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出版者:高等教育

作者:朱道林 编

出品人:

页数:448

译者:

出版时间:2006-2

价格:49.70元

装帧:

isbn号码:9787040183672

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• 医学检验技术
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《微生物检验操作指南》 内容概述 《微生物检验操作指南》是一本专注于微生物分离、鉴定、计数及药敏试验等关键操作技术的实用性专著。本书旨在为从事食品、药品、环境、临床及其他领域微生物检验的专业人员提供全面、系统、详细的操作指导和技术支持。全书共分为十章，内容涵盖了微生物检验的基础理论、常用仪器设备、培养基的制备与使用、标本采集与处理、微生物的分离与培养、菌落计数、微生物鉴定方法、微生物的药敏试验、微生物质量控制以及微生物实验室安全规范等。 第一章 导论 本章首先介绍了微生物在自然界及人类生活中的重要作用，强调了微生物检验在保障人类健康、食品安全、环境保护等方面的关键意义。接着，系统阐述了微生物检验的基本原理，包括微生物的生长特性、代谢途径以及与宿主的关系等。同时，对微生物检验的主要目标进行梳理，如病原微生物的检测、指示性微生物的监测、微生物数量的评估以及药物敏感性评估等，为读者建立微生物检验的整体认知框架。本章还简要回顾了微生物检验技术的发展历程，展望了未来的发展趋势，如分子生物学技术在微生物鉴定中的应用、自动化与智能化检验设备的发展等，激发读者的学习兴趣和对行业前景的思考。 第二章 微生物检验常用仪器设备 本章详细介绍了微生物检验实验室必备的各类仪器设备，并提供了详细的使用方法和维护保养建议。内容包括： 显微镜类：光学显微镜（包括普通光学显微镜、相差显微镜、荧光显微镜）和电子显微镜（扫描电子显微镜、透射电子显微镜）的原理、结构、操作要领、成像原理及常见故障排除。特别强调了油镜的使用方法和镜头的维护，以及不同类型显微镜在微生物形态观察中的应用。 培养与孵育设备：恒温培养箱、振荡培养箱、厌氧培养箱、CO2培养箱等。详细介绍了各类培养箱的控温原理、温度均匀性、湿度控制、使用注意事项以及定期校准的必要性。 灭菌与消毒设备：高压蒸汽灭菌器（Autoclave）、干热灭菌箱、紫外线消毒器、滤过除菌装置。深入讲解了各种灭菌方式的原理、适用范围、灭菌时间和温度的设定、灭菌效果的监测（如生物指示剂的使用）以及操作安全。 移液与定量设备：移液器（手动、自动）、移液枪、量筒、刻度吸管、容量瓶、称量天平（分析天平、精密天平）。强调了精确移液和称量的关键性，并对不同精度等级的量具进行了介绍，以及校准和维护的重要性。 其他常用设备：离心机、均质器、超声波清洗器、pH计、摇床、计时器等。对其工作原理、操作步骤、清洁消毒要求进行了详细说明。 第三章 培养基的制备与使用 培养基是微生物生长的基础，本章对培养基的类型、组分、制备方法、灭菌处理及使用注意事项进行了详尽阐述。 培养基的分类：根据用途（基础培养基、选择性培养基、鉴别培养基、增菌培养基、指示性培养基）、成分（天然培养基、合成培养基）以及物理状态（液体培养基、固体培养基、半固体培养基）进行了分类介绍。 常用培养基组分：碳源、氮源、无机盐、维生素、生长因子、指示剂、凝固剂（琼脂）等的选择与配比原理。 培养基的制备流程：精确称量、溶解、调节pH、分装、灭菌（高压蒸汽灭菌、滤过除菌）等关键步骤的详细操作指南。 无菌操作技术：强调了培养基制备过程中无菌操作的重要性，包括火焰灭菌、酒精棉球消毒、负压操作等。 常用培养基的配方与用途：如LB培养基、营养琼脂、血琼脂、MAC琼脂、EEM琼脂、LB肉汤等，并说明了它们各自适用的微生物类型和检验目的。 培养基的质量控制：培养基的宏观检查（颜色、透明度、pH）、灭菌效果检查、无菌性检查以及生长性能测定。 第四章 标本采集与处理 本章重点在于指导读者如何规范、准确地采集不同来源的微生物标本，以及对标本进行必要的预处理，以保证检测结果的准确性。 标本采集原则：无菌采集、防止污染、及时固定、足量采集。 不同类型标本的采集方法： 临床标本：血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液、伤口分泌物、咽拭子、鼻拭子等，详细说明了各自的采集器械、采集步骤、注意事项及标本保存要求。 食品标本：固体食品（肉类、蔬菜、乳制品）、液体食品（牛奶、饮料）、半固体食品（酱料）等的采样方法，包括采样器械、采样部位、采样量、无菌操作要点。 环境标本：空气（沉降法、采样器法）、水（地表水、饮用水、废水）、物体表面（器皿、手、设备表面）等的采样方法，包括采样介质（滤膜、采样器）、采样时间、采样体积。 标本的运输与保存：根据不同标本的性质，选择合适的运输介质（如生理盐水、采样拭子、专用运输管）和保存条件（如低温保存、常温运输），强调了及时送检的重要性。 标本的预处理：稀释、浓缩、匀浆、富集等方法，说明了这些预处理步骤的目的和操作要领。 第五章 微生物的分离与培养 本章是微生物检验的核心环节，详细介绍了如何从复杂样品中分离出目标微生物并进行纯培养。 微生物分离的基本原理：基于微生物对营养、环境条件（温度、pH、氧气）的差异性需求，以及对选择性培养基的响应。 分离培养技术： 划线分离法：四区划线法、三区划线法、连续稀释划线法等，详细讲解了划线技巧、目的和结果判读。 稀释平板法：十倍稀释法、倍比稀释法，用于定量检测微生物。 选择性分离法：使用选择性培养基（如MAC、EMB、XLD）抑制杂菌生长，促进目标菌生长。 增菌培养法：在液体培养基中，利用特定条件（如温度、pH、气体成分）促进少量目标菌的繁殖。 微生物培养的条件优化：温度、pH、湿度、氧气供应（好氧、厌氧、兼性厌氧）的控制。 特殊微生物的培养：如真菌（霉菌、酵母）、病毒（需细胞培养）、厌氧菌等，介绍其特殊的培养基和培养条件。 纯培养的鉴定：通过显微镜观察形态、革兰氏染色、简单的生化反应等初步判断分离到的微生物是否为纯培养。 第六章 菌落计数与定量检测 本章聚焦于如何准确地测定样品中微生物的数量，这在食品安全、水质检测、临床诊断等领域至关重要。 菌落计数原理：将样品中的微生物在合适的培养基上生长形成肉眼可见的菌落，通过计数菌落数来推算原始样品中的微生物数量。 常用计数方法： 稀释平板计数法：详细介绍了稀释液的配制、稀释步骤、平板制作（倾注法、铺板法）、培养条件、计数方法（如30-300法则）。 滤膜法：适用于低微生物含量的液体样品，如饮用水。 显微镜直接计数法：用于计数活菌或死菌。 结果的计算与报告：CFU/g（菌落形成单位/克）、CFU/mL（菌落形成单位/毫升）的计算公式，以及结果的表示方法和单位换算。 影响菌落计数的因素：培养基成分、培养温度、培养时间、稀释倍数、接种量、计数法则等。 定量PCR（qPCR）在微生物定量检测中的应用（简单提及）：作为一种分子生物学方法，用于精确检测特定微生物的DNA拷贝数，可实现对低丰度微生物的定量。 第七章 微生物鉴定技术 本章是确定分离到的微生物种类的关键，介绍了从宏观、微观到生化、分子生物学等多种鉴定方法。 形态学鉴定： 菌落特征：大小、形状、颜色、表面光滑度、边缘特征、透明度、气味等。 细胞形态：大小、形状（球菌、杆菌、螺旋菌）、排列方式（链状、簇状）、革兰氏染色反应。 生化鉴定： 传统生化鉴定：如糖发酵试验（产酸、产气）、Indole试验、Methyl Red（MR）试验、Voges-Proskauer（VP）试验、Citrate利用试验、Catalase试验、Oxidase试验等。 API鉴定系统：利用预制的微孔板进行一系列生化反应，通过比对数据库进行快速鉴定。 MALDI-TOF MS（基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱）：一种快速、准确的微生物鉴定技术，通过分析微生物蛋白质指纹进行物种鉴定。 分子生物学鉴定： 16S rRNA基因测序：一种经典的微生物鉴定方法，通过分析保守的16S rRNA基因序列进行物种分类。 全基因组测序：提供更详尽的遗传信息，可用于精细鉴定和菌株分型。 PCR与Real-time PCR：用于检测特定微生物的DNA。 免疫学鉴定：如ELISA、免疫荧光法，利用抗原抗体特异性反应进行鉴定。 第八章 微生物药敏试验（抗生素敏感性试验） 本章主要针对临床微生物检验，介绍如何测定细菌对抗菌药物的敏感性，为临床用药提供指导。 药敏试验的目的：确定引起感染的细菌对哪些抗菌药物敏感，为临床医生选择最有效的抗生素治疗方案提供依据。 常用药敏试验方法： 纸片扩散法（Kirby-Bauer法）：将含有已知浓度抗菌药物的纸片置于已接种细菌的琼脂平板上，通过测量抑菌圈直径来判断敏感性。 琼脂稀释法：将细菌接种于含有不同浓度抗菌药物的琼脂平板上，确定最低抑菌浓度（MIC）。 肉汤稀释法：与琼脂稀释法类似，在液体培养基中进行。 Etest法：一种条状药敏试验，可直接在琼脂平板上测定MIC。 药敏试验结果的判读：根据标准（如CLSI、EUCAST）将结果分为敏感（S）、中介（I）、耐药（R）。 影响药敏试验结果的因素：菌株特性、药物浓度、培养基成分、培养条件、接种量等。 耐药机制的研究：简要介绍细菌获得耐药性的常见机制，如基因突变、耐药基因转移等。 第九章 微生物质量控制 本章强调了微生物检验过程中的质量控制环节，以确保检验结果的准确性、可靠性和可重复性。 质量控制的目的：保证检验数据的有效性，避免假阳性、假阴性结果。 质量控制的要素： 方法学验证：对所使用的检测方法进行评估，确保其准确性、精密度、专属性、灵敏度、检测限等。 试剂和耗材的质量控制：对培养基、缓冲液、抗生素药片、抗体等进行批号管理、有效期检查、性能测试。 仪器设备的校准与维护：定期对培养箱、高压灭菌器、移液器、pH计等进行校准和性能验证。 阳性对照和阴性对照：在每次检验或一批检验中设置对照，用于监控检验过程。 空白试验：用于检测试剂、环境或操作过程中引入的污染。 微生物质控菌株的应用：使用已知特性（生长速度、药敏结果等）的质控菌株来评估方法和试剂的性能。 人员培训与考核：确保操作人员掌握必要的技术和知识，并定期进行培训和考核。 记录与追溯：建立完善的检验记录，包括原始数据、计算过程、结果报告，确保结果的可追溯性。 第十章 微生物实验室安全规范 本章是微生物检验工作安全的重要保障，详细介绍了微生物实验室的操作安全要求和应急处理措施。 微生物实验室的生物安全等级（BSL）：介绍不同生物安全等级实验室的建筑设计、设备要求、操作规范和个人防护措施（如BSL-1, BSL-2, BSL-3, BSL-4）。 个人防护装备（PPE）：实验服、手套、口罩、护目镜、面罩等的使用规范和更换原则。 无菌操作技术：在操作过程中如何最大限度地避免微生物的扩散和人员的暴露，如火焰灭菌、酒精消毒、负压操作。 废弃物处理：对受污染的培养基、标本、耗材等进行分类收集、灭菌处理（如高压蒸汽灭菌、化学消毒）后，按照规定进行无害化处置。 意外事故的预防与处理： 标本遗撒或破损：立即隔离、消毒、清理，并向负责人报告。 锐器伤（针刺、刀割）：立即挤压伤口、冲洗、消毒，并就医。 实验动物暴露：根据动物种类和暴露情况，采取相应的隔离和医疗措施。 实验室火灾：了解灭火器位置和使用方法，迅速报警、疏散。 实验室设备的安全操作：高压灭菌器、离心机、显微镜等设备的使用安全注意事项。 化学品安全：熟悉常用化学试剂的性质，掌握安全储存、使用和废弃方法。 应急预案的制定与演练：定期进行实验室安全培训和应急演练，提高人员的应急响应能力。 《微生物检验操作指南》以其严谨的科学性、详实的实践指导和鲜明的操作导向，将成为微生物检验领域从业人员不可或缺的参考书。本书的编写力求通俗易懂，图文并茂，旨在帮助读者快速掌握微生物检验的各项技术要领，提升工作效率和检验质量。

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从排版和可读性上来说，这本书的处理也体现了专业出版物的严谨性。字体选择清晰易辨，图表质量高，即使用放大镜查看细微的刻度和标注，也不会出现模糊不清的情况。更让我赞赏的是，它在提供标准方法的同时，还适当地加入了“经验之谈”或者“替代方案”的讨论。例如，在处理一些老旧仪器或特定地方性水样的分析时，如果标准方法难以实施，书里会给出一些经过验证的、更具灵活性的替代性技术路径，并明确指出这些替代方案在适用范围上的限制。这种“与时俱进”和“脚踏实地”的结合，让这本书的实用价值倍增。它没有被僵化的教条所束缚，而是鼓励使用者在保证科学性的前提下，灵活应对复杂的现实问题。总而言之，这是一部集理论深度、操作广度、前沿视野和安全规范于一体的优秀技术专著，对于提升整个检验领域的专业素养，具有积极的推动作用。

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说实话，这本书的厚度和内容密度让人有点望而生畏，初次接触可能会觉得信息量过载。但我后来发现，它的编排方式其实非常巧妙地适应了不同层次读者的需求。对于初学者来说，每一章节开头的“知识点梳理”部分，用简洁的语言勾勒出了核心概念，可以快速建立起知识框架。而对于我们这些有一定经验的专业人士而言，书的后半部分深入探讨的那些复杂干扰因素的排除和疑难杂症的分析，才是真正的精华所在。我记得有一处专门讨论了水质分析中重金属离子的基质效应，它不仅分析了常见的化学干扰，还从电化学角度解释了信号衰减的机理，这种跨学科的分析视角非常开阔。这本书的文字风格非常克制，极少使用修饰性语言，完全是用事实和数据说话，这在专业技术书籍中是最高效的沟通方式。每次翻阅，我都能从中挖掘出一些之前忽略的细节，它更像是一本可以陪伴职业生涯不断成长的案头宝典，而不是一本读完就束之高阁的速成手册。

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这本书，说实话，拿到手的时候我就被它的厚度给镇住了。封面设计得挺朴实的，没有太多花哨的东西，一看就知道是那种非常“硬核”的专业教材或者参考书。我本来是抱着试试看的心态翻开的，毕竟市面上讲卫生和检验技术的书很多，质量参差不齐。但这本书的开篇就给了我一个非常好的印象，它没有用那种空泛的理论去糊弄人，而是直接切入到实际操作的核心环节。比如，关于样本的预处理和基本理化指标的测定部分，作者的讲解细致到连不同溶剂的使用注意事项和潜在的干扰因素都一一列举，看得出作者在实际工作中有非常深厚的积累。我特别欣赏它在图文结合上的处理，那些流程图和设备构造图画得非常清晰，即便是一些复杂的仪器操作步骤，也能让人一目了然。对于我们这些需要频繁接触实验室工作的人来说，这种详尽的指导简直就是救命稻草。我感觉自己像是在跟着一位经验丰富的前辈在进行实操培训，而不是单纯地阅读文字描述。它不仅仅是告诉你“怎么做”，更重要的是解释了“为什么要这么做”，这种对原理的深入挖掘，对于提升我们对检验结果准确性的理解至关重要。

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我特别关注这本书在安全操作规范方面的论述。在检验工作中，操作的安全性与结果的准确性同等重要。这本书在这方面的着墨之重，远超我预期。它不仅仅是简单地提醒“要穿戴防护用品”，而是详尽地描述了不同级别生物安全风险下，实验室布局、通风系统、废弃物无害化处理的具体流程和标准要求。对于易制毒化学品和高致病性病原体的管理，它也给出了非常具体可操作的SOP（标准操作程序）模板。我发现自己过去在一些细节处理上确实存在疏漏，比如某些试剂的混合顺序和反应放热的控制，这本书都有详细的警告标识和处理预案。这种对细节的关注，体现了作者对实验室风险管理的深刻理解和高度责任心。它让我深刻意识到，检验技术不仅仅是冰冷的仪器和数据，更是一门关于严谨、细致和负责任的科学艺术。这本书无疑能帮助从业者大幅降低操作风险，提升整个实验室的安全管理水平。

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我对这本书的结构和内容的组织逻辑感到非常惊喜。它似乎是围绕着一个完整的检验工作流来设计的，从基础知识的建立，到具体方法的应用，再到质量控制和结果的判读，层层递进，非常自然。我读到关于微生物污染检测的那一章时，尤其印象深刻。它没有仅仅停留在传统的培养基介绍上，而是花了相当篇幅去讨论新型快速检测技术，比如PCR和免疫学方法在食品安全和公共卫生领域的应用前景与局限性。这种对前沿技术的关注度，让这本书的价值远远超过了一本标准的“工具书”。更难能可贵的是，它在描述每一种检测方法时，都会附带相关的法规标准引用，这对于我们日常工作中的合规性要求来说，是不可或缺的参考信息。我平时查阅标准文件总是费时费力，但这本书像是把最核心、最常用的标准条款嵌入到了技术讲解之中，极大地提高了我的工作效率。整体来看，它的学术严谨性和实践指导性达到了一个很好的平衡点，阅读体验非常流畅，没有那种生硬的“被灌输”感。

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