目 錄
前言
第一章 細胞化學概論
第一節 概述
第二節 細胞化學染色標本及其方法的原理
一、金屬-金屬鹽沉澱反應原理
二、偶氮偶聯法原理
三、過碘酸Schiff氏劑反應法原理
四、聯苯胺法原理
五、色素形成法原理
六、脫氫酶顯示法原理
七、底物標記法原理
八、熒光染色與免疫熒光法原理
九、酶標抗體法原理
第三節 細胞化學染色標本製備過程中的注意事項
第二章 核酸、糖原和酶的細胞化學方法
第一節 核酸和硫氫基的顯示
一、孚爾根反應顯示DNA方法
二、甲綠-派郎寜顯示脫氧核糖核酸和核糖核酸
三、吖啶橙熒光染色顯示DNA和RNA
四、DDD法顯示硫氫基
第二節 多糖類的顯示
一、過碘酸雪夫反應顯示糖元和其它多糖物質
二、愛先蘭-PAS法顯示酸性和中性粘多糖物質
第三節脂類的顯示
第四節酶的顯示
一、堿性磷酸酶的顯示
二、酸性磷酸酶的顯示法
三、三磷酸腺苷酶顯示法
(一)酸性ATPase顯示法
(二)中性ATPase顯示法
(三)堿性ATPase顯示法
四、葡萄糖-6-磷酸酶顯示法
五、5-核苷酸酶的顯示法
六、β-葡萄糖醛酸酶顯示法
七、α-醋酸萘酯酶顯示法
八、細胞色素氧化酶顯示法
九、過氧化酶顯示法
十、單胺氧化酶顯示法
十一、琥珀酸脫氫酶顯示法
十二、乳酸脫氫酶顯示法
十三、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶顯示法
十四、還原型輔酶Ⅰ顯示法
十五、還原型輔酶Ⅱ顯示法
第五節 常用緩衝液配製
第三章 細胞化學定量技術――顯微分光光度計
第一節 概述
第二節 原理
第三節 顯微分光光度儀的組成
一、光源
二、單色器和濾光片
三、顯微鏡
四、光電組閤件
五、標本製備
六、測量方法
第四章 細胞化學定位和定量技術在中西醫領域中的應用
第一節 在細胞生物學研究中的應用
第二節 對腫瘤細胞DNA的定量研究
第三節 對中藥抗腫瘤作用機理的研究
第四節 對針刺作用機理的研究
第五節 對中醫“脾氣虛”證研究的應用
第六節 在酒精性肝損傷診治研究中的應用
第七節 在運動性肌肉研究的應用
第八節 中藥大蒜油對人宮頸糜爛的細胞化學研究
第五章 細胞化學技術在中醫微觀辨證學研究中的應用
第一節 陰陽虛實辯證的細胞化學研究
第二節 在舌苔原理研究中的應用
第三節 寒熱辨證舌苔上皮定量細胞化學
第四節 脾虛患者外周血免疫細胞ANAE 的細胞化學研究
第五節 虛實辨證紅細胞免疫功能與淋巴細胞ANAE 活性同步檢測
第六節 慢性腎炎患者外周血細胞化學ANAE變化與中醫辨證關係的研究
第七節 胃脘痛屬脾虛者舌苔上皮的細胞化學研究
第八節 潛熄寜對2KIC-RHR心肌糖原含量及琥珀酸脫氫酶活性的影響
第九節 潛熄寜對2KIC-RHR模型淋巴細胞ANAE 活性影響
第六章 流式細胞術及其應用
第一節 原理
第二節 標本的製備
一、新鮮標本的製備
二、石蠟包埋樣品的製備
三、染色方法
四、流式細胞術檢測人外周血T細胞亞群
五、DNA倍體分析
六、流式細胞術分析Bcl-2基因蛋白
第三節 流式細胞術在細胞周期研究中的應用
一、腫瘤學方麵
二、染色體核型分析
第四節 流式細胞術在免疫學方麵的應用
第五節 流式細胞術在中藥抗癌作用方麵的應用
第六節 流式細胞術在腫瘤細胞凋亡研究中的應用
第七章 激光掃描共聚焦顯微術及應用
第一節 原理
第二節 特點
第三節 功能和應用
一、單染樣品的觀察和分析
二、雙染樣品的觀察和分析
三、自動圖象掃描觀察與分析
四、直方圖分析
五、動態觀察
六、熒光光漂白後的光恢復-活細胞內分子運動的測定
七、細胞間通訊的測定
八、免疫熒光的定量測定
九、生物活性物質活性封閉和解封閉的測定
十、細胞膜流動性測定
十一、定量共聚焦圖像分析
十二、粘附細胞分選
十三、細胞內激光顯微外科
十四、應用
十五、幾種熒光染料的染色方法
第四節 雙光子(多光子)顯微鏡
一、雙光子技術的原理
二、雙光子顯微鏡的優點
第八章 電鏡細胞化學及其應用
第一節 電鏡細胞化學的基本技術
一、取材與固定
二、漂洗組織
三、預切片
四、置換緩衝液
五、孵育
六、二次漂洗
七、後固定
八、脫水、包埋
九、超薄切片和染色
第二節 糖類的電鏡細胞化學
一、高碘酸鹽一硫卡巴肼-蛋白銀(PA-TCH-SP)染色法
二、透析鐵染色法
三、高鐵二胺染色法
第三節 脂類的電鏡細胞化學
一、基本原理
二、用品
三、操作步驟
四、結果
五、注意事項
第四節 酶的電鏡細胞化學
一、酸性磷酸酶
二、胞嘧啶單核苷酸酶
三、堿性磷酸酶
四、5-核苷酸酶
五、葡萄糖-6-磷酸酶
六、三磷酸腺苷酶
七、腺苷酸環化酶和鳥苷酸環化酶
八、煙酰胺腺膘呤二核苷磷酸酶
九、焦磷酸硫胺素酶
十、乙酰膽堿酯酶
十一、髓過氧化物酶
十二、血小闆過氧化物酶
十三、單胺氧化酶
十四、細胞色素氧化酶
十五、琥珀酸脫氫酶
第五節 酶電鏡細胞化學的注意事項
第六節 緩衝溶液的配製
第七節 電鏡細胞化學的應用
第九章 免疫組織、細胞化學及其應用
第一節 免疫組織、細胞化學的原理
第二節 免疫組織、細胞化學的常用染色方法
一、免疫熒光法
二、免疫酶法
三、抗生物素-生物素-過氧化物酶復閤物(ABC法)
第三節 非特異性染色及染色對照
一、非特異性染色及其消除方法
二、染色對照
三、抗體稀釋度
第四節 原位雜交
一、探針
二、試劑配製
三、標本製備
四、雜交與顯色
五、原位雜交對照試驗
第五節 免疫組織細胞化學在醫學研究中的應用
一、大鼠胃腸胰係統IAPP免疫反應細胞的定位及發育研究
二、大鼠實驗性胃潰瘍自愈機製研究
三、免疫組織細胞化學在消化係統中的應用
第十章 免疫金銀染色技術和抗獨特型抗體製備及其應用
第一節 免疫金銀染色技術的基本原理
第二節 溶膠的基本概念及內涵
一、分散體係
二、溶膠的製備
三、溶膠的純化
四、溶膠的顔色
五、溶膠的穩定性和聚結
六、影響溶膠穩定性的因素
第三節 膠體金的製備方法
一、製備前的準備
二、製備方法和步驟
第四節 膠體金標記蛋白質的製備
一、待標記蛋白和金溶膠的準備
二、膠體金與待記蛋白質用量比例的確定
三、膠體金與待記蛋白質的結閤
四、膠體金標記蛋白質的純化
五、膠體金標記蛋白質的質量鑒定
第五節 應用於光鏡水平的免疫金銀法
一、免疫組化濾紙模型的應用
二、石蠟切片的IGSS染色
三、冰凍切片的IGSS染色
四、半薄切片的IGSS染色
第六節 應用於電鏡水平的免疫金法
一、包埋前染色
二、包埋後染色
第七節 雙重和多重免疫標記方法原理簡介
一、應用膠體金標記特異性抗體的直接法
二、應用不同種動物産生的特異性抗體及相應的標記二抗的間接法
三、應用同種動物特異性抗血清及相應的標記二抗的間接法
四、應用同種動物特異性抗血清及膠體金-葡萄球菌A蛋白法
五、標記抗原法
第八節 抗獨特型抗體在免疫學中的應用
一、抗體的獨特型與抗獨特型
二、抗獨特型抗體Ab2β的製備與檢測
三、抗獨特型抗體在疫苗研究中的應用
四、抗獨特型抗體應用於受體的純化及定位
五、抗獨特型抗體在實際應用中的利與弊
第十一章 中間絲的免疫細胞化學及應用
第一節 中間絲與腫瘤的鑒彆診斷
一、中間絲
二、抗角蛋白抗體及癌的鑒彆診斷
三、波紋蛋白、結蛋白抗體及軟組織肉瘤的診斷
四、膠質細絲蛋白抗體與膠質瘤的診斷
五、抗神經絲蛋白抗體與神經瘤的診斷
第二節 中間絲腫瘤鑒彆法遇到的新問題
一、中間絲的分布似乎並非一定“特異”
二、中間絲的分布似乎也不是一成不變
第十二章 細胞凋亡和幾種基因錶達
第一節 細胞凋亡的研究簡史
一、細胞凋亡的概念
二、細胞凋亡的特點
第二節 細胞凋亡與腫瘤
第三節 細胞凋亡的機理
一、核酸內切酶在細胞凋亡中的作用
二、榖氨酰胺轉移酶
三、蛋白激酶C(PKC)
四、細胞凋亡相關基因
第四節 細胞凋亡的分子調節
一、c-myc癌基因與細胞凋亡
二、-abl原癌基因
三、Bcl-2抑製細胞凋亡及其機理
四、抑癌基因p53與細胞凋亡
五、ICE基因
六、APO-I(Fas)係統
七、p21基因和細胞分化及細胞凋亡
第五節 影響細胞凋亡的因素及腫瘤治療
一、誘導細胞凋亡的因素或因子
二、細胞生長因子去除後細胞凋亡
三、細胞凋亡的抑製
四、細胞凋亡與腫瘤治療
五、中藥誘導腫瘤細胞凋亡的研究
第六節 細胞凋亡的檢測
一、細胞通訊檢測
二、細胞調亡檢測
中、英文索引
圖譜說明
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