生物分子实验教材

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出版者:
作者:翟朝阳 编
出品人:
页数:178
译者:
出版时间:2004-6
价格:17.00元
装帧:
isbn号码:9787561428214
丛书系列:
图书标签:
  • 生物化学
  • 分子生物学
  • 实验教学
  • 生物技术
  • 大学教材
  • 理工科
  • 科学
  • 实验室
  • 教学参考
  • 生物学
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具体描述

为了适应高等院校教育改革,新的四川大学建立了医学生物分子实验室,并将原来免疫学、生物化学和分子生物学的实验课程纳入这个实验室的教学范畴。这本教材就是在这个背景下产生的。

这本教材的内容,除包括了原有的免疫学、生物化学和分子生物学三门课程的主要实验外,还设计了一些综合性实验,其目的不仅要让学习者通过这样的实验掌握较全面的实验技能,而且要使他们能够将各学科的知识贯通起来综合运用。由于这样的实验需要连续的操作,对学习者的意志、耐力、信心也将是一个考验。希望通过这样的实验课学习,对学习者素质的提高有所帮助。

《分子生物学基础实验指南》 本书旨在为生物科学领域的学生和研究人员提供一套全面、实用且易于操作的分子生物学实验技术指导。内容涵盖了分子生物学研究中常用和关键的实验方法,旨在帮助读者掌握理论知识,熟练运用实验技术,并能独立设计和执行相关实验。 核心内容介绍: 第一部分:分子生物学实验基础 1. 核酸的提取与纯化: 基因组DNA的提取: 详细介绍了动植物组织、微生物以及血液等不同样本类型中基因组DNA的提取方法,包括细胞裂解、蛋白质和RNA的去除、DNA沉淀和洗涤等关键步骤。重点阐述了不同提取试剂盒(如硅胶膜吸附法、酚-氯仿抽提法)的原理、操作要点和注意事项,并提供了DNA浓度、纯度和完整性的鉴定方法(如NanoDrop、琼脂糖凝胶电泳)。 质粒DNA的提取: 涵盖了碱裂解法和商业化试剂盒法提取质粒DNA的详细步骤,强调了去除细菌基因组DNA和RNA的技巧,并提供了质粒DNA的质量检测方法。 RNA的提取与纯化: 详细讲解了总RNA的提取方法,包括Trizol法、RNeasy等商业化试剂盒法,重点阐述了RNA易降解的特性及其在操作过程中需要采取的防护措施(如RNase-free环境)。同时,介绍了mRNA的选择性提取方法,并提供了RNA纯度(A260/A280、A260/A230)和完整性(RIN值)的评估手段。 2. 核酸的定量与检测: 紫外-可见分光光度法: 详细讲解了利用Nanodrop等仪器进行DNA、RNA和蛋白质定量的方法,以及不同波长下吸光度值对核酸纯度的影响(如A260/A280、A260/A230)。 琼脂糖凝胶电泳: 深入解析了琼脂糖凝胶电泳的原理,包括凝胶浓度对DNA片段分离效率的影响,电泳缓冲液的选择,DNA染料(如EB、Gel Green)的使用,以及电泳结果的判读(如DNA片段大小的估计、DNA的完整性)。 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE): 详细介绍了PAGE在核酸(特别是短寡核苷酸和PCR产物)分离中的应用,包括凝胶配制、电泳条件设置和银染/荧光染色的方法。 3. 聚合酶链式反应 (PCR): PCR原理与基本组分: 详细阐述了PCR反应的三个基本循环(变性、退火、延伸)以及其背后的分子生物学原理。详细介绍了PCR反应所需的关键组分,包括DNA模板、引物、dNTPs、DNA聚合酶(如Taq酶、Pfu酶)和反应缓冲液。 PCR反应优化: 提供了PCR反应条件优化的多种策略,包括退火温度的确定、引物浓度和比例的调整、Mg2+浓度的优化、DNA聚合酶的选择以及模板量的控制,以提高PCR反应的特异性和产率。 多种PCR技术: 介绍了多种重要的PCR技术及其应用,如: RT-PCR(逆转录PCR): 详细讲解了RNA反转录为cDNA的原理和操作步骤,以及将其用于基因表达分析的方法。 Real-time PCR(定量PCR): 阐述了通过荧光信号实时监测PCR扩增过程的原理,介绍了SYBR Green和TaqMan探针法,以及如何进行基因的绝对定量和相对定量。 Nested PCR、Touchdown PCR、Long-range PCR等: 简要介绍了这些技术在提高特异性、扩增长片段或低丰度模板等方面的应用。 4. 凝胶成像与分析: 凝胶成像系统: 详细介绍了常用凝胶成像系统(如凝胶成像仪、凝胶电泳分析仪)的使用方法,包括光源选择、滤光片设置、曝光时间控制等。 图像分析软件: 介绍了常用的凝胶图像分析软件(如ImageJ),并演示了如何进行条带的密度和迁移距离的测量,以及如何进行定量分析。 第二部分:分子克隆与基因工程技术 1. 限制性内切酶及其应用: 限制性内切酶的分类与作用机制: 详细介绍了不同类型限制性内切酶(I、II、III型)的特点、识别序列和切割模式,以及它们在DNA分子操作中的关键作用。 DNA的酶切与连接: 详细讲解了DNA的限制性内切酶消化操作流程,包括酶的选择、反应体系的优化、反应时间的控制以及酶切产物的鉴定。介绍了T4 DNA连接酶的工作原理,以及平末端连接和粘性末端连接的方法,并提供了连接反应优化和结果验证(如转化、PCR鉴定)的指导。 2. 载体的选择与构建: 常用载体类型: 详细介绍了不同类型的载体,如质粒载体、噬粒载体、病毒载体等,并分析了它们的结构组成(如复制起点、选择标记、多克隆位点)和适用范围。 基因克隆策略: 介绍了将目标基因插入到载体中的常见策略,包括使用限制酶和连接酶进行定向克隆,以及使用TA克隆、Gateway克隆系统等高效克隆技术。 载体转化: 详细讲解了将重组载体导入宿主细胞(如大肠杆菌)的常用方法,包括热激法、电击穿法、化学转化法等,并提供了转化效率的评估和筛选方法。 3. 基因表达与调控研究: 原核表达系统: 介绍了在大肠杆菌等原核生物中表达重组蛋白的技术,包括诱导表达、蛋白复性、纯化等步骤,以及常用表达载体(如pET系列)的特点。 真核表达系统: 介绍了在哺乳动物细胞、酵母等真核生物中进行基因表达的方法,包括载体的选择、转染/转化、瞬时表达和稳定细胞株的建立。 基因敲除与基因编辑(CRISPR/Cas9): 简要介绍了基因敲除技术在研究基因功能中的应用,并重点阐述了CRISPR/Cas9基因编辑系统的原理、设计策略和操作流程,以及其在定向基因修饰中的强大能力。 第三部分:生物信息学在分子生物学实验中的应用 1. 序列分析与数据库查询: 常用生物信息学数据库: 介绍了NCBI、Ensembl等重要生物信息学数据库的结构和查询方法,如GenBank、RefSeq、UniProt等。 序列比对与同源性分析: 讲解了BLAST等序列比对工具的使用,以及如何分析序列的同源性、查找同源基因和预测蛋白功能。 2. 引物设计与PCR产物预测: 引物设计软件: 介绍了Primer3、Oligo等常用引物设计软件的使用,并提供了设计高质量PCR引物的原则,包括Tm值、GC含量、二聚体和发夹结构的避免。 PCR产物预测: 演示了如何利用引物序列在数据库中预测PCR产物的大小和特异性。 本书特色: 循序渐进: 从基础概念讲起,逐步深入到复杂的实验技术,适合不同水平的学习者。 图文并茂: 大量配图和流程图,直观展示实验步骤和结果。 实验细节: 强调关键操作步骤和潜在问题,帮助读者避免常见错误。 理论与实践结合: 解释实验背后的原理,让读者知其然更知其所以然。 案例分析: 穿插实际实验案例,提升读者的解决问题能力。 安全性指导: 包含实验操作中的安全注意事项,确保实验顺利进行。 《分子生物学基础实验指南》将是您进行分子生物学实验研究的得力助手,助您在生命科学的探索之路上取得丰硕成果。

作者简介

目录信息

读后感

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用户评价

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总的来说,这本书是一本非常全面且实用的生物分子实验教材。它将深奥的理论知识、细致的操作步骤、严谨的数据分析以及广泛的实际应用有机地结合在一起。我从中不仅学到了掌握一项项实验技能,更重要的是,它培养了我严谨的科学态度和解决问题的能力。我相信,无论我是学生还是初入科研的同行,这本书都能为我提供坚实的理论基础和宝贵的实践指导。它不仅仅是一本教材,更像是一位循循善诱的老师,带领我在生物分子的世界里不断探索和前行。对于任何希望深入了解和掌握生物分子实验技术的人来说,这本书都绝对是不可或缺的参考。

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这本书在实验所需的试剂、仪器和耗材方面,也都提供了非常详细的清单和规格说明。例如,在进行PCR实验时,会详细列出引物、dNTP、Taq酶的浓度和用量,以及PCR仪的程序设置。这些具体而精确的信息,对于确保实验的成功率至关重要。书中还对一些常用实验仪器的原理和操作注意事项进行了介绍,例如高速离心机、紫外可见分光光度计等,这对于缺乏实际操作经验的学习者来说,无疑是宝贵的指导。它不仅仅是提供了一份操作指南,更像是把我带入了一个实际的实验室环境,让我提前熟悉了可能用到的各种设备和材料,从而能够更有信心地投入到实际的实验操作中去。

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我特别喜欢书中关于实验设计和数据分析的部分。它不仅仅是教会我如何动手操作,更重要的是教会我如何科学地思考和解决问题。书中列举了多个典型的实验设计案例,并详细分析了不同实验设计思路的优缺点,以及如何根据研究目的选择最合适的实验方案。在数据分析方面,这本书也提供了详细的指导,包括如何处理实验数据,如何绘制规范的图表,以及如何解读实验结果。它还介绍了一些常用的统计学方法在生物分子实验中的应用,帮助我更准确地评估实验数据的可靠性和统计学显著性。这种能力的培养,对于我未来进行更复杂的科学研究至关重要,它不仅仅是掌握一项技能,更是掌握一种科学的思维方式和研究方法。

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这本书的排版设计也非常值得称赞。每一页的文字和图表分布都十分合理,留白也恰到好处,不会让人产生视觉疲劳。章节之间的过渡自然流畅,段落之间的逻辑清晰。在重点内容上,书中采用了加粗、斜体、项目符号等多种方式进行强调,使得关键信息一目了然。我特别喜欢书中对公式和定理的呈现方式,它们被清晰地列出,并附有详细的解释,便于我理解和记忆。图表的标注也十分规范,所有轴、曲线、图例都有明确的说明,确保读者能够准确理解图表所传达的信息。这种细致的排版,极大地提升了我的阅读体验,让我能够更专注于知识的学习本身,而不是被混乱的排版所困扰。

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在阅读的过程中,我发现这本书在实验操作步骤的描述上,非常细致和具体。它不仅仅是简单地列出操作步骤,而是会详细解释每一步操作的目的和原理,例如在进行蛋白质沉淀时,会详细说明不同浓度盐析对蛋白质溶解度的影响,以及为什么需要控制离心速度和时间。这种“知其然,更知其所以然”的讲解方式,极大地提升了我对实验的理解深度。我尤其欣赏书中对实验过程中可能出现的常见问题及其解决方法进行的分析,这对于我在实际操作中遇到困难时,能够提供及时的指导和帮助,避免走弯路。书中还配有大量精美的图示和流程图,这些图示清晰地展示了实验仪器的使用方法、实验装置的搭建过程,以及关键实验步骤的视觉呈现。这些图示的加入,让原本枯燥抽象的实验操作变得直观易懂,大大降低了学习难度,也让我对实验操作的每一个细节都能够做到心中有数。

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在阅读这本书的过程中,我感受到了作者在编写时的用心。他们似乎充分考虑到了不同层次读者的需求。对于初学者,他们提供了详尽的基础知识和易于理解的操作步骤。对于有一定基础的读者,他们则提供了更深入的原理分析和更复杂的实验案例。我注意到,书中在引用实验方法时,会明确指出其来源和适用范围,这体现了作者严谨的学术态度。此外,书中还穿插了一些历史性的实验案例,讲述了这些实验技术是如何被发现和发展起来的,这不仅增加了阅读的趣味性,也让我对科学的进步有了更直观的感受。这种全方位的考量,使得这本书几乎可以满足生物分子实验领域所有学习者的需求,无论你是本科生、研究生,还是科研工作者。

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这本书的封面设计给我留下了深刻的第一印象,简约而不失专业感。封面上“生物分子实验教材”几个大字,印刷清晰,字体选择也比较稳重,传递出一种严谨治学的氛围。我特别喜欢封面的配色,采用了一种较为柔和的蓝色调,辅以少量白色和浅灰色,给人一种宁静致远的感觉,仿佛置身于一个充满知识的实验室。翻开书本,纸张的质感也非常不错,厚实而略带磨砂感,翻页时没有刺耳的摩擦声,手感舒适。印刷质量也是一流的,文字清晰锐利,没有出现模糊或重影的情况。我注意到,这本书在细节上也做得相当到位,例如书脊处的装订非常牢固,即使经常翻阅也不会轻易散架。总的来说,从这本书的外观包装到纸张印刷,都透露出一种对品质的追求,这让我对它内在的内容充满了期待,相信它会是一本值得我认真研读的优秀教材。

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我刚拿到这本书,迫不及待地翻开了目录。目录的结构安排得非常清晰,条理分明,让我对整本书的内容有了初步的了解。从目录来看,这本书涵盖了生物分子实验的多个重要领域,每个章节都列出了详细的子标题,例如“蛋白质的提取与纯化”、“核酸的提取与检测”、“酶活性的测定”等等,这些都是生物分子领域的核心实验技术。更让我惊喜的是,在一些实验名称后面,还标注了实验的关键步骤或涉及的核心概念,这对于初学者来说无疑是一大福音,能够帮助他们更快地抓住实验的重点。此外,目录的设计也考虑到了实验的逻辑性,将相关的实验技术按照一定的顺序排列,这使得我可以循序渐进地学习和掌握这些知识。这种精心设计的目录,不仅方便了我查找特定内容,也为我规划学习路径提供了极大的便利,让我能够更有针对性地投入到学习中去。

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我在阅读这本书时,常常会发现作者在讲解实验技术时,会将其与生物分子的实际功能和应用联系起来。例如,在介绍蛋白质电泳时,会详细说明不同大小和电荷的蛋白质在电场中的迁移差异,并将其与蛋白质的功能研究、诊断检测等实际应用联系起来。这种将实验技术置于更广阔的生物学背景下进行讲解的方式,让我不仅仅是学会了如何操作,更理解了这些实验技术在推动生命科学发展中的重要作用。它帮助我认识到,每一个实验操作的背后,都蕴含着对生命奥秘的探索和对疾病治疗的希望。这种联系,也激发了我学习更多生物分子知识的兴趣,让我对未来的研究方向有了更清晰的认识。

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这本书的理论讲解部分也做得相当出色。它在介绍每一个实验技术之前,都会先对其背后的生物化学和分子生物学原理进行深入浅出的阐述。例如,在讲解DNA提取时,会详细介绍细胞结构、DNA在细胞内的存在形式,以及各种裂解剂和沉淀剂的作用机制。这种理论与实践相结合的讲解方式,不仅帮助我理解了实验操作的依据,也让我对生物分子的性质和行为有了更深刻的认识。书中使用的语言通俗易懂,避免了过于生涩的专业术语,即使是初次接触这些实验的学生,也能轻松理解。同时,它也提供了进一步深入学习的参考文献和背景知识,为那些希望深入研究的读者提供了更多探索的空间。这种既注重基础理论,又不失前沿知识的特点,使得这本书既适合作为入门教材,也能够满足一定程度的进阶需求。

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