Protein Phosphatase Protocols

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出版者:Humana Pr Inc
作者:Moorhead, Greg (EDT)
出品人:
页数:387
译者:
出版时间:
价格:0.00 元
装帧:HRD
isbn号码:9781588297112
丛书系列:
图书标签:
  • Protein Phosphatase
  • Phosphorylation
  • Signal Transduction
  • Biochemistry
  • Molecular Biology
  • Cell Signaling
  • Enzyme Assays
  • Protocols
  • Life Science
  • Biotechnology
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具体描述

细胞信号传导与调控机制:深度解析与实验方法 本书聚焦于细胞信号转导的复杂网络及其在生命活动中的核心调控作用。 涵盖了从细胞表面受体激活到细胞核内基因表达调控的完整信号通路,并深入探讨了这些通路失调在生理病理过程中的关键角色。本书旨在为生命科学研究人员、生物化学家、分子生物学家以及对细胞生物学有浓厚兴趣的高年级本科生和研究生提供一本内容扎实、方法详尽的参考书。 第一部分:信号转导的基础框架与核心组件 本部分系统梳理了现代细胞信号转导理论的基石。首先,详细介绍了细胞膜上各类受体(如G蛋白偶联受体(GPCRs)、酪氨酸激酶受体(RTKs)、离子通道型受体)的结构、激活机制及其下游的初始信号放大。重点解析了不同信号分子(如cAMP、cGMP、钙离子、磷脂酰肌醇衍生物)如何在细胞内快速、特异性地介导信息传递。 随后,本书深入探讨了信号通路中的关键“开关”——蛋白激酶家族。我们不仅关注经典的丝氨酸/苏氨酸激酶和酪氨酸激酶,更着重介绍了那些在肿瘤发生、免疫应答和神经退行性疾病中发挥关键作用的新兴激酶家族(如MAPK级联、PI3K/AKT/mTOR通路)。对这些激酶的结构域分析、底物识别机制以及调控它们的分子伴侣进行了详尽的描述。 第二部分:信号转导的整合与时空特性 信号通路并非孤立存在,它们之间存在着复杂的交叉对话和反馈调节。本部分的核心在于解析这种“网络化”的调控。我们详细分析了信号整合如何实现对细胞命运的精确决定,例如,在细胞增殖与凋亡的抉择点上,不同信号通路的竞争与合作机制。 特别关注了信号蛋白的亚细胞定位及其动态变化。介绍了多种机制如何确保信号分子在正确的时间到达正确的地点,包括核转运信号(NLS/NES)、膜锚定位点以及利用支架蛋白(Scaffolds)进行空间限定。通过对这些机制的解析,读者可以理解细胞如何实现对信号响应的精细调控,避免“串扰”和过度激活。 第三部分:疾病导向的信号通路失调 本部分将理论知识与临床前沿相结合,系统地探讨了信号转导异常在主要疾病中的病理生理学意义。 肿瘤学视角: 详细分析了癌症中常见的信号通路“热点突变”(Oncogenic Mutations),例如RAS/RAF/MEK/ERK通路的持续激活、PTEN的缺失如何导致AKT异常高活。这部分内容涵盖了对癌细胞生长、侵袭和转移过程的分子基础理解。 神经科学视角: 阐述了神经递质信号在突触可塑性、学习和记忆中的作用。深入讨论了与阿尔茨海默病、帕金森病相关的信号通路异常,如Tau蛋白的异常磷酸化及其对神经元网络稳定性的影响。 免疫与炎症: 聚焦于TLR、NF-$kappa$B通路以及JAK/STAT信号通路在先天性和适应性免疫应答中的核心地位。分析了慢性炎症和自身免疫性疾病(如类风湿性关节炎)中信号稳态的破坏。 第四部分:尖端研究工具与技术平台 为了有效探索和解析上述复杂的分子事件,本部分提供了当前最前沿、最可靠的实验技术指南。本书强调对技术原理的深刻理解,而非仅仅是操作步骤的罗列。 1. 蛋白质修饰分析的深度技术: 详细介绍了用于鉴定和量化蛋白质磷酸化、泛素化、乙酰化等动态修饰的方法。包括高灵敏度的抗体印迹技术(Western Blotting)的优化策略,双向凝胶电泳(2D-PAGE)在区分异构体上的应用,以及利用质谱法(Mass Spectrometry)进行大规模修饰位点鉴定的流程。 2. 信号通路的动态追踪: 涵盖了活细胞成像技术在观察信号分子实时转运和激活中的应用。介绍了FRET(Förster共振能量转移)和BRET(生物发光共振能量转移)探针的设计与应用,用于测量细胞内分子间相互作用和酶活性变化。同时,详细论述了使用光遗传学(Optogenetics)技术对特定信号通路进行精确时间控制的实验设计。 3. 基因功能验证与高通量筛选: 介绍了利用RNA干扰(siRNA/shRNA)、CRISPR/Cas9系统进行基因敲除和敲入对信号通路组分进行功能剥离的方法。此外,本书提供了构建和筛选基于酵母双杂交(Y2H)、膜酵母双杂交(MYTH)或哺乳动物双杂交(MBTH)的蛋白质相互作用谱库的详细策略。 4. 生物信息学与数据整合: 提供了处理和解读大规模组学数据(如磷酸化蛋白质组学、转录组学)的实用指导,包括数据预处理、统计显著性判断以及网络拓扑分析的基本流程,旨在帮助研究人员从海量数据中提取有意义的信号通路信息。 结论: 本书力求提供一个全面、深入且注重实验实践的信号转导知识体系。通过对分子机制的细致剖析和对前沿技术的详细阐述,本书将成为研究人员在探索生命调控奥秘的旅程中不可或缺的工具书。每一章节都旨在培养读者批判性地评估实验结果和设计创新性研究方案的能力。

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