Gene Knockout Protocols

Gene Knockout Protocols pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:
作者:Kuhn, Ralf (EDT)
出品人:
页数:532
译者:
出版时间:2009-4
价格:$ 168.37
装帧:
isbn号码:9781934115268
丛书系列:
图书标签:
  • 基因敲除
  • 基因编辑
  • 分子生物学
  • 实验方案
  • 生物技术
  • 细胞生物学
  • 遗传学
  • 实验室技术
  • 研究方法
  • 生物医学
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具体描述

With the completion of the mouse and human genome sequences, the functional characterization of every mammalian gene and the deciphering of their molecular interaction network has become the next major challenge, and the mouse genome provides a convenient and vital model for these studies. In "Gene Knockout Protocols, Second Edition", distinguished contributors with extensive experience in the gene targeting and mouse genetics fields reveal a comprehensive collection of step-by-step laboratory protocols. Emphasizing the many new mutagenesis techniques developed over the last seven years, the volume covers topics such as gene modification in ES cells, stem cell manipulation, the generation of genetically engineered mice, and mutant phenotype analysis. Written in the highly successful Methods in Molecular Biologya series format, chapters contain brief introductions to their respective subjects, lists of the necessary materials and reagents, readily reproducible protocols, and notes on troubleshooting and avoiding known pitfalls. Fully updated and authoritative, "Gene Knockout Protocols, Second Edition" provides a unique collection of expert bench protocols certain to be a valuable resource for those just entering the field of gene targeting but also for all genetic researchers today.

好的,这里为您准备了一份图书简介,内容聚焦于“基因编辑与细胞治疗的现代进展”,与您提到的《Gene Knockout Protocols》主题不重合。 --- 书名:《基因编辑与细胞治疗的现代进展:从基础理论到临床前沿》 内容简介 在生命科学的宏伟版图上,基因编辑技术无疑是近十年来最引人注目、最具革命性的突破之一。它不仅深刻地改变了我们理解生命运作机制的方式,更以前所未有的精度和效率,为人类对抗遗传性疾病、开发新型疗法提供了强有力的工具。本书《基因编辑与细胞治疗的现代进展:从基础理论到临床前沿》,旨在全面、深入地剖析当前基因编辑技术的最新发展及其在细胞治疗领域的应用现状、挑战与未来方向,为生命科学研究者、临床医生、生物技术专业人士及相关领域学生提供一份前沿而实用的参考指南。 第一部分:基因编辑技术的演进与核心原理 本书首先追溯了基因编辑技术的历史脉络,从早期的同源重组、锌指核酸酶(ZFNs)到转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs),系统地梳理了这些技术如何为更精准的基因编辑铺平道路。重点章节将深入探讨目前应用最为广泛的CRISPR-Cas系统。我们不仅会详细解析CRISPR-Cas9系统的结构、作用机制——包括 sgRNA的设计原则、Cas蛋白的切割活性与脱靶效应的控制,还会对CRISPR-Cas12(Cpf1)、Cas13等新型核酸酶家族进行细致的阐述,突出它们在处理不同类型核酸目标(DNA或RNA)时的独特优势。 此外,本书将专门开辟章节讨论“无双链断裂的精确编辑技术”,如碱基编辑器(Base Editors)和先导编辑器(Prime Editors)。这些技术极大地提高了基因修正的效率和安全性,避免了传统双链断裂(DSB)可能引发的不可预测的插入缺失(Indels)风险。我们将详尽剖析碱基编辑器的化学催化机制,以及Prime Editing如何通过逆转录酶介导的模板引入实现高保真度的序列替换、插入和删除,这是当前基因编辑领域最受关注的方向之一。 第二部分:基因编辑在细胞治疗中的整合应用 基因编辑的真正价值体现在其将基础生物学发现转化为临床治疗方案的能力。本书的第二部分聚焦于基因编辑技术与细胞治疗的深度融合。 我们详述了T细胞工程化在肿瘤免疫治疗中的核心地位。内容涵盖如何利用基因编辑技术优化CAR-T细胞的性能,例如敲除抑制性受体(如PD-1)以增强其持续杀伤能力,同时探讨如何通过精确编辑T细胞受体(TCR)基因库,构建更具特异性和安全性的异体(Allogeneic)T细胞产品,以应对自体T细胞来源有限的瓶颈。此外,本书还将深入探讨在干细胞(如诱导多能干细胞iPSCs和造血干细胞HSPCs)中进行基因修正的策略,这对于治疗镰状细胞病、地中海贫血等单基因遗传病具有里程碑意义。我们将详细分析将编辑的细胞重新回输至患者体内的过程控制与生物学监测标准。 第三部分:递送系统的优化与安全性评估 基因编辑工具的效力依赖于其能否高效、安全地抵达目标细胞。本书用大量篇幅讨论了基因递送系统的创新进展。这包括病毒载体(如腺相关病毒AAV和慢病毒Lentivirus)的改造,以实现更高的组织特异性和更低的免疫原性;同时,非病毒递送系统,如脂质纳米颗粒(LNP)技术,在递送CRISPR/Cas9 mRNA或RNP复合物方面的最新突破也将得到重点阐述。LNP递送因其体外应用和体内治疗的潜力,被视为未来主流递送方式之一。 安全性和脱靶效应的控制是基因编辑技术从实验室走向临床的“拦路虎”。本书详细介绍了提高编辑特异性的策略,包括对sgRNA进行修饰、利用新型Cas蛋白变体以及开发实时监测脱靶效应的生物信息学工具。此外,我们探讨了对基因编辑产物的质量控制标准、免疫反应的风险评估,以及如何通过体内基因组测序技术对编辑事件进行全面且高灵敏度的分析。 第四部分:伦理、法规与转化医学的挑战 技术的前进必须伴随着审慎的伦理考量与清晰的法规框架。本书的最终部分将目光投向基因编辑技术的社会影响与转化医学的前沿。我们讨论了体细胞编辑(Somatic Editing)与生殖细胞编辑(Germline Editing)之间的关键区别、引发的伦理争议,以及全球范围内主要的监管机构(如FDA、EMA)对临床试验审批的态度和指南。 最后,本书总结了当前基因编辑和细胞治疗领域面临的转化挑战,包括如何规模化生产高品质的细胞产品、如何降低治疗成本、以及如何应对复杂的临床试验设计。通过对多个处于临床试验阶段的治疗案例的深入剖析,本书旨在描绘一个负责任、可持续的基因编辑技术应用蓝图。 目标读者: 本书内容涵盖基础科学原理到前沿临床转化,适合分子生物学、遗传学、细胞生物学、生物工程学、免疫学等领域的研究人员、博士后、研究生,以及在生物制药和基因治疗行业工作的专业人士。它不仅是技术指南,更是对未来生命科学发展方向的深度展望。

作者简介

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读后感

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用户评价

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这本书《基因敲除方案》在我看来,更应该是一本能够指导我进行实际实验操作的“工具书”。我经常需要为我的研究项目设计和实施基因敲除实验,而我所寻求的是一本能够提供具体、可行、且经过验证的实验方案的著作。我希望这本书能够像一个详尽的实验手册,清晰地列出各种基因敲除技术的详细操作步骤,从试剂的准备、仪器的设置,到关键参数的控制和实验结果的判定。我尤其关注书中能否提供针对不同模型生物(如小鼠、斑马鱼、果蝇,甚至一些植物和微生物)的特异性敲除方案,以及如何根据实验目的选择最合适的敲除策略,例如完全敲除、条件性敲除、基因功能减弱或增强等。书中是否能包含一些常用的质粒载体、siRNA/shRNA设计指南,以及各种鉴定方法的优化建议?对于实验过程中常见的技术难题,比如阳性对照的设计、阴性对照的设置、以及如何准确地评估敲除效率和脱靶情况,我希望这本书能提供切实可行的解决方案。最终,我期望这本书能够让我更有信心地开展每一个基因敲除实验,提高实验的成功率,并为我的研究提供可靠的数据支持。

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这本书的名字叫《基因敲除方案》,光听名字就让人感觉一本非常学术、非常严谨的著作。我一直对分子生物学和遗传工程领域有着浓厚的兴趣,特别是基因敲除技术,它在疾病研究、生物育种等方面扮演着至关重要的角色。一直以来,我都在寻找一本能够系统、深入地介绍这项技术,并且能提供详细操作指南的图书。想象一下,如果这本书能够像一个经验丰富的导师一样,手把手地教你如何设计实验、如何选择合适的敲除策略、如何进行细胞培养和基因编辑,以及如何验证敲除的成功与否,那该是多么令人振奋的事情!我特别希望这本书能够涵盖目前最前沿的基因编辑技术,比如 CRISPR-Cas9 的各种变体和应用,以及一些经典的、经过验证的敲除方法,并详细分析它们各自的优缺点和适用范围。另外,对于实验过程中可能遇到的各种挑战和疑难杂症,这本书能否提供详尽的解决方案和故障排除指南?如果书中还能包含一些实际案例分析,比如通过基因敲除来模拟某种人类疾病,或者开发出具有特定功能的转基因生物,那将极大地提升这本书的实用性和启发性。总之,我期待这本《基因敲除方案》能成为我科研道路上的得力助手,帮助我更好地理解和掌握基因敲除这一强大的技术。

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作为一名业余的生物学爱好者,我对《基因敲除方案》这本书的期待更多地源于对生命科学的强烈好奇心。我经常在科普读物中接触到基因编辑的词汇,并被它能够改变生命蓝图的神奇力量所吸引。然而,对于普通大众来说,这些技术往往显得遥不可及。我希望这本书能以一种相对易懂的方式,向我们揭示基因敲除的奥秘,让我们了解这项技术是如何工作的,以及它在科学研究和实际应用中扮演的角色。我希望书中能够用生动的语言和贴切的比喻,解释基因敲除的基本概念,比如基因是什么,DNA是如何工作的,以及科学家是如何“剪切”和“替换”基因的。我特别希望书中能介绍一些引人入胜的基因敲除应用案例,比如如何利用基因敲除来培育更健康的作物,如何研究人类疾病的发病机制,甚至是如何在理论上实现某些生物的“升级”。如果书中还能包含一些关于基因敲除的伦理和社会影响的讨论,那将更能满足我对这项技术全方位的了解。我希望这本书能成为一座连接科学殿堂和普通读者之间的桥梁,让我们在享受知识的同时,也能对科学的发展保持一份敬畏和思考。

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我是一名资深的分子生物学研究者,多年来一直在与各种复杂的实验技术打交道,而基因敲除一直是我研究中不可或缺的一环。《基因敲除方案》这本书,我更看重它在理论深度和技术广度上的体现。我希望这本书不仅仅停留在操作层面,而是能够深入探讨各种基因敲除策略背后的分子机制,例如不同重组酶的工作原理,CRISPR-Cas9系统如何实现精确的基因编辑,以及各种脱靶效应的产生机制和规避方法。对于那些正在进行复杂基因组编辑的研究人员来说,对多种敲除技术及其优劣势的深入比较和分析至关重要。我希望能在这本书中看到关于不同敲除系统在不同物种、不同细胞类型中的适用性和效率的详细数据和论述。此外,对于一些疑难杂症,比如如何高效地敲除多拷贝基因,如何进行条件性基因敲除,以及如何将基因敲除与其他的分子生物学技术(如基因表达分析、蛋白质互作研究等)相结合,我非常期待书中能提供富有洞察力的见解和创新的解决方案。这本书能否引领我突破现有技术的瓶颈,探索更前沿的研究方向,是我最为关注的。

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作为一名初次接触基因敲除领域的学生,我对《基因敲除方案》这本书抱有极大的期待。我听说基因敲除是研究基因功能、理解生命奥秘的基石,但其操作过程复杂且对技术要求极高。我希望这本书能从最基础的概念讲起,用通俗易懂的语言解释什么是基因敲除,它的原理是什么,以及为什么需要进行基因敲除。我特别渴望看到书中能详细介绍各种常用的基因敲除技术,比如同源重组、RNA干扰、以及目前非常热门的CRISPR-Cas9系统。我希望作者能清晰地阐述每种技术的具体步骤,包括如何设计sgRNA、如何选择载体、如何进行细胞转染、以及如何筛选和鉴定敲除的细胞株。当然,实验过程中难免会遇到各种问题,比如效率不高、脱靶效应等等,我希望书中能提供一些实用的技巧和应对策略,帮助我少走弯路。此外,如果书中能包含一些图示和流程图,能够直观地展示实验过程,那对我这样需要视觉化学习的学生来说,将是莫大的帮助。总而言之,我希望《基因敲除方案》能成为一本真正“手把手”的入门教材,让我能够信心满满地迈出基因敲除研究的第一步。

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