Flow Cytometry, Part B, Volume 42, Second Edition (Methods in Cell Biology) (Vol 42) pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:Academic Press

作者:

出品人:

页数:0

译者:

出版时间:1994-11-23

价格:USD 108.00

装帧:Paperback

isbn号码:9780122030529

丛书系列:

图书标签:

• Flow Cytometry
• Cell Biology
• Methods
• Immunology
• Biotechnology
• Biophysics
• Molecular Biology
• Laboratory Techniques
• Research
• Second Edition

流式细胞术：细胞分析的基石 (方法学探索) 流式细胞术，一项在细胞生物学研究中扮演着至关重要角色的技术，其强大的能力在于能够对单个细胞进行高通量、多参数的定量分析。这项技术不仅改变了我们理解细胞生物学基本原理的方式，更在疾病诊断、药物开发以及免疫学等领域开辟了新的视野。本书旨在深入探讨流式细胞术的核心原理、关键技术及其在现代生命科学研究中的广泛应用。 核心原理与技术深度解析 流式细胞术的本质是通过将悬浮的细胞逐一通过一个激光束，并检测这些细胞与激光相互作用时产生的荧光信号和散射光信号。这些信号经过精密的光学和电子系统转化，最终形成可供分析的数据。本书将从最基础的光学原理入手，详细阐述激光的选择、信号的激发与检测、滤光片的种类与功能，以及电子信号的采集与处理。我们将探讨荧光染料的标记原理、不同类型荧光蛋白的特性，以及如何根据实验需求选择最优的荧光标记策略。 散射光信号，包括前向散射光 (FSC) 和侧向散射光 (SCA)，是流式细胞术中提供细胞形态学和内部复杂性信息的关键。FSC 通常与细胞的体积大小相关，而SCA则反映了细胞内部的颗粒物含量和细胞核的复杂性。本书将深入解析散射光的产生机制，并指导读者如何利用这些参数来区分不同的细胞群体，例如区分淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。 多参数分析是流式细胞术的另一大亮点。通过同时标记多种荧光抗体，我们可以一次性分析同一个细胞的多个表面或胞内蛋白的表达水平。本书将详细介绍抗体标记的策略，包括单克乔抗体和多克隆抗体的选择，以及如何优化抗体浓度以获得最佳的染色效果。我们还将探讨如何设计多色流式实验，避免荧光补偿问题，并成功区分复杂的细胞亚群。 关键技术与实验设计 本书将详细介绍流式细胞术在实际操作中的关键技术要点。从样本的制备，包括细胞悬液的制备、抗原的表面或胞内染色，到仪器参数的设置，如电压、增益、补偿等，都将提供细致的指导。实验设计是流式细胞术成功的基石，我们将深入讨论如何根据研究问题设计合理的实验方案，选择合适的染料和抗体组合，并设置必要的对照组，以确保实验结果的准确性和可靠性。 除了常规的细胞表面和胞内蛋白分析，本书还将介绍流式细胞术在其他方面的应用，例如： 细胞周期分析： 利用DNA染料（如PI、7-AAD）标记DNA含量，结合细胞周期相关蛋白的检测，精确分析细胞在G1、S、G2/M期的分布，揭示细胞增殖和凋亡的动态过程。 细胞凋亡检测： 介绍Annexin V/PI染色法、caspase活性检测等流式方法，用于评估细胞凋亡的早期和晚期阶段。 细胞因子分泌分析： 通过胞内染色技术，检测细胞在刺激后分泌的细胞因子，揭示免疫细胞的功能状态。 细胞活力和毒性评估： 利用特定的染料和方法，区分活细胞、死细胞和凋亡细胞，评估外源物质对细胞的毒性。 流式细胞分选 (FACS)： 详细介绍FACS的原理和技术，及其在分离特定细胞群体、进行后续培养或基因组分析中的重要作用。 数据分析与解读 流式细胞术产生海量数据，如何有效地分析和解读这些数据是实验成功的关键。本书将介绍常用的流式数据分析软件，如FlowJo、Diva等，并提供详细的操作指南。我们将学习如何绘制散点图、直方图、密度图等，以及如何进行门控 (gating) 操作，精确地识别和分离目标细胞群体。 补偿 (compensation) 是多色流式实验中不可或缺的步骤，本书将深入解释荧光溢出现象，并提供精确的补偿方法，以校正不同荧光通道之间的交叉污染，确保数据的准确性。我们还将探讨如何进行统计分析，以及如何将流式数据与生物学结论相结合，得出有意义的科学发现。 应用领域与未来展望 流式细胞术的应用已经渗透到生命科学的各个角落。在免疫学领域，它被广泛用于免疫细胞的表型鉴定、免疫应答的监测以及自身免疫性疾病的研究。在肿瘤研究中，流式技术帮助我们分析肿瘤细胞的异质性、评估治疗效果以及监测复发。在干细胞研究中，流式技术用于鉴定和分离干细胞亚群，研究其分化潜能。此外，流式细胞术在血液学、微生物学、药理学以及临床诊断等领域也发挥着越来越重要的作用。 本书还将展望流式细胞术的未来发展趋势，包括微流控技术与流式细胞术的结合，单细胞测序与流式技术的整合，以及人工智能在流式数据分析中的应用，这些前沿技术必将为细胞生物学研究带来更广阔的可能性。 总之，本书致力于为广大生命科学研究者提供一套全面、深入且实用的流式细胞术指南，帮助您掌握这项强大的技术，推动您的科学研究迈上新的台阶。

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