Bioconjugate Techniques, Second Edition

Bioconjugate Techniques, Second Edition pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:Academic Press
作者:Greg T. Hermanson
出品人:
页数:1323
译者:
出版时间:2008-05-02
价格:USD 99.95
装帧:Paperback
isbn号码:9780123705013
丛书系列:
图书标签:
  • 分子生物
  • 生物,技术,crosslinking
  • 化学
  • 体外诊断
  • Bioconjugation
  • Biochemistry
  • Chemistry
  • Biotechnology
  • Nanotechnology
  • Drug Delivery
  • Protein Chemistry
  • Antibody Engineering
  • Bioimaging
  • Biomaterials
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具体描述

Bioconjugate Techniques, 2e provides highly detailed information on the chemistry, reagent systems, and practical applications for creating labeled or conjugate molecules. It also describes dozens of reactions with details on hundreds of commercially available reagents and the use of these reagents for modifying or crosslinking peptides and proteins, sugars and polysaccharides, nucleic acids and oligonucleotides, lipids, and synthetic polymers.

*A one-stop source for proven methods and protocols for synthesizing bioconjugates in the lab, allowing for fast retrieval of tried and tested techniques for synthesizing bioconjugates.

*Step-by-step presentation makes the book an ideal source for researchers who are less familiar with the synthesis of bioconjugates.

*Includes more than 600 figures that visually describe the complex reactions associated with the synthesis of bioconjugates, giving researchers a better understanding of how the commercially available reagents facilitate the crosslinking of peptides and proteins, sugars and polysaccharides, nucleic acids and oligonucleotides, lipids, and synthetic polymers.

*Includes entirely new chapters on the latest areas in the field of bioconjugation as follows:

Microparticles and nanoparticles

Silane coupling agents

Dendrimers and dendrons

Chemoselective ligation

Quantum dots

Lanthanide chelates

Cyanine dyes

Discrete PEG compounds

Buckyballs, fullerenes, and carbon nanotubes

Mass tags and isotope tags

Bioconjugation in the study of protein interactions

书名:蛋白质组学与细胞信号传导的前沿技术 作者:[此处填写作者姓名,例如:张伟, 李明] 出版社:[此处填写出版社名称,例如:科学出版社] 出版日期:[此处填写出版日期,例如:2023年10月] --- 内容简介: 本书全面深入地探讨了当前蛋白质组学研究与细胞信号传导领域最尖端、最实用的技术体系。在生物科学飞速发展的今天,理解蛋白质的功能、相互作用及其在生命活动中的调控机制,已成为解析生命奥秘的核心。本书旨在为生命科学领域的研究人员、高级学生以及生物技术行业的专业人士提供一份详尽的技术指南,重点聚焦于那些不涉及生物偶联(Bioconjugation)化学的、专注于分子识别、定量分析、空间定位和动态过程监测的现代方法。 第一部分:高分辨率蛋白质组学分析 本部分重点介绍从复杂生物体系中分离、鉴定和定量蛋白质的先进策略,强调纯化和分析的效率与精度。 第一章:复杂样本的深度分离技术 本章详述了二维电泳(2D-PAGE)的优化策略,包括不同pH梯度胶的选择、载胶的改进以及针对膜蛋白的优化上样方法。随后,重点介绍了多维液相色谱(LC)在高通量蛋白质组学中的应用,特别是选择性保留时间的优化,包括反相色谱(RP-LC)、离子交换色谱(IEX)以及疏水作用色谱(HIC)在不同蛋白质组学子集分离中的应用组合。我们详细阐述了“多维分离框架”的构建,以应对数以万计的蛋白质组。 第二章:质谱成像与定性鉴定 本章深入探讨了质谱(MS)在蛋白质结构和翻译后修饰(PTMs)分析中的最新进展。内容涵盖了高分辨质谱仪(如Orbitrap和TOF)在肽段质量精确测定中的性能评估。在定性分析方面,着重介绍了碎片化技术(如HCD, ETD, CID)对复杂序列信息和PTM位点确定的贡献。特别地,本章详细描述了基质辅助激光解吸/电离成像质谱(MALDI-IMS)和电喷雾电离成像质谱(DESI-MSI)在组织切片上实现空间蛋白质分布图谱绘制的原理、实验流程及数据去卷积方法,区别于任何将目标分子直接化学标记后进行成像的技术。 第三章:定量蛋白质组学的绝对与相对策略 定量分析是蛋白质组学的核心。本章详细区分和比较了基于同位素标记和非标记的定量方法。在同位素标记方面,详细阐述了SILAC(稳定同位素标记的氨基酸培养)、TMT(等量的多重标记)和iTRAQ技术在内标设计、标记效率控制以及后续质谱数据采集(如数据依赖采集DDA和数据非依赖采集DIA)中的应用细节。对于非标记定量,本章侧重于基于峰面积积分(Label-Free Quantification, LFQ)的方法学,包括MaxQuant和Proteome Discoverer等软件的数据处理流程,以及如何通过深度学习算法提高定量准确性,从而实现对蛋白质丰度变化的精确监测。 第二部分:细胞信号传导机制研究 本部分聚焦于如何利用先进的技术手段实时、高灵敏度地监测细胞内部的信号分子动态变化及其下游效应。 第四章:激酶活性与信号转导通路分析 信号通路的核心是磷酸化事件。本章详细介绍不依赖于偶联化学的磷酸化蛋白质组学分析。我们阐述了如何使用选择性磷酸肽富集技术,如金属离子的选择性亲和层析(如TiO2或Fe3+固相萃取)来捕获磷酸化肽段,并区分关键的丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸磷酸化位点。此外,本章还涵盖了激酶活性测定中使用的荧光肽段底物分析法(FRET-based assays),该方法通过监测底物被特定激酶切割后荧光信号的变化来评估激酶的实时活性,完全独立于任何共价连接技术。 第五章:蛋白质相互作用组(PPI)的发现与验证 理解蛋白质如何协同工作需要精确测定其物理相互作用。本章重点介绍基于生物化学和遗传学的方法来绘制PPI网络。详细讲解了酵母双杂交(Y2H)筛选的原理、限制及优化。对于体内相互作用的捕获,本章详述了Co-IP(共免疫沉淀)技术,包括针对弱相互作用和瞬时相互作用的优化洗脱条件(如使用温和的去离子化缓冲液)。此外,还包括基于结构域的蛋白质-蛋白质相互作用研究,如使用重组蛋白质进行体外亲和力测定(如SPR和BLI技术),这些方法评估的是分子间的非共价结合力。 第六章:活细胞内分子定位与动态追踪 细胞内信号传导是高度依赖于空间和时间的。本章深入探讨了不使用共价探针的分子定位技术。重点介绍了荧光蛋白(如GFP及其变体)在融合表达后,通过共聚焦显微镜和延时成像(Time-Lapse Imaging)技术,实现对内源性蛋白质在不同细胞周期或刺激条件下亚细胞器定位变化的监测。内容包括漂白恢复(FRAP)和光激活定位显微镜(PALM)的原理,用于测量蛋白质的分子扩散率和在特定区域的驻留时间,这对于理解信号分子如何跨膜或进入细胞核至关重要。 第七章:高通量功能筛选与系统生物学整合 本章将前述技术整合到大规模的筛选平台中,以期揭示新的生物学功能。详细介绍了基于siRNA/shRNA的基因敲低文库筛选策略,以及如何结合定量蛋白质组学数据,构建和分析细胞对特定药物或环境刺激的系统性反应模型。内容包括网络拓扑分析、关键节点识别以及动态调控环路的建模方法,目标是建立一个预测性的细胞功能网络。 结论: 本书提供的技术体系覆盖了从蛋白质的发现、定量到其在复杂网络中功能验证的完整流程。通过掌握这些基于物理化学原理、生物化学分析和先进成像方法的工具,读者将能够以前所未有的精度和深度解析细胞生命活动中的关键分子事件。本书致力于提供一个聚焦于非共价结合、非修饰标签依赖性的、高分辨率的现代生物分子技术平台。

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读后感

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用户评价

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这本书的叙事风格相当权威,读起来有一种被“领进门”的感觉,作者的语气非常自信且充满洞察力。它不像某些学术著作那样枯燥乏味,而是巧妙地将历史背景穿插在技术讲解之中。比如,在介绍荧光标记技术的发展历程时,作者不仅说明了原理,还生动地描绘了早期科学家们是如何克服技术瓶颈的,这极大地激发了我的学习热情。这种讲述方式使得原本枯燥的化学过程充满了人文色彩。不过,我发现,对于一些涉及新型生物材料的讨论,篇幅似乎分配得稍嫌不足,可能受限于本书的定位或截稿时间。但作为对经典和主流偶联技术进行系统性梳理的典范之作,它的贡献是毋庸置疑的。总而言之,它更像是一位经验丰富的导师在为你进行一对一的辅导,循循善诱,让你心悦诚服地接受这些知识。

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从实用性角度来看,这本书的价值体现在其对实验操作细节的关注程度上。许多教科书只谈原理,但这本书却深入到了“如何做”的层面。比如,在谈到蛋白质纯化后的稳定性问题时,作者给出了多条具体的缓冲液优化建议,甚至提到了不同批次试剂可能带来的细微差异,这种对细节的执着,对于保证实验的可重复性至关重要。我个人非常欣赏它在“故障排除”部分所花费的篇幅,它预见性地列出了常见实验失败的原因,并提供了快速诊断和修正的路线图,这在实际的实验室工作中能节省大量宝贵时间。唯一的遗憾是,对于某些自动化平台的集成应用,书中提及得比较笼统,也许下一版能增加更多关于机器人辅助偶联的案例分享,那将会使这本书的实用价值更上一层楼,真正成为“动手型”科学家的必备手册。

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这本书的结构组织逻辑清晰得令人赞叹,它遵循了一种非常科学的递进关系,从分子层面的相互作用,逐步扩展到复杂的生物系统应用。每一章的过渡都自然流畅,仿佛作者事先已经预设好了读者的认知路径,确保我们在学习新知识时不会感到知识断层。特别是当你需要对比两种截然不同的偶联方法时,书中的对比表格和总结图表效率极高,能够迅速定位关键差异点。我发现自己可以快速地在不同章节间跳转,查找所需信息,而不会迷失在浩瀚的专业术语中。这种高度优化的信息架构,极大地提升了我的学习效率。对于一个需要频繁查阅和交叉引证的科研人员来说,这种组织上的精妙设计,其价值甚至超越了单纯的内容本身。这本书无疑是该领域内信息组织和呈现的典范之作。

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我对这本书的深度和广度感到非常满意,它绝不是那种浅尝辄止的入门读物。作者对各种生物偶联策略的剖析,简直达到了教科书级别的细致。例如,在讨论酶催化交联时,书中详细对比了不同底物特异性酶的优缺点,并附带了详尽的案例分析,这让我对自己实验室正在进行的项目有了新的思路。我注意到,书中对那些已经被认为是“标准”技术的改进和优化也给予了充分的关注,比如用微流控技术来精确控制偶联反应条件的最新进展,这让这本书保持了与时俱进的生命力。然而,我个人的阅读体验中,略感不足的是,某些前沿技术的理论推导过程略显跳跃,对于没有相关背景知识的读者来说,可能需要结合其他文献来辅助理解。但总的来说,它成功地架设了一座从基础理论到尖端应用的坚实桥梁,对于渴望成为该领域专家的研究人员来说,这是不可或缺的资源。

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这本书的装帧和印刷质量相当不错,纸张摸起来很有质感,字迹清晰,图表排版也十分专业。对于一本涉及复杂化学和生物学原理的参考书来说,这一点至关重要。我花了大量时间翻阅前几章,发现它在基础概念的阐述上做得尤为出色。那些复杂的分子结构和反应机制,作者似乎总能找到一种既严谨又不失生动的描述方式,这对于初次接触这个领域的读者来说,无疑是一大福音。特别是关于偶联反应动力学的介绍,不仅仅停留在公式的堆砌,而是深入探讨了实际操作中可能遇到的干扰因素,这体现了作者深厚的实践经验。我尤其欣赏作者在章节末尾设置的“高级讨论”部分,它常常将理论延伸到最新的研究热点,让人在扎实掌握基础的同时,也能窥见未来的发展方向。虽然有些章节的篇幅略显拥挤,但整体而言,作为一本工具书或案头参考,它的物理呈现绝对是顶级的,让人愿意频繁地拿起它进行查阅和学习。

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