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出版者:Humana Press

作者:Scofield, R. Hal 編

出品人:

頁數:588

译者:

出版時間:2009-05-15

價格:USD 129.00

裝幀:Hardcover

isbn號碼:9781934115732

叢書系列:

圖書標籤:

蛋白質印跡
蛋白質檢測
Western Blot
免疫印跡
蛋白質分析
生物化學
分子生物學
實驗技術
蛋白質錶達
抗體

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具體描述

Over the past thirty years, the development of the Western blot has revolutionized the fields of biomedical research and medical diagnostics. In "Protein Blotting and Detection: Methods and Protocols," expert researchers present numerous techniques based on the Western blot, providing detailed, readily reproducible methods, tips, and alternatives directly and easily transferable to the laboratory setting. Chapters offer a large number of variations on the theme of protein transfer to solid support followed by detection, presenting both adaptations of traditional techniques as well as completely original methods of protein blotting. Composed in the highly successful Methods in Molecular Biologya" series format, each chapter contains a brief introduction, a list of necessary materials, step-by-step methods, and a Notes section which shares tips on troubleshooting and avoiding known pitfalls. Innovative and highly practical, Protein Blotting and Detection: Methods and Protocols is an essential, hands-on guide for all investigators who hope to bring these cutting-edge procedures home to their laboratories.

蛋白質印跡與檢測：解析生命奧秘的微觀透鏡本書並非關於蛋白質印跡與檢測的指南。相反，它將帶領您深入探索生物學研究中另一類同樣至關重要但截然不同的技術領域。我們將聚焦於那些能夠直接洞察細胞結構、分子相互作用以及遺傳物質變化的關鍵方法，為您揭示生命活動的深層機製。細胞成像的藝術與科學：看見生命的脈絡首先，我們將深入細胞成像的奇妙世界。這包括但不限於熒光顯微鏡技術，您將瞭解其基本原理，如激發和發射光譜、熒光團的選擇以及不同成像模式（如共聚焦、超分辨顯微鏡）的應用。我們會探討如何利用熒光標記特異性地可視化細胞器、蛋白質定位、細胞骨架動力學以及細胞間的通訊。您將學習到不同熒光染料和熒光蛋白的特性，以及如何設計巧妙的實驗方案來解決復雜的生物學問題。此外，我們還將詳細介紹透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）。TEM能夠提供納米尺度的細胞超微結構信息，例如細胞器內部的詳細構造、病毒顆粒的形態以及蛋白質復閤物的三維結構。SEM則側重於樣品的錶麵形貌，揭示細胞外圍結構、細胞錶麵標記物以及組織的三維形態。您將瞭解樣本製備的關鍵步驟，如固定、包埋、超薄切片和染色，以及如何解讀這些高分辨率圖像。分子相互作用的探測器：理解生命網絡的聯結理解分子間的相互作用是揭示生命過程的關鍵。本書將重點介紹免疫組化（IHC）和免疫熒光（IF）技術。雖然這些技術也涉及到抗體，但它們的應用對象是組織和細胞切片，而非蛋白質印跡上的分離蛋白。您將學習如何使用特異性抗體來定位特定蛋白質在組織或細胞內的錶達，從而研究疾病發生發展中的蛋白功能變化。我們會深入探討抗體的選擇、封閉步驟、顯色/熒光信號的産生以及定量分析方法。我們還將探討生物傳感器和生物芯片的應用。這些技術通過將生物分子固定在傳感器錶麵，能夠實時、高通量地檢測特定的生物分子或其相互作用。例如，錶麵等離子體共振（SPR）技術可以無標記地測量蛋白質-蛋白質、蛋白質-核酸、抗原-抗體等相互作用的動力學和親和力。您將瞭解這些技術的原理、設計以及在藥物發現、疾病診斷和基礎生物學研究中的廣泛應用。遺傳物質的洞察：解碼生命的藍圖最後，我們將目光投嚮遺傳物質。聚閤酶鏈式反應（PCR）及其各種變體（如RT-PCR、qPCR）是擴增和檢測DNA或RNA的關鍵技術。您將學習PCR的原理，包括DNA聚閤酶、引物設計、退火溫度優化以及如何通過實時定量PCR來精確測量目標核酸的豐度。這將幫助您理解基因錶達調控、基因突變檢測以及病原體診斷。此外，我們還將探討DNA測序技術的演進，從Sanger測序到新一代測序（NGS）技術。NGS極大地加速瞭基因組學、轉錄組學和外顯子組學研究，使得大規模基因組測序、全轉錄組分析以及基因調控網絡的研究成為可能。您將瞭解不同測序平颱的原理、數據分析流程以及這些技術在人類疾病研究、進化生物學和微生物學中的革命性影響。超越蛋白質印跡：更廣闊的生物技術視野本書旨在提供一個與蛋白質印跡不同的視角，深入介紹生物學研究中其他至關重要的技術。通過理解這些技術，您將能夠更全麵地把握生命活動的復雜性，並為您的研究提供更多創新的思路和工具。從細胞的微觀結構到遺傳信息的解碼，本書將為您打開一扇通往生命科學前沿的大門。