电泳(第二版)/生物化学实验技术丛书

电泳(第二版)/生物化学实验技术丛书 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:
作者:
出品人:
页数:0
译者:
出版时间:
价格:48.00
装帧:
isbn号码:9787030067883
丛书系列:
图书标签:
  • 电泳
  • 蛋白质电泳
  • 核酸电泳
  • 生物化学
  • 实验技术
  • 生物技术
  • 分子生物学
  • 第二版
  • 教学参考书
  • 科研工具书
想要找书就要到 小哈图书下载中心
立刻按 ctrl+D收藏本页
你会得到大惊喜!!

具体描述

现代分子生物学研究方法与实践 本书旨在为生物医学领域的研究人员、高年级本科生及研究生提供一套全面、深入且与时俱进的分子生物学实验技术指南。 随着基因组学、蛋白质组学以及细胞生物学研究的飞速发展,对精确、高效、可靠的实验技术的需求日益迫切。本书将聚焦于当前科研前沿中应用最广泛、最具创新性的核心技术,并结合实际操作中的关键考量与潜在陷阱,构建一个系统化的实验方法知识体系。 第一部分:核酸操作的基石与前沿 本部分系统梳理了从样本制备到核酸分析的整个流程,强调了高通量和高精度操作的重要性。 第一章 样本采集与高质量核酸提取: 详细阐述了不同生物材料(包括组织、细胞系、血液、微生物等)的优化采集方案,重点讨论了抑制剂对后续酶促反应的影响及其去除方法。在核酸提取方面,不仅覆盖了经典的酚氯仿提取法,更侧重于商业化试剂盒的原理、选择标准(如粘度、残留物控制)以及自动化提取平台的应用。特别辟出章节讨论了植物和微生物等难处理样本的核酸提取策略,以及如何有效分离和纯化gDNA、mtDNA和总RNA。 第二章 聚合酶链式反应(PCR)及其变体深度解析: 本章深入探讨了标准PCR、定量实时荧光定量PCR(qPCR)和数字PCR(dPCR)的技术细节。对于qPCR,详细分析了染料法(SYBR Green)和探针法(TaqMan, Molecular Beacon)的优缺点、扩增效率的校准(标准曲线的建立)以及溶解曲线分析在特异性评估中的作用。dPCR作为绝对定量的新标准,本书详细介绍了其乳液微滴生成技术、反应体系设置、以及数据解读,特别是在低丰度靶标检测中的优势。此外,对热启动酶的选择、引物二聚体的抑制机制、以及在复杂基质中进行高保真PCR的技术要点进行了详尽的阐述。 第三章 基因组测序文库制备与下一代测序(NGS)基础: 随着NGS成为主流,本章聚焦于文库构建的关键步骤。详细介绍了DNA/RNA片段化(机械、酶促)、末端修复、A尾加接(TA-ligation)以及接头(Adapter)的连接效率优化。针对不同的测序应用(如全基因组重测序WGS、转录组测序RNA-Seq、ChIP-Seq等),分别给出了优化的文库构建流程和质量控制指标(如片段大小分布、DNA浓度)。同时,简要介绍了主流测序平台(如Illumina平台)的工作原理及数据输出格式(FASTQ)。 第四章 分子克隆技术的高级应用: 本章超越了基础的限制性内切酶消化和连接,着重于高效的载体构建策略。详细介绍了重组DNA的无缝克隆技术(如Gibson Assembly, SLIC, In-Fusion),讨论了其在多片段组装和复杂载体设计中的应用。对于载体的选择,不仅包括质粒、噬菌体,还涵盖了病毒载体(如AAV、慢病毒)的包装系统和包装效率的优化。此外,还包括了基因编辑工具CRISPR/Cas9系统的构建、靶向性验证及脱靶效应的评估策略。 第二部分:蛋白质组学与结构生物学的前沿技术 蛋白质是生命活动的核心执行者,本部分聚焦于如何从定性到定量,全面解析蛋白质的表达、修饰和功能。 第五章 蛋白质提取、纯化与定量: 探讨了从细胞裂解到目标蛋白纯化的全过程优化。针对不同定位的蛋白质(膜蛋白、核蛋白、胞内蛋白),推荐了不同的裂解缓冲液配方和预处理方法。蛋白质定量方面,除了经典的Bradford和BCA法,深入分析了基于紫外吸收的定量方法及其局限性。纯化技术部分,重点介绍了亲和层析(Affinity Chromatography,如His-tag, GST-tag)的介质选择、洗脱条件优化,以及离子交换层析和分子筛层析在去除杂蛋白方面的协同应用。 第六章 蛋白质电泳与印迹分析的精细化: 本书对蛋白质电泳(SDS-PAGE)的原理进行了深入剖析,包括不同浓度的聚丙烯酰胺凝胶对分子量分离的精确度影响。对于Western Blotting,详细阐述了转膜技术的优化(湿转、半干转、转膜效率的验证),抗体孵育过程中的非特异性封闭优化,以及高灵敏度化学发光(ECL)和荧光检测系统的选择与应用。特别讨论了二维凝胶电泳(2D-PAGE)在高分辨率蛋白质分离中的应用及图像分析。 第七章 质谱技术在蛋白质组学中的应用基础: 本章介绍蛋白质组学研究的关键技术——质谱。涵盖了样品预处理(如酶解、标记,如TMT, iTRAQ的原理)、LC-MS/MS系统的配置、以及数据分析软件(如MaxQuant, Proteome Discoverer)的基本操作和肽段鉴定、蛋白质定量结果的可靠性评估。重点讨论了靶向蛋白质组学(SRM/PRM)和非靶向蛋白质组学在回答不同生物学问题时的适用性。 第八章 蛋白质结构与相互作用研究: 结构生物学是理解功能的关键。本章介绍了X射线晶体学、冷冻电镜(Cryo-EM)的基本工作流程和样本要求。在相互作用研究方面,详细阐述了免疫共沉淀(Co-IP)的实验设计,包括抗体质量筛选、洗脱条件确定,以及后续的验证方法(如Western Blot或质谱鉴定互作蛋白)。此外,还涵盖了表面等离子共振(SPR)技术在测定分子间亲和力(KD值)中的应用。 第三部分:细胞生物学与功能验证的高级平台 现代生物学研究越来越依赖于活细胞或体内模型,本部分侧重于细胞功能的可视化和功能性调控。 第九章 细胞培养与无菌操作的严格规范: 强调了高品质细胞培养的必要性。内容包括各类细胞(原代细胞、永生化细胞、干细胞)的最佳培养基配方、血清替代品的选择。重点讲解了支原体污染的检测与防治,以及无菌操作的每一个细节,确保实验结果的可重复性。 第十章 细胞转染与基因表达调控: 详细对比了脂质体介导、电穿孔法和病毒载体介导转染的效率、细胞毒性及适用范围。针对shRNA/siRNA干扰实验,讲解了靶点选择、寡核苷酸设计的最佳实践、以及如何通过qPCR和Western Blot验证基因沉默效率的有效性。对于过表达实验,讨论了瞬时转染与稳定细胞株建立的流程。 第十一章 细胞成像与活细胞分析技术: 本章聚焦于蛋白质和细胞结构的实时观察。涵盖了荧光显微镜(Confocal, TIRF)的基本原理与图像采集优化,包括荧光染料和探针的选择、漂白矫正。此外,深入探讨了流式细胞术(FACS)在细胞分群、凋亡检测(Annexin V/PI)、细胞周期分析中的应用,并介绍了光谱补偿和补偿矩阵构建的关键步骤。 第十二章 免疫组织化学与免疫荧光染色(IHC/IF): 讲解了组织固定(石蜡包埋、冷冻切片)、抗原修复(热修复、酶修复)对染色结果的决定性影响。在IF染色中,详细阐述了单重、双重及多重荧光标记的染色顺序、抗体二抗的交叉反应排除、以及荧光淬灭现象的预防。本章还包括了组织透明化技术(如CLARITY的原理简介)在三维成像中的前景。 附录:实验数据分析与规范化 本部分提供了实验设计、统计学方法和实验室规范的实用指导。涵盖了实验对照的设置原则、样本量估算、以及常用统计检验(t检验、ANOVA、非参数检验)的选择标准。强调了数据记录、可视化(GraphPad Prism, ImageJ/Fiji)的最佳实践,确保研究成果的科学严谨性和可重复性。 --- 本书通过理论阐述与操作细节的深度结合,旨在弥合实验室基础操作与前沿技术应用之间的鸿沟,是分子生物学研究人员不可或缺的实用工具书。

作者简介

目录信息

读后感

评分

评分

评分

评分

评分

用户评价

评分

我是一个研究生,目前的研究方向涉及到蛋白质的表达和纯化。在我的实验过程中,常常需要检测目标蛋白的表达水平,评估纯化效果,甚至分析蛋白质的亚基组成和翻译后修饰。这本书的第四章,专门讲解了蛋白质电泳,这对我来说太及时了。特别是SDS-PAGE,它详细解释了SDS是如何与蛋白质结合,赋予蛋白质统一的负电荷,从而使其分离主要取决于分子量。书里不仅有详细的实验步骤,还对影响分离效果的各种因素进行了深入分析,比如PAGE凝胶的pH值、梯度凝胶的使用、染色的方法( Coomassie Brilliant Blue和银染)以及如何进行条带的定量分析。我印象最深刻的是关于考马斯亮蓝染色的一些技巧,比如如何优化染色和脱色时间,以获得清晰的背景和易于观察的条带。我还学习了如何根据分子量标准蛋白来估算目标蛋白的分子量,这一点对于我初步判断蛋白表达是否成功以及后续的鉴定至关重要。此外,书中还提到了二维电泳,虽然我目前还没有用到,但了解了它的原理和应用,为我将来可能的研究方向打开了思路。

评分

我拿到这本书的时候,正值我对基因克隆实验感到困惑的时候。当时我需要分离特定大小的DNA片段,以便进行后续的载体连接。虽然我之前也接触过一些关于DNA提取和PCR的基础知识,但对于如何精确地分离出我需要的DNA条带,我还是有些茫然。这本书的第三章,也就是关于核酸电泳的部分,简直就像为我量身定做的。它详细地讲解了琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)在DNA分析中的应用。我当时主要使用的是琼脂糖凝胶电泳,书里对不同浓度琼脂糖凝胶的适用范围、凝胶的制备过程、电泳缓冲液的选择以及上样技巧都进行了非常细致的描述。我记得尤其有用的是关于如何根据DNA分子量来选择合适的琼脂糖浓度,以及如何通过调整电压和电泳时间来优化分离效果。书中还提供了一些常见问题的解决方法,比如条带拖尾、弥散不清等,这对我这种新手来说,简直是救星。我按照书中的步骤,成功地分离出了我需要的DNA片段,并且连接效率也得到了显著提高,这让我对电泳技术产生了由衷的敬意,也更加信任这本书的实用性。

评分

作为一名在读的生物化学博士生,我深知电泳技术在研究中的地位。我经常需要进行凝胶电泳来分离和鉴定各种生物大分子,但有时会遇到一些棘手的问题,比如条带不清晰、回收效率不高等等。这本书的第二版,在继承了第一版扎实内容的基础上,加入了很多新的内容和技术进展。我特别关注了书中关于新型电泳材料和设备的部分,比如微流控电泳和毛细管电泳。虽然这些技术我目前还没有直接应用,但了解它们的原理和优势,对我的研究视野很有帮助。书中还对一些经典电泳技术的优化方法进行了深入探讨,比如如何提高蛋白质的溶解度和稳定性,如何优化DNA的回收效率。我从中学习到了很多实用的小技巧,这些技巧在日常实验中能够显著提高我的工作效率和实验成功率。这本书的参考文献也非常丰富,对于我查找相关的研究文献提供了便利。

评分

在我进行生物化学实验的学习过程中,电泳技术可以说是贯穿始终的一项核心技能。这本书的每一章节都围绕着电泳展开,但又不仅仅局限于操作本身。我注意到,书中在讲解每一种电泳技术时,都会先从其生物学背景和实验目的出发,然后再详细介绍操作步骤。这一点对于我这种希望理解“为什么”而不仅仅是“怎么做”的学习者来说,非常有价值。例如,在讲解SDS-PAGE时,它不仅仅告诉你如何配置凝胶和运行电泳,还详细解释了SDS和巯基乙醇的作用机制,以及它们如何影响蛋白质的构象和电荷。这让我对实验背后的原理有了更深入的理解,也能够更好地根据实验需求来调整实验条件。书中还包含了一些案例分析,通过分析具体的实验数据来讲解如何解读电泳结果,这对于提高我的实验分析能力非常有帮助。

评分

这本书对于任何一个从事生命科学研究的人来说,都应该是一本值得拥有的工具书。我经常需要回顾某些电泳技术的具体操作步骤,或者查找某个特定实验条件的优化建议。这本书在这方面做得非常出色,它不仅提供了详尽的实验流程,还包含了大量关于试剂配制、仪器操作、以及数据分析的细节。我尤其欣赏书中关于安全操作的提示,在进行电泳实验时,涉及到电流和化学试剂,安全操作是至关重要的。书中对此有专门的章节进行强调,并且在各个实验步骤中穿插了相关的安全注意事项。这一点让我觉得这本书非常负责任,因为它不仅关注实验技术的实用性,也关注实验人员的安全。这本书的内容详实、条理清晰、图文并茂,能够满足不同层次读者的需求,无论是初学者还是经验丰富的研究人员,都能从中获益匪浅。

评分

我是一名博士后,研究方向是肿瘤生物学。在我的日常工作中,常常需要分析肿瘤细胞中特定基因的表达情况,以及蛋白质的活性和相互作用。这本书的“电泳”部分,虽然看起来很基础,但其深入的讲解和广泛的应用范围,让我觉得受益匪浅。我之前在进行RNA提取和表达分析时,经常会遇到RNA降解的问题,导致实验结果不准确。这本书中关于RNA电泳的部分,不仅讲解了RNA的提取和鉴定方法,还详细阐述了导致RNA降解的常见原因以及如何避免。我还学习到了如何使用电泳来评估RNA的完整性,这对于我后续的RT-PCR和RNA-seq实验至关重要。此外,书中关于蛋白质免疫印迹(Western Blotting)的章节,也给了我很多启发。我之前在进行Western Blotting时,经常会遇到抗体非特异性结合的问题,导致假阳性结果。这本书中对封闭液的选择、抗体孵育条件以及显色方法的优化都给出了详细的建议,这帮助我显著提高了Western Blotting的特异性和灵敏度。

评分

我是一个对生物学充满好奇的学习者,虽然没有专业的背景,但一直对生命科学的奥秘充满向往。一次偶然的机会,我接触到了这本书。虽然书名听起来有些专业,但它的内容却以一种非常清晰和易于理解的方式,把我带入了电泳的世界。我最先被吸引的是书中那些精美的插图和表格,它们将复杂的原理以直观的方式呈现出来,让我这个初学者也能大致了解电泳是如何工作的。我从书中了解到,原来电泳不仅仅是一种实验技术,它背后蕴含着物理化学的基本原理,比如电荷、分子大小、以及介质的阻力对物质迁移的影响。我特别喜欢书中关于不同电泳技术应用场景的介绍,比如DNA电泳如何用于法医鉴定,蛋白质电泳如何用于疾病诊断。这些生动的例子让我觉得生物化学并非高高在上,而是与我们的生活息息相关。这本书为我打开了一扇通往生物世界的大门,让我对生命科学的兴趣愈发浓厚。

评分

作为一名生物技术专业的本科生,我一直在寻找一本能够系统性地讲解生物化学实验技术的教材。这本书虽然标题是“电泳”,但它所涵盖的内容远不止于此。我发现,书中在讲解各种电泳技术时,都紧密结合了具体的实验应用场景,例如在DNA电泳部分,它不仅仅告诉你如何做电泳,还穿插了基因克隆、DNA指纹分析等实际应用。同样,在蛋白质电泳部分,也涉及到了蛋白质纯化、Western Blotting的基础。这让我觉得这本书非常有价值,因为它不仅仅是技术的罗列,更是对技术背后生物学意义的阐释。我尤其喜欢书中关于各种实验条件的优化建议,比如在进行DNA电泳时,如何根据DNA的片段大小和浓度选择合适的电压,以及如何避免高温导致的DNA变性。这些细节对于确保实验的成功率至关重要。这本书的语言表达也比较清晰易懂,即使是对于初学者,也能够比较容易地理解其中的原理和操作。

评分

这本书的封皮设计给我一种非常扎实的学术感,暗色调的书名和作者信息,配上那种略带磨砂质感的纸张,一下子就勾起了我对生物化学实验的求知欲。我记得当时选择这本书,是因为我的导师在课程上反复强调了电泳技术在蛋白质和核酸分析中的重要性,尤其是在理解生物大分子的基本性质、纯化过程以及相互作用方面。我当时正准备开始一项关于酶活性调控的课题,而电泳无疑是验证实验结果,追踪目标蛋白状态的关键手段。翻开书的第一部分,它并没有直接切入复杂的实验操作,而是先从电泳的物理原理出发,详细阐述了电场、电荷、分子量以及介质对迁移速度的影响。这一点让我觉得非常专业,因为它让我不仅仅是“照着做”,而是理解“为什么这样做”。作者用了很多图示来解释这些原理,比如电泳槽内部的电场分布,以及不同电荷密度和大小的分子在电场中的受力情况,这对于我这种偏重理解的读者来说,非常有帮助。我尤其欣赏它在原理介绍中穿插的那些历史发展脉络,简略提及了电泳技术从早期概念到如今成熟体系的演变,让我对这项技术有了更宏观的认识,也感受到了科学研究的严谨和不断进步。

评分

我是一名实验室技术员,负责为科研人员提供实验支持。我每天的工作就是帮助他们完成各种生物化学实验,包括电泳。这本书是我最近才接触到的,它的内容非常详实,而且非常贴合实际操作。我特别喜欢书中关于仪器设备的维护和校准的部分,这对于保证实验结果的准确性非常重要。例如,它详细介绍了电泳仪的电压、电流设置,以及如何清洁和保养电泳槽,这些细节的指导,大大减少了我们在实验过程中遇到的技术问题。我还从书中学习到了如何根据不同的实验需求,选择最合适的电泳缓冲液和凝胶配方,这使得我们可以更高效地为科研人员提供服务。书中还提供了一些故障排除的指南,当我们在实验中遇到异常情况时,可以快速找到原因并加以解决。总的来说,这本书极大地提升了我的工作效率和专业技能,让我能够更好地为科研项目做出贡献。

评分

评分

评分

评分

评分

相关图书

本站所有内容均为互联网搜索引擎提供的公开搜索信息,本站不存储任何数据与内容,任何内容与数据均与本站无关,如有需要请联系相关搜索引擎包括但不限于百度google,bing,sogou

© 2026 qciss.net All Rights Reserved. 小哈图书下载中心 版权所有