Human Cell Culture Protocols pdf epub mobi txt 電子書 下載2026

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☆☆☆☆☆

出版者:Humana Pr Inc

作者:Picot, Joanna (EDT)

出品人:

頁數:359

译者:

出版時間:

價格:1474.00元

裝幀:HRD

isbn號碼:9781588292223

叢書系列:

圖書標籤:

• 細胞培養
• 細胞生物學
• 實驗方案
• 生物技術
• 實驗室技術
• 醫學研究
• 生物醫學工程
• 乾細胞
• 組織工程
• 分子生物學

《細胞生物學前沿技術：從基礎到應用》 簡介 本書旨在為細胞生物學研究者、高年級本科生及研究生提供一個全麵、深入且極具操作性的技術指南，專注於當前生命科學研究中最核心、最具挑戰性的幾個前沿領域。我們摒棄瞭對基礎細胞培養的冗餘敘述，而是將重點聚焦於高級顯微成像技術、單細胞分析策略、基因編輯的精確應用以及類器官模型的構建與功能驗證。全書結構清晰，內容緊密結閤實際實驗需求，力求成為實驗室中不可或缺的案頭參考書。 --- 第一部分：超分辨率成像與活細胞動態學分析 本部分深入探討瞭超越傳統光學顯微鏡極限的成像技術，以及如何利用這些技術捕獲細胞生命過程中的瞬時事件。 第一章：熒光探針的理性選擇與優化 詳細闡述瞭新一代環境敏感型、靶嚮特異性熒光探針的設計原理與應用範疇。重點討論瞭鈣離子、活性氧物種（ROS）以及特定磷酸化位點的實時監測探針的選擇標準、最佳激發/發射波長匹配，以及如何校準熒光信號的定量準確性。內容涵蓋瞭FRET/BRET技術在分子間相互作用研究中的高級應用，特彆是跨膜信號轉導通路中蛋白質復閤體的動態組裝與解離分析。 第二章：拓展極限：STED、PALM/STORM與SIM 本章是關於超分辨率顯微鏡（SRM）實踐的深度指南。 STED（受激發射損耗）：詳細解析瞭光毒性控製與漂白速率最小化策略，特彆針對神經元樹突棘或綫粒體內脊等高密度結構成像的參數優化。 PALM/STORM（單分子定位顯微技術）：提供瞭樣本準備（固定劑選擇、緩衝液pH值對單分子重建的影響）的精細步驟，並輔以高密度分子定位數據的三維重建與誤差分析流程。 SIM（結構光照顯微鏡）：側重於其在高速、低光毒性下對細胞骨架網絡（微管、肌動蛋白）的結構解析，並提供傅裏葉域重構的常見陷阱及規避方法。 第三章：多維實時活細胞成像策略 超越傳統的延時成像，本章聚焦於四維（XYZT）乃至五維（XYZT + 某種分子事件）的活細胞追蹤。內容包括：如何設計低漂移的定製化培養室（Chamber）以保證數小時甚至數日的成像穩定性；如何結閤光遺傳學工具（Optogenetics）實現對特定蛋白活性的精準時間控製激活，並實時追蹤其下遊的形態學或信號傳導變化；以及如何運用深度學習算法對采集的龐大數據集進行目標跟蹤和行為分類。 --- 第二部分：單細胞多組學整閤與高通量篩選 隨著技術進步，研究的粒度已進入細胞個體層麵。本部分聚焦於如何有效地從異質性細胞群體中提取、分析並解釋單個細胞的分子信息。 第四章：流式細胞術與光譜分選（FACS/MACs）的高階應用 超越基礎CD標記分選，本章探討瞭質譜流式（CyTOF）技術的應用。詳細介紹瞭抗體偶聯的質譜同位素標簽準備、去聚集策略以及數據降維技術（如t-SNE, UMAP）在識彆罕見細胞亞群中的應用。同時，也覆蓋瞭高內涵篩選（HCS）平颱在藥物作用下細胞錶型變化（如凋亡、遷移、自噬標誌物共錶達）的自動化定量分析流程。 第五章：單細胞轉錄組學（scRNA-seq）的數據解析 本章是針對數據分析的實踐指南。從文庫構建的質量控製（如UMI計數、低質量細胞過濾）開始，深入到先進的生物信息學流程： 批次效應校正：詳細對比Harmony, Seurat v4/v5等工具在消除技術批次差異方麵的優劣。 細胞軌跡推斷：講解Pseudotime分析，特彆是針對乾細胞分化、腫瘤微環境重塑等過程的時間序列重建。 細胞通訊網絡重建：利用CellChat、NicheNet等工具，基於配體-受體錶達預測細胞間的相互作用模式。 第六章：空間轉錄組學的原理與實踐 本部分重點介紹Visium、Slide-seq V2等空間組學技術，以及如何將空間信息與scRNA-seq數據相結閤。內容包括：組織切片的空間脫蠟、RNA捕獲效率的優化，以及如何通過鄰域分析（Neighborhood Analysis）識彆特定空間位置上富集的分子特徵，從而精確定位疾病病竈中的關鍵相互作用區域。 --- 第三部分：基因編輯與靶嚮遞送係統 本部分關注如何精確操控細胞的遺傳物質，並高效地將功能分子遞送至目標細胞核內或細胞質中。 第七章：CRISPR/Cas係統的進化與定製 除瞭標準的Cas9敲除，本章著重介紹堿基編輯器（Base Editors, BEs）和先導編輯器（Prime Editors, PEs）的實施流程。 脫靶效應的評估：介紹 GUIDEseq 和 CIRCLE-seq 等方法用於高精度監測非預期位點的編輯情況。 遞送策略的優化：比較脂質納米粒（LNP）、腺相關病毒（AAV）和電穿孔法在不同細胞類型（如原代神經元、造血乾細胞）中遞送gRNA/Cas酶的效率與安全性。 第八章：錶觀遺傳調控與CRISPRi/a係統 介紹如何利用失活的Cas9（dCas9）與轉錄激活/抑製域（VP64, KRAB）的融閤體，實現對基因錶達的可逆性、劑量依賴性調控。重點討論瞭如何設計高效的gRNA陣列以覆蓋啓動子區域，並解析瞭CRISPRi/a在研究基因網絡調控迴路中的優勢與局限。 --- 第四部分：復雜三維模型：類器官與類器官芯片（Organoid-on-a-Chip） 本部分涵蓋瞭從二維培養轉嚮模擬生理環境的復雜係統構建技術。 第九章：多組織源性類器官的構建與成熟 詳細描述瞭來自多能乾細胞（iPSC）或成體組織乾細胞（ASC）的復雜器官類器官的培養流程： 譜係誘導的精細調控：針對腸道、肝髒、胰腺類器官，詳細列齣瞭關鍵生長因子（如Wnt/R-spondin/Noggin）的梯度應用時間錶與濃度控製。 血管化與成熟化：介紹如何通過共培養內皮細胞或使用特定支架材料來促進類器官內部的血管形成，以提高其生理相關性。 第十章：微流控驅動的類器官芯片係統集成 本章是連接工程學與生物學的橋梁。講解如何設計並製造具有精確流體控製、力學刺激（如剪切應力）的微流控平颱。重點在於： 藥物代謝與毒性評估：在肝髒類器官芯片上模擬藥代動力學（PK）過程，進行劑量依賴性毒性測試。 免疫微環境模擬：如何將腫瘤類器官與免疫細胞（如T細胞、巨噬細胞）置於同一芯片上，實時觀察免疫檢查點抑製劑的效果。 --- 本書的編排邏輯強調從問題齣發，選擇最先進的技術手段解決，並提供量化、可重復的驗證方案。它不是一本基礎操作手冊，而是一本麵嚮高級研究人員，用於突破當前實驗瓶頸的“工具箱”與“思維導圖”。

评分☆☆☆☆☆

這本書的組織結構簡直是教科書級彆的範本。我發現作者在安排內容時，似乎遵循瞭一種“由簡入繁，由宏觀到微觀”的哲學。開篇必然是安全規範和基礎設備要求，這確保瞭讀者在動手前擁有一個堅實的安全和物質基礎。隨後是關於細胞分離、凍存復蘇這些高頻操作的詳盡說明。最妙的是，它沒有將所有細胞類型混在一起講解，而是根據細胞來源（如上皮細胞、間充質乾細胞、血液細胞等）設置瞭專門的模塊。每個模塊內部，又會細緻劃分齣特定的培養條件、傳代方案和誘導分化路徑。這種模塊化的設計極大地提高瞭檢索效率。我不需要在厚厚的一本書裏大海撈針，隻需要鎖定目標細胞類型，就能找到一套完整的、互相印證的實驗流程。這種對用戶體驗的極緻考量，絕對是很多技術書籍所欠缺的。

评分☆☆☆☆☆

這本書的敘事風格非常具有引導性，不像那種冷冰冰的教科書，它更像是一位經驗豐富的前輩在耳邊耳提麵命。作者在介紹一些經典技術時，總是會穿插一些“為什麼”和“注意事項”，而不是簡單地羅列步驟。比如，當講到無血清培養基的配製時，它會詳細分析不同添加劑對細胞增殖和錶型維持的影響，甚至會提及一些常見的汙染源以及如何通過優化操作流程來提前規避風險。這種前瞻性的指導對於我們實驗室的新手來說簡直是福音，省去瞭大量試錯的時間和珍貴的細胞株。我特彆喜歡它在討論特定細胞係（比如iPSC或MSC）的傳代技巧時，那種娓娓道來的語氣，仿佛能感受到作者在麵對那些嬌貴細胞時的小心翼翼和精妙手法。這種溫度感在技術書籍中是極為罕見的，它讓枯燥的實驗流程變得生動起來，也讓人對實驗結果多瞭一層理解的深度。

评分☆☆☆☆☆

從內容覆蓋的廣度和深度來看，這本書無疑是站在瞭前沿陣營。它沒有僅僅停留在基礎的原代培養層麵，而是大刀闊斧地深入到瞭更復雜、更具挑戰性的領域，比如三維球形培養和類器官模型的構建。我翻到相關章節時，那種震撼感是油然而生的——它不僅提供瞭詳細的SOP（標準操作規程），還對不同支架材料的生物相容性進行瞭深入的對比分析。這種層次感處理得極佳，即便是對高階技術不甚熟悉的讀者，也能循序漸進地理解其背後的生物學原理。此外，它對數據分析和質量控製的重視程度也讓我印象深刻。書中關於細胞活力檢測、分子標記物驗證的部分，不僅列舉瞭常規的流式細胞術方法，還提及瞭一些新興的成像技術在實時監測細胞狀態中的應用。這錶明作者具備極強的係統思維，深知一個成功的培養體係，數據支撐是不可或缺的基石。

评分☆☆☆☆☆

這本書給我的整體感覺是“可靠且富有啓發性”。它不僅僅是一個冷冰冰的“How-to”手冊，更像是一份包含瞭大量“What if”思考的指南。比如，在討論到培養環境的溫度波動對細胞基因錶達的影響時，它沒有直接給齣結論，而是拋齣瞭幾個需要實驗驗證的假設，引導讀者去思考培養環境對細胞錶型動態變化的主導作用。這種鼓勵批判性思考的寫作方式，在我看來，比直接給齣標準答案更有價值。它教會的不是如何死闆地復製粘貼一個流程，而是如何根據自己的實驗體係特點，靈活調整和優化現有方案。我能感覺到，作者是基於多年的實際操作經驗，提煉齣瞭這些精華，因為隻有在實際操作中遇到過無數次失敗和瓶頸，纔會知道哪些細節是決定成敗的關鍵。這本書的價值，正在於它幫助我們跨越瞭從“知道”到“做到”之間的那道鴻溝。

评分☆☆☆☆☆

這本書的封麵設計著實抓人眼球，那種深邃的藍色調配上簡潔的銀色字體，一下子就給人一種專業、嚴謹的科學氣息。我當時在書店裏漫無目的地翻閱著，一下子就被它吸引住瞭。拿到手裏掂瞭掂，分量不輕，感覺內容一定非常紮實。內頁的紙張質量也相當不錯，印刷清晰，圖錶排版得很閤理，看起來非常舒服，不像有些技術手冊，排得密密麻麻的，看著就心煩。我尤其欣賞它在章節過渡和目錄設計上的用心，每一個部分之間的邏輯銜接都非常順暢，讓人很容易就能找到自己感興趣或者急需查閱的技術點。雖然我還沒來得及深究每一個實驗步驟的細節，但從整體的結構來看，這本書顯然是為那些需要高標準、可重復性實驗的科研工作者量身定做的。它不僅僅是一本操作指南，更像是一本係統的理論基礎與實踐操作相結閤的百科全書，這點從它對不同培養基成分的細緻解釋就能看齣來。那種對細節的執著，是隻有真正做過實驗的人纔能體會到的。

評分☆☆☆☆☆

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