microRNA的研究方法与应用 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

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出版者:中国协和医科大学出版社

作者:

出品人:

页数:246 页

译者:

出版时间:2008年

价格:52.0

装帧:精装

isbn号码:9787878107291

丛书系列:

图书标签:

• 科学
• 学术
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• 生物技术
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• 非编码RNA
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现代生物技术前沿：基因编辑与蛋白质组学深度解析 作者： 张伟 出版社： 科学出版社 出版日期： 2023年10月 --- 图书简介 本书深入探讨了当前生物医学研究领域最为热门和前沿的两大核心技术分支：CRISPR/Cas系统介导的基因编辑技术及其高通量蛋白质组学分析策略。全书结构严谨，内容兼顾理论深度与实验操作的实用性，旨在为生命科学、生物医学工程、药物研发以及临床诊断领域的科研人员、研究生及技术人员提供一套系统、全面的技术指南和知识储备。 第一部分：基因编辑的精准革命——CRISPR/Cas系统 基因编辑技术代表了生命科学领域的一场深刻革命，尤其以CRISPR/Cas系统为代表的技术，极大地提升了我们在分子水平上精确修改生物体遗传信息的效率与精度。本书第一部分将这一前沿技术群落进行系统性的梳理和剖析。 第一章：CRISPR/Cas系统的起源与分子基础 本章追溯了CRISPR/Cas系统的自然免疫机制起源，从细菌和古细菌的适应性免疫机制出发，详细阐述了I型、II型、III型等主要系统的结构差异及其工作原理。重点解析了目前应用最为广泛的II型系统（以Cas9酶为核心）的生化特性，包括sgRNA的结构要求、PAM位点的识别机制，以及DNA双链断裂（DSB）的形成过程。 第二章：主流CRISPR/Cas工具箱的构建与优化 本章聚焦于基因编辑技术的“工具箱”的拓展。我们不仅详细介绍了经典Cas9系统的应用，还深入探讨了其升级版本，如高保真Cas9（HiFi Cas9）和嵌合体Cas9（eCas9）在降低脱靶效应方面的进展。随后，对Cas12a（Cpf1）系统进行了详尽的介绍，对比了其与Cas9在切割特性、PAM序列偏好以及是否需要TracrRNA方面的异同，为研究人员选择最适合的内切酶提供了决策依据。 第三章：超越双链断裂的精确编辑：碱基编辑器与先导编辑器 基因组编辑不再局限于引入DSB。本章是本书的技术亮点之一，详细介绍了碱基编辑器（Base Editors, BEs），包括胞嘧啶碱基编辑器（CBEs）和腺嘌呤碱基编辑器（ABEs）的工作原理。我们通过大量图示解释了脱氨酶与失活的Cas9融合后如何实现单碱基的精确转换而不产生DSB。紧接着，对先导编辑器（Prime Editors, PEs）进行了深入分析，阐释了其利用逆转录酶和pegRNA模板实现插入、缺失或所有类型的点突变的能力，极大地拓宽了可编辑的范围。 第四章：体内与体外基因编辑的策略与挑战 本部分侧重于实验设计和技术实施。内容涵盖了将基因编辑系统递送到目标细胞或生物体内的多种策略： 1. 病毒载体系统： 重点分析腺相关病毒（AAV）在体内递送的优势与限制，以及慢病毒（LV）在稳定整合方面的应用。 2. 非病毒递送系统： 详细介绍了脂质纳米颗粒（LNP）封装技术在递送sgRNA和Cas9 mRNA方面的最新进展，特别是其在肝脏靶向方面的潜力。 3. 细胞编辑流程： 探讨了在体外细胞系中实现高效转染、克隆筛选以及功能验证的标准化SOP（标准操作规程）。 4. 脱靶效应的评估与控制： 提供了使用GUIDE-seq、CIRCLE-seq等高灵敏度方法量化脱靶编辑的实验步骤，并讨论了通过优化sgRNA设计、改进Cas蛋白工程化来降低非特异性切割的策略。 --- 第二部分：蛋白质组学的深度解码——从定量到功能分析 蛋白质是生命活动的主要执行者，对蛋白质组的全面、高通量分析是理解细胞状态、疾病机制和药物作用靶点的关键。本书第二部分系统地介绍了当前蛋白质组学研究的核心技术和数据解析流程。 第五章：现代蛋白质组学技术体系概览 本章首先界定了蛋白质组学的研究范畴，从初始的蛋白质分离技术（如二维电泳）过渡到当前的主流技术。重点阐述了质谱技术（Mass Spectrometry, MS）在蛋白质组学中的核心地位，包括ESI、MALDI电离源的原理，以及高分辨率串联质谱（MS/MS）如何实现肽段的精确测序。 第六章：高通量蛋白质组的定量策略 精准的定量是蛋白质组学研究价值的体现。本章详细对比和分析了当前最主要的几种定量方法： 1. 标签分离技术（SILAC）： 介绍稳定同位素标记的原理及其在细胞培养中的应用。 2. 化学标签技术（iTRAQ/TMT）： 重点解析Tandem Mass Tag（TMT）技术的多路复用能力，以及其在比较复杂生物样本（如组织样本、临床血清）中相对定量分析中的优势。 3. 非标记定量方法（Label-free Quantitation, LFQ）： 阐述基于峰面积或离子丰度的定量流程，以及当前软件算法（如MaxQuant）如何处理LFQ数据以保证结果的可靠性。 第七章：蛋白质组学的功能拓展：修饰与相互作用 蛋白质的功能远不止于其序列本身。本章探讨了对蛋白质进行“修饰”和“关联”分析的前沿技术： 1. 蛋白质翻译后修饰（PTM）分析： 聚焦于磷酸化、泛素化和糖基化修饰的富集策略（如使用特定的抗体或金属亲和层析）和质谱识别方法。磷酸化蛋白质组学在信号转导研究中的关键地位将被重点强调。 2. 蛋白质-蛋白质相互作用组（PPI）研究： 介绍了“酵母双杂交（Y2H）”的原理及其局限性。更侧重于蛋白质谱（Affinity Purification followed by Mass Spectrometry, AP-MS）技术，包括如何设计有效的“捕获探针”以及如何通过对照实验（如背景蛋白、同源蛋白）筛选出真实的相互作用伙伴。 第八章：生物信息学与数据整合分析 蛋白质组学实验产生的数据量庞大且复杂，有效的生物信息学处理是成功的关键。本章提供了从原始质谱数据到功能性结论的完整通路： 1. 数据库搜索与鉴定： 介绍主流数据库（如UniProt）和搜索引擎（如Mascot, Proteome Discoverer）如何匹配谱图数据，以及如何使用FDR（错误发现率）控制统计学显著性。 2. 通路富集与网络构建： 讲解如何利用GO（Gene Ontology）分析、KEGG通路富集工具来解释差异表达蛋白质的生物学意义。此外，将介绍如何基于PPI数据构建蛋白质相互作用网络图，并使用中心性指标识别关键的“枢纽蛋白”。 --- 总结与展望 本书的撰写目标是提供一本兼具广度与深度的参考书，它不局限于单一技术，而是将基因编辑（改变“设计图”）与蛋白质组学（监测“最终执行者”）两大核心工具整合起来，为读者提供一个全面的分子生物学研究框架。通过掌握这些先进技术，研究者将能更有效地解析复杂疾病的分子机制，并加速开发更精准的基因治疗方案和新型生物标志物。本书的详细操作指南和案例分析，确保读者能够迅速将理论知识转化为实际的实验能力。

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这本书在逻辑编排上，展现出一种非常强烈的“递进式”的结构感。它似乎遵循了从宏观到微观，再到应用层面的清晰脉络。我猜想，前期的章节可能着重于建立理论基础和历史背景，为后续更深入的探讨做好铺垫。随后，会进入到对核心机制的深度剖析，这部分内容估计是最考验读者的理论功底的。最值得称道的是，它似乎并没有停留在纯理论的层面，而是非常重视如何将这些理论转化为实际的科研工具或产业应用。这种“知其然，更知其所以然，并能知其如何用”的编写思路，让这本书的实用价值大大提升。它似乎有意地在引导读者思考，不仅仅是“是什么”，更是“能做什么”以及“为什么这样做最有效”。

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这本书的装帧和纸张选择透露出一种对品质的坚持，手感温润，油墨印制清晰锐利，即便是长时间阅读，眼睛的疲劳感也会相对减轻不少，这对于需要长时间伏案工作的研究人员来说，是一个非常贴心的细节。从内容结构来看，它似乎非常注重对前沿进展的追踪和收录，可能包含了一些最新的实验技术或理论模型的探讨。更妙的是，它在处理复杂问题时，似乎倾向于提供多种不同的视角和解决方案，而不是固步自封地推荐单一路径。这种开放性的讨论风格，有助于激发读者的批判性思维，而不是被动接受既定结论。总体而言，这本书散发出一种“权威性”的气息，似乎是行业内经过多年沉淀后，才得以面世的力作，目标读者群的专业水平要求应该不低。

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这本书的装帧和排版真是让人眼前一亮，拿到手里就感觉分量十足，很适合做案头参考。从整体来看，它似乎在试图构建一个宏大的框架，把某个领域内的知识点串联起来，虽然我没有深入阅读具体章节，但从目录和章节标题的布局来看，它似乎对基础理论的讲解颇为详尽，想必能为初学者打下一个坚实的基础。文字的风格应该是那种偏向严谨和学术的，不是那种轻松的科普读物，更像是为专业人士准备的工具书。封面设计上，色彩搭配得比较沉稳，字体选择也很有专业感，让人觉得内容一定是经过了精心打磨和校验的。我尤其留意了一下它在某些关键概念上的处理方式，似乎有一种试图统一不同学派观点的努力，这一点在专业书籍中非常可贵，因为它避免了让读者在学习过程中产生太多困惑。整体而言，这本书给我的第一印象是：内容扎实，结构清晰，是一本可以信赖的参考资料。

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这本书的语言风格，如果仅从几个随机翻阅的段落来判断，似乎带着一种非常鲜明的叙事节奏感，不像传统教材那样平铺直叙，而是更倾向于用一种更具引导性的方式来阐述复杂的概念。它似乎在探讨如何系统性地解决某个特定领域内的一系列难题，并且在论述过程中，可能融入了大量的案例分析和实验设计思路。我注意到其中有一部分内容，似乎在详细描述一种全新的技术路径或流程优化，描述得非常细致，让人感觉作者在这一块确实是下了苦功的，不是泛泛而谈。这种注重实践操作和步骤分解的写法，对于那些动手能力要求较高的读者来说，无疑是非常友好的。它不像是在“教知识”，更像是在“传授经验”，这种潜移默化的引导，往往比死记硬背公式要有效得多。从侧面反映出，这本书的作者群很可能是一批经验丰富的一线研究人员。

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初看这本书的厚度，我差点被它的信息密度吓到。它给人的感觉是，恨不得把所有相关的知识点都塞进来，信息量大到令人惊叹。这种详尽程度，意味着读者需要投入大量的时间去消化吸收，它绝不是那种可以快速翻阅一两天的读物。如果说有什么特点，那就是它似乎极力想做到“包罗万象”，在对某个核心主题进行深入挖掘的同时，还不忘将周边关联的、看似不那么直接的知识点也一并纳入视野。这对于建立起一个全面的知识网络非常有帮助，但也意味着，对于只想了解皮毛的读者来说，可能会觉得有些冗余和吃力。它可能在某些章节中采用了大量的图表和数据可视化来支撑论点，毕竟要承载如此多的信息，纯文字描述是远远不够的，那种视觉上的冲击力，应该能有效帮助理解那些抽象的模型。

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