机制的初步探索。 全书配备了大量的图表、标准操作流程(SOPs)和常见问题解答(Troubleshooting),力求成为植物生理学实验室中不可或缺的实用参考书。

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