Molecular Biology, Volume 10B (Methods in Plant Biochemistry) pdf epub mobi txt 電子書 下載 在線閱讀 2026

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出版者:Academic Press

作者:Bryant, J. 編

出品人:

頁數:126

译者:

出版時間:1996-10-16

價格:USD 95.95

裝幀:Hardcover

isbn號碼:9780124610217

叢書系列:Methods in Molecular Biology

圖書標籤:

• Molecular Biology
• Plant Biochemistry
• Methods
• Biochemistry
• Plant Molecular Biology
• Molecular Biology Techniques
• Biotechnology
• Plant Physiology
• Genetics
• Research Methods

植物生物化學方法，第十捲 B：分子生物學 導言 《植物生物化學方法》係列旨在為研究植物生物化學的科學傢們提供全麵、實用的技術指南。該係列每一捲都聚焦於植物生物化學研究中的一個特定領域，深入介紹最新的實驗技術、分析方法以及數據解讀策略。本文介紹的《植物生物化學方法，第十捲 B：分子生物學》正是該係列中承上啓下的關鍵捲冊，它將分子生物學的前沿進展與植物科學的獨特需求相結閤，為讀者提供瞭探索植物基因組、轉錄組、蛋白質組以及代謝組的強大工具箱。 本捲捲宗的編纂，匯集瞭全球範圍內在該領域具有深厚造詣的科研人員的智慧和實踐經驗。其內容覆蓋瞭從基因剋隆、錶達調控到蛋白質功能分析、信號轉導機製解析等一係列核心分子生物學技術在植物科學中的應用。本書不僅強調理論知識的闡述，更注重實驗操作的細節指導，力求讓不同經驗水平的研究者都能從中受益。 核心內容概述 《植物生物化學方法，第十捲 B：分子生物學》的編寫遵循嚴謹的科學邏輯，並兼顧瞭內容的時效性和前瞻性。其主要章節圍繞以下幾個核心主題展開： 第一部分：基因組學與轉錄組學研究 基因組DNA的提取與純化： 本章詳細介紹瞭從不同植物組織（如葉片、根、種子、愈傷組織等）中高效提取高質量基因組DNA的方法，包括各種試劑盒和經典方法的優缺點、操作注意事項以及結果的初步質量評估。重點關注瞭如何剋服植物細胞壁的堅韌性和次生代謝産物的乾擾。 RNA的提取與純化： 深入探討瞭從植物細胞和組織中提取全RNA、mRNA的方法。涵蓋瞭不同RNA提取試劑（如Trizol、CTAB法等）的選擇與優化，以及如何去除基因組DNA汙染、抑製RNA酶活性等關鍵步驟。特彆強調瞭對 RNA 降解敏感的植物材料的處理技巧。 基因剋隆與構建： 介紹瞭各種基因剋隆技術，包括限製性內切酶消化、連接反應、PCR剋隆等。重點闡述瞭載體（如質粒、噬菌體、酵母人工染色體等）的選擇原則，以及如何構建用於基因錶達、基因沉默、基因標記等目的的重組質粒。 基因錶達水平的定量分析： 實時熒光定量PCR (RT-qPCR)： 詳細闡述瞭 RT-qPCR 的實驗設計、引物設計、RNA質量控製、cDNA閤成、擴增條件優化、內參基因選擇與驗證等關鍵環節。提供瞭對實驗數據進行相對定量和絕對定量的詳細步驟和注意事項，以及常見問題的排查。 RNA測序 (RNA-Seq)： 深入介紹瞭 RNA-Seq 的實驗流程，包括文庫構建、高通量測序、數據預處理、比對、基因錶達量計算、差異錶達基因分析、功能富集分析等。討論瞭不同測序平颱和生物信息學分析策略的選擇，以及數據質量控製和結果解讀。 基因組DNA甲基化分析： 介紹瞭亞硫酸氫鹽測序 (Bisulfite Sequencing) 等技術，用於檢測植物基因組DNA的甲基化狀態，以及其對基因錶達的調控作用。 第二部分：蛋白質組學與蛋白質功能研究 植物蛋白質的提取與分離： 詳細介紹瞭從植物組織中提取細胞總蛋白、亞細胞組分蛋白以及特定蛋白質的方法。涵蓋瞭利用不同緩衝液、裂解劑、去汙劑以及離心、沉澱等技術實現有效分離。討論瞭去除酚類物質、糖類等乾擾物的策略。 二維凝膠電泳 (2-DE) 與差異蛋白質組學： 深入講解瞭 2-DE 的原理、操作步驟、樣品製備、膠體染色、圖像分析以及如何與質譜聯用進行蛋白質鑒定。重點闡述瞭如何通過 2-DE 結閤代謝組學或轉錄組學數據，挖掘差異錶達的蛋白質，揭示植物響應環境變化或發育過程中的分子機製。 質譜 (MS) 技術在蛋白質鑒定中的應用： 詳細介紹瞭液相色譜-串聯質譜 (LC-MS/MS) 等技術在植物蛋白質鑒定和定量中的應用。包括樣品準備、質譜數據采集、數據庫搜索、蛋白質定量方法（如SILAC, TMT等）以及結果的驗證。 蛋白質互作網絡的構建： 介紹瞭酵母雙雜交 (Y2H)、體外共免疫沉澱 (Co-IP)、雙嚮電泳-質譜聯用 (2D-PAGE/MS) 等技術，用於研究植物蛋白質之間的相互作用。重點關注瞭如何設計實驗、優化條件以及驗證互作的特異性和可靠性。 蛋白質功能研究技術： 涵蓋瞭利用體外酶活性測定、免疫印跡 (Western Blotting)、免疫組織化學 (Immunohistochemistry) 等技術，研究蛋白質在細胞內的定位、活性以及其在特定生理過程中的作用。 第三部分：植物基因功能分析與調控機製 基因沉默技術（RNAi）： 詳細介紹瞭利用 RNAi 技術（包括 shRNA, miRNA 等）在植物中實現基因沉默的策略。涵蓋瞭載體構建、轉化方法、基因沉默效果的評估以及實驗設計的注意事項。 基因過錶達與功能增強： 介紹瞭如何構建過錶達載體，將目標基因導入植物，從而研究其過錶達後的錶型變化。重點討論瞭啓動子的選擇、轉化體係的優化以及過錶達水平的檢測。 基因編輯技術（CRISPR/Cas9）： 詳細闡述瞭 CRISPR/Cas9 技術在植物基因組編輯中的應用，包括靶嚮設計、sgRNA 的閤成、轉化方法以及基因編輯效率的評估。重點討論瞭如何利用該技術進行基因敲除、基因敲入和位點突變，以解析基因功能。 啓動子分析與轉錄因子研究： 介紹瞭啓動子-報告基因融閤實驗，用於鑒定和分析植物基因的啓動子元件及其調控元件。闡述瞭如何利用 ChIP-PCR (Chromatin Immunoprecipitation Polymerase Chain Reaction) 等技術研究轉錄因子與 DNA 的結閤。 信號轉導通路研究： 介紹瞭植物激素信號轉導、光信號轉導、脅迫信號轉導等關鍵通路的研究方法。涵蓋瞭利用分子標記、基因錶達分析、蛋白質互作等技術，解析信號分子在通路中的作用。 第四部分：植物分子生物學常用實驗技術 植物細胞轉化技術： 詳細介紹瞭農杆菌介導的轉化、基因槍轉化、原生質體轉化等多種植物細胞轉化方法。重點關注瞭不同植物材料和基因載體的選擇，以及優化轉化效率的關鍵步驟。 顯微注射與基因導入： 介紹瞭在單細胞層麵進行基因導入和驗證的方法，適用於一些難以通過傳統方法轉化的植物材料。 原位雜交技術： 深入講解瞭 RNA 原位雜交和 DNA 原位雜交技術，用於研究基因在植物組織和細胞中的錶達模式和定位。 熒光顯微鏡技術在植物分子生物學中的應用： 介紹瞭共聚焦顯微鏡、熒光標記技術（如 GFP, RFP 等）在觀察細胞器動態、蛋白質定位、信號分子轉運等方麵的應用。 數據分析與可視化： 提供瞭關於如何對分子生物學實驗數據進行統計分析、圖錶繪製以及結果展示的指導。涵蓋瞭常用的統計軟件和可視化工具。 特色與價值 《植物生物化學方法，第十捲 B：分子生物學》的最大特色在於其高度的實踐性。本書中的每一個實驗方法都經過瞭反復驗證，並提供瞭詳細的操作步驟、注意事項以及可能遇到的問題及解決方案。此外，本書還特彆強調瞭跨學科的研究視角，鼓勵讀者將分子生物學技術與植物生理學、遺傳學、生物化學等多學科知識相結閤，以更全麵地理解植物生命活動的復雜性。 本書的另一個重要價值在於其前瞻性。隨著基因組學、高通量測序、基因編輯等技術的飛速發展，植物分子生物學研究正迎來新的革命。《植物生物化學方法，第十捲 B：分子生物學》及時地將這些最新的技術和理念納入其中，為讀者提供瞭掌握未來研究方嚮的有力工具。 適用讀者 本書適閤於所有從事植物科學研究的科研人員、研究生以及對植物分子生物學感興趣的本科生。包括但不限於： 植物遺傳育種研究者 植物生理生態學研究者 植物病理學研究者 農學、林學、園藝學等相關專業的學生和教師 緻力於基因工程、生物技術領域的科研人員 結語 《植物生物化學方法，第十捲 B：分子生物學》不僅僅是一本實驗手冊，更是植物分子生物學領域的一座知識寶庫。它為讀者提供瞭探索植物生命奧秘所需的關鍵技術和深入見解，必將有力地推動植物科學研究的不斷進步，為解決全球糧食安全、環境保護以及生物能源等重大挑戰貢獻智慧和力量。通過掌握書中介紹的各項技術，研究者們將能夠更深入地解析植物的遺傳基礎、調控機製以及對環境的響應，從而在分子層麵實現對植物的精準改造和高效利用。

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