Principles of Mass Spectrometry Applied to Biomolecules

Principles of Mass Spectrometry Applied to Biomolecules pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:John Wiley & Sons Inc
作者:Lifshitz, Chava (EDT)/ Laskin, Julia (EDT)
出品人:
页数:687
译者:
出版时间:2006-10
价格:1451.00 元
装帧:HRD
isbn号码:9780471721840
丛书系列:
图书标签:
  • 质谱学
  • 生物分子
  • 蛋白质组学
  • 代谢组学
  • 生物分析
  • 质谱分析
  • 生物化学
  • 分子生物学
  • 仪器分析
  • 应用质谱学
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具体描述

An extensive compilation of articles by leading professionals, this reference explains the fundamental principles of mass spectrometry as they relate to the life sciences. Topics covered include spectroscopy, energetics and mechanisms of peptide fragmentation, electron capture dissociation, ion-ion and ion-molecule reactions, reaction dynamics, collisional activation, soft-landing, protein structure and interactions, thermochemistry, and more. The book empowers readers to develop new ways of using these techniques.

好的,这是一份关于《Principles of Mass Spectrometry Applied to Biomolecules》一书的详细简介,其内容完全聚焦于该领域的核心知识,不包含任何不相干的信息: --- 《生物分子质谱学原理》(Principles of Mass Spectrometry Applied to Biomolecules) 内容简介 本书是为化学、生物化学、生物物理学、药物开发以及相关生命科学领域的研究人员、高级本科生和研究生设计的一部全面且深入的专业著作。本书旨在系统地阐述质谱技术(Mass Spectrometry, MS)在分析复杂生物分子,特别是蛋白质、多肽、核酸、脂质及代谢物等方面的理论基础、仪器原理、实际应用与数据解析方法。全书结构严谨,内容覆盖了从基础物理化学原理到前沿实验技术的广泛范畴,强调理论与实践的紧密结合。 第一部分:质谱学的基本原理与仪器构造 本书首先奠定了坚实的理论基础,详细介绍了质谱分析过程的三个核心阶段:离子化、质量分析与检测。 1. 离子化技术:从气相到液相的桥梁 生物分子由于其高分子量和热不稳定性,对离子化技术提出了极高的要求。本书系统地回顾了各类软电离技术的发展历程和工作机制: 电喷雾电离(Electrospray Ionization, ESI): 详细阐述了ESI的液滴雾化、溶剂蒸发和电荷转移过程,分析了影响离子产额的关键参数,如液体流速、电压和溶剂体系。特别讨论了ESI在分析大分子复合物(如蛋白质-配体相互作用)时的应用潜力。 基质辅助激光解吸电离(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization, MALDI): 深入解析了基质在吸收激光能量、形成基质-分析物自由基复合物以及向真空喷射过程中的作用机理。重点对比了不同基质(如CHCA, DHB)对不同类型生物分子(如肽段、寡核苷酸)的选择性。 其他软电离技术: 简要介绍了大气压化学电离(APCI)、快速升温电离(Thermal Desorption Electrospray Ionization, TD-ESI)等辅助技术,及其在特定应用场景中的优势。 2. 质量分析器:精确分离的引擎 高质量分辨率和质量准确度是生物分子分析的关键。本书详尽描述了主流质量分析器的设计原理、性能指标及其在生物医学研究中的适用性: 四极杆(Quadrupole, Q): 阐述了射频(RF)和直流(DC)电场对离子运动轨迹的控制原理,分析其作为质量过滤器和离子阱(Ion Trap)的应用模式。 离子阱技术(Ion Traps): 深入探讨了线性离子阱和三维离子阱的捕获、扫描和碎裂机制,重点分析了其在多级质谱(MS/MS)中的重要地位。 飞行时间(Time-of-Flight, TOF): 详细解释了离子在匀强电场中加速后基于质量/电荷比的飞行时间差异,特别是反射式TOF(Reflector TOF)如何实现高分辨率和高灵敏度的性能提升。 傅里叶变换离子回旋共振(FT-ICR)与轨道阱(Orbitrap): 对高分辨质谱技术进行了深入探讨。解析了FT-ICR中离子在磁场中的回旋频率测量原理,以及Orbitrap中静电场下离子的振荡频率与质量数的关系,强调了它们在精确分子量测定中的卓越性能。 3. 离子检测与数据获取 阐述了电子倍增器、法拉第杯等检测器的工作原理,以及数据采集模式(如全扫描、选择离子监测SIM、多反应监测MRM)的选择对实验灵敏度和特异性的影响。 第二部分:生物分子分析的核心应用技术 本书将理论知识应用于实际的生物分子分析流程,重点介绍了蛋白质组学和代谢组学中的关键技术。 1. 蛋白质组学(Proteomics)中的应用 蛋白质组学是质谱技术应用最广泛的领域之一。本书聚焦于如何通过MS解决蛋白质的鉴定、定量和修饰分析: 肽图谱分析(Peptide Mapping): 描述了蛋白质酶解(如胰酶、Trypsin)的原理,以及如何利用LC-MS/MS对肽段进行识别。重点讲解了数据依赖采集(DDA)和数据非依赖采集(DIA)策略在肽段覆盖率和定量准确性上的差异。 从头测序(De Novo Sequencing): 探讨了在缺乏参考基因组或蛋白质序列信息时,如何利用高质量的MS/MS谱图序列信息来重建未知肽段的氨基酸序列。 翻译后修饰(Post-Translational Modifications, PTMs)分析: 深入分析了磷酸化、糖基化、乙酰化等关键PTMs的检测挑战。详细介绍了富集策略(如金属亲和层析、抗体亲和捕获)以及利用特定碎片离子(Signature Ions)进行定性定量的流程。 蛋白质定量策略: 全面对比了相对定量和绝对定量的技术。相对定量方法包括标记物依赖技术(如SILAC, iTRAQ, TMT)和标记物独立技术(Label-Free Quantification, LFQ)。讨论了如何利用峰面积或离子计数进行准确的生物学差异分析。 2. 核酸与脂质组学 寡核苷酸分析: 探讨了DNA和RNA片段的分子量测定、序列分析,以及利用MALDI-TOF进行核酸纯度评估。 脂质组学(Lipidomics): 介绍了脂质分子(如磷脂、鞘脂、甘油三酯)的复杂性。重点阐述了如何利用高分辨MS结合特定的碎裂模式(如信息依赖和信息非依赖采集)来解析脂质物种的头部基团和脂肪酸链组成。 第三部分:数据处理、仪器耦合与未来展望 本书的最后部分关注于实验数据的有效处理和技术的集成化。 1. 色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS与GC-MS) 强调了色谱分离在处理复杂生物样本中的不可替代性。详细分析了高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱(UPLC)与MS的耦合如何提高分离效率和分析灵敏度,尤其是在代谢物和药物分析中的关键作用。 2. 生物信息学与数据解析 涵盖了从原始谱图到生物学结论转化的关键步骤。内容包括:数据库搜索算法(如SEQUEST, Mascot)的工作原理、错误率控制(FDR)、谱图质量评估,以及高通量数据可视化与统计分析工具的应用。 3. 质量保证与方法验证 对于药物研发和临床转化至关重要的部分,本书阐述了如何根据FDA/ICH指南对生物分子分析方法进行性能验证,包括线性范围、检出限(LOD)、定量限(LOQ)、准确度和精密度评估。 通过对这些核心内容的深入讲解,《Principles of Mass Spectrometry Applied to Biomolecules》为读者提供了一个坚实的技术框架,使其能够独立设计、执行和解释复杂的生物分子质谱实验。

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