酶活检测 pdf epub mobi txt 电子书下载 2026

简体网页||繁体网页

☆☆☆☆☆

出版者:化学工业出版社

作者:[美国] 雷蒙

出品人:

页数:334

译者:蔡真

出版时间:1970-1

价格:49.00元

装帧:

isbn号码:9787122012005

丛书系列:

图书标签:

酶学
酶活性
生物化学
实验技术
检测方法
临床检验
生物分析
酶动力学
医学检验
实验室技术

下载链接在页面底部

facebook linkedin mastodon messenger pinterest reddit telegram twitter viber vkontakte whatsapp 复制链接

想要找书就要到小哈图书下载中心

qciss.net

立刻按 ctrl+D收藏本页

你会得到大惊喜!!

具体描述

《酶活检测:高能量筛选,遗传选择以及指纹分析》系统地介绍了在高通量筛选、遗传选择和酶指纹分析这三个领域中所使用的各种酶活检测方法，涵盖了近年来在酶活检测方面取得的大部分成果。各个章节脉络清晰，或是介绍某一普适检测方法(如琼脂平板法、化学互补法等)在多种酶的活性检测中的应用，或是列举针对某一类重要的酶(如氧化还原酶、蛋白酶等)的多种检测方法。书中对酶活检测方法的介绍非常细致，包括其原理、流程、操作步骤、优缺点等，并给出了大量的相关文献，便于读者深入查阅。

深入浅出：分子生物学核心技术与应用本书旨在为生物科学领域的学习者、研究人员和技术人员提供一套全面、深入且实用的分子生物学核心技术指南。全书结构严谨，内容涵盖了从基础原理到前沿应用的多个层面，力求以清晰的逻辑和详实的案例，搭建起读者理解和掌握现代生物学研究工具的坚实桥梁。第一部分：生命物质的基础构建——核酸与蛋白质的获取与分析本部分聚焦于生命活动最核心的分子——核酸（DNA和RNA）和蛋白质的提取、纯化与定量。我们首先详细阐述了细胞及组织样本的前处理技术，包括不同类型细胞的裂解方法（机械法、化学法、酶解法）及其适用性，重点讨论了如何优化裂解液配方以最大限度地保护目标分子不被降解。在核酸的提取与纯化方面，我们详尽比较了溶剂沉淀法、固相萃取法（如硅胶柱层析）和磁珠法的工作原理、优缺点及操作细节。特别地，针对不同来源的样本（如土壤、血液、植物组织），我们提供了详尽的“疑难杂症”解决方案，例如如何有效去除提取物中的多糖和腐殖酸等抑制剂。纯化后的核酸定量与质量评估是后续实验成功的关键，本章深入讲解了紫外分光光度法、荧光定量法（如Picogreen, Qubit）的理论基础，并强调了影响读数准确性的因素及校准方法。对于蛋白质研究，本部分从蛋白质提取与溶解性优化入手，详细阐述了不同缓冲液系统的选择原则（如pH值、盐浓度、去垢剂种类）以及如何处理难溶性表达的重组蛋白。随后，我们系统地介绍了蛋白质的分离与纯化技术。层析技术是蛋白质纯化的核心，本书全面覆盖了亲和层析（如His-tag, GST-tag）、离子交换层析和分子筛层析的原理、介质选择和梯度洗脱策略。对于需要高分辨率分离的应用，我们还专门辟章讲解了电泳技术——从基础的SDS-PAGE到针对复杂混合物的二维电泳（2-DE），包括胶的配制、预染/银染/考马斯亮蓝染色，以及如何根据分子量和等电点进行精准判断。第二部分：核酸的体外扩增、修饰与可视化本部分是现代分子生物学实验的基石。聚合酶链式反应（PCR）的章节从酶的选择（Taq, Pfu, 高保真酶）和引物设计原则出发，深入探讨了热循环参数的优化，并详细解析了各种衍生技术，如： 1. 实时荧光定量PCR (qPCR)：聚焦于SYBR Green和TaqMan探针技术的原理对比、溶解曲线分析的意义，以及如何进行绝对定量和相对定量，包括内参基因的选择和校正。 2. 逆转录PCR (RT-PCR)：讲解了从RNA到cDNA的转化效率评估，以及一步法和两步法的优劣。 3. 高保真和长片段PCR：讨论了避免错配和扩增大片段DNA的技术策略。紧接着，本书详细介绍了基因测序技术的发展历程与核心原理。从经典的Sanger测序法（双脱氧链终止法）的操作流程和结果判读，到下一代测序（NGS）技术的基本流程（文库构建、簇生成、边合成边测序），本部分侧重于解释这些技术如何帮助研究者揭示基因组的奥秘。在分子克隆技术方面，我们提供了详尽的实验手册：质粒的构建、目标片段的获取（限制性内切酶消化、同源重组、Gibson Assembly），以及各种载体的特性与选择指南。特别是针对现代无缝克隆的需求，我们提供了高效的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建与验证流程，包括sgRNA的设计、靶向效率的评估及脱靶效应的监控。第三部分：蛋白质的结构解析、互作与功能探究本部分侧重于理解蛋白质的动态行为和它们在细胞网络中的角色。在蛋白质相互作用研究方面，我们系统梳理了体内（In Vivo）和体外（In Vitro）的技术： 1. 酵母双杂交系统 (Y2H)：从实验设计、筛选策略到结果分析，详细阐述了如何寻找蛋白质间的直接物理接触。 2. 蛋白质免疫共沉淀 (Co-IP) 与Pull-down实验：重点讨论了抗体质量、洗脱条件以及如何通过WB验证复合体的稳定性。 3. 基于质谱的蛋白质组学 (Mass Spectrometry)：简要介绍了MALDI-TOF和LC-MS/MS在鉴定蛋白质复合物成员中的应用，特别是蛋白质相互作用组（Interactome）的构建。蛋白质的定位与动态示踪是理解其功能环境的关键。本书详细介绍了免疫组织化学（IHC）/ 免疫荧光 (IF) 的抗原修复、一抗/二抗的筛选与优化、荧光成像质量控制，并引入了绿色荧光蛋白 (GFP) 及其衍生体（如RFP, CFP）的应用，包括共表达和FRET技术在测量分子间距上的原理。对于蛋白质功能研究，我们深入讲解了基因沉默技术：siRNA/shRNA的设计、递送效率的提升方法（脂质体、电穿孔），以及如何通过检测靶基因表达水平的下降来确认沉默效果。此外，我们还探讨了如何利用表达载体过表达或敲除目标基因对细胞表型产生的影响。第四部分：生物信息的整合与高级应用最后，本部分将实验数据与计算分析相结合。我们介绍了分子生物学实验数据的统计学处理方法，强调了实验重复性和生物学重复性的重要性。特别关注了基因表达谱分析（如微阵列和RNA-Seq数据的标准化与差异表达分析）的基本流程。本书通过多个综合案例分析，展示了如何将上述技术串联起来，例如：从表型出发，通过siRNA筛选关键基因，再利用ChIP-seq验证转录因子结合位点，最终形成一个完整的功能闭环研究。本书结构清晰，图表丰富，注重实验的可重复性和细节优化，旨在成为读者从理论走向实践的可靠工具书。