Pcr Cloning Protocols pdf epub mobi txt 电子书下载 2026

简体网页||繁体网页

☆☆☆☆☆

出版者:Humana Pr Inc

作者:Chen, Bing-Yuan (EDT)/ Janes, Harry W.

出品人:

页数:453

译者:

出版时间:2002-4

价格:$ 213.57

装帧:HRD

isbn号码:9780896039698

丛书系列:

图书标签:

PCR
克隆
分子生物学
生物技术
实验方案
DNA
基因工程
扩增
载体
操作规程

下载链接在页面底部

facebook linkedin mastodon messenger pinterest reddit telegram twitter viber vkontakte whatsapp 复制链接

想要找书就要到小哈图书下载中心

qciss.net

立刻按 ctrl+D收藏本页

你会得到大惊喜!!

具体描述

PCR Cloning Protocols, Second Edition, updates and expands Bruce White's best-selling PCR Cloning Protocols (1997) with the newest procedures for DNA cloning and mutagenesis. Here the researcher will find readily reproducible methods for all the major aspects of PCR use, including PCR optimization, computer programs for PCR primer design and analysis, and novel variations for cloning genes of special characteristics or origin, with emphasis on long distance PCR and GC-rich template amplification. Also included are both conventional and novel enzyme-free and restriction site-free procedures to clone PCR products into a range of vectors, as well as state-of-the-art protocols to facilitate DNA mutagenesis and recombination, and to clone the challenging uncharacterized DNA flanking a known DNA fragment.

《分子生物学前沿：从基础到应用》一、本书概述与定位《分子生物学前沿：从基础到应用》是一部全面、深入、与时俱进的分子生物学教材与参考手册，旨在为生命科学、生物技术、医学以及相关交叉学科的研究人员、教师和高年级本科生、研究生提供一个坚实的理论基础和前沿的操作指导。本书超越了基础的分子生物学概念，重点聚焦于当代生命科学研究中最热门、最具挑战性的领域，系统梳理了从基因组学、转录组学到蛋白质组学的核心技术与理论框架。本书强调理论与实践的紧密结合，旨在培养读者独立设计、执行和解读复杂分子生物学实验的能力。二、内容结构与核心章节详解本书共分为五大部分，涵盖了分子生物学的经典核心内容和最新发展方向。第一部分：分子生物学基石与工具本部分着重于重建和巩固读者对生命科学基础原理的认知。 1. 核酸的结构与功能再审视：详细探讨了DNA和RNA的超微结构、拓扑学特征，特别关注了非经典RNA（如lncRNA, circRNA）在基因表达调控中的新兴作用机制。 2. 核心分子事件的调控网络：深入分析了DNA复制、转录和翻译的精确调控机制，引入了表观遗传学（Epigenetics）作为核心调控层面的内容。此处详述了组蛋白修饰（乙酰化、甲基化、磷酸化）与DNA甲基化在基因沉默与激活中的动态平衡。 3. 基础实验技术平台：回顾了凝胶电泳、光谱分析等传统方法的优化，并对PCR（聚合酶链式反应）的原理进行了严谨的数学模型分析，但侧重点在于其衍生技术，而非基础克隆步骤。第二部分：基因组学与高通量测序技术这是本书篇幅最大、最具前瞻性的部分之一，系统介绍了下一代测序（NGS）技术的原理、应用及其数据分析方法。 1. 新一代测序技术全景：详尽对比了Illumina SBS、Ion Torrent、PacBio SMRT Sequencing以及Oxford Nanopore Technologies的工作原理、优势与局限性。重点解析了长读长测序在结构变异检测中的关键作用。 2. 从测序数据到生物学洞察：详细阐述了从原始数据（FastQ文件）到高质量序列的生物信息学流程。内容包括序列比对算法（如BWA, Bowtie2）、变异检测（SNV, InDel, SV）的最佳实践，以及数据质量控制的标准。 3. 全基因组与转录组分析的深度应用：探讨了从全基因组测序（WGS）中挖掘疾病相关基因的方法，以及RNA-seq在基因表达差异分析（如DESeq2, edgeR）中的标准化流程。此外，还纳入了单细胞测序（scRNA-seq）的初步介绍，包括其数据去噪和细胞类型注释策略。第三部分：蛋白质组学与蛋白质工程本部分聚焦于蛋白质的结构、功能及其在细胞网络中的相互作用。 1. 蛋白质的结构解析：详细介绍了冷冻电镜（Cryo-EM）在解析大分子复合物三维结构方面的突破性进展，以及X射线晶体学在确定高分辨率结构时的注意事项。 2. 质谱技术在蛋白质组学中的应用：深入讲解了自上而下（Top-down）和自下而上（Bottom-up）质谱分析的流程，包括肽段谱图匹配算法（如MaxQuant）的应用，用于蛋白质的鉴定和定量。 3. 蛋白质修饰与相互作用网络：阐述了蛋白质翻译后修饰（PTMs）的检测技术，以及酵母双杂交（Y2H）、共免疫沉淀（Co-IP）等用于解析蛋白质相互作用组（Interactome）的方法学要点。第四部分：合成生物学与基因编辑系统本部分关注于生物体工程化和精准遗传修饰的前沿技术。 1. CRISPR/Cas系统的机制与进化：不仅介绍了Cas9的经典应用，还深入分析了新型的碱基编辑器（Base Editors）和先导编辑器（Prime Editors）的工作原理，以及它们如何克服传统CRISPR的脱靶和DNA双链断裂问题。 2. 合成生物学设计原则：探讨了如何利用标准化的生物学“部件”（如启动子、增强子、编码序列）构建复杂的基因回路，实现对细胞代谢通路或信号传导的重编程。内容包括逻辑门电路的设计与实现。 3. 基因传递与体内外应用：详细对比了病毒载体（AAV, Lentivirus）和非病毒载体（脂质纳米颗粒LNP）的优缺点及包装优化策略，为基因治疗研究提供技术参考。第五部分：生物技术在疾病研究中的转化本部分将理论与实践紧密结合，展示了分子生物学技术在解决实际生物医学问题中的应用。 1. 疾病模型构建：重点讲解了如何利用基因编辑技术构建精确的动物模型（如条件性敲除/敲入），以及iPSC（诱导多能干细胞）技术在疾病建模和药物筛选中的潜力。 2. 液体活检与早期诊断：阐述了循环肿瘤DNA（ctDNA）和循环肿瘤细胞（CTC）的捕获与分析技术，及其在肿瘤的微小残留病灶（MRD）监测中的敏感性要求。 3. 分子诊断方法的优化：讨论了数字PCR（dPCR）在绝对定量中的高精度优势，以及如何将其应用于低丰度生物标志物的检测，为临床诊断标准的建立提供技术依据。三、本书特色与价值本书最大的特色在于其技术广度与深度结合。它不满足于对单一技术的罗列，而是将基因组学、蛋白质组学与系统生物学方法论贯穿始终，指导读者如何设计一个能够回答复杂生物学问题的多维度实验方案。每一章节均配有“方法学陷阱与优化策略”专栏，揭示了实际操作中常见的技术瓶颈和解决思路。本书旨在培养的是能批判性评估现有技术、并能将新技术应用于解决新问题的未来科学家。