流式细胞术原理与科研应用简明手册

流式细胞术原理与科研应用简明手册 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2026

出版者:化学工业出版社
作者:瑞菲尔·努纳兹
出品人:
页数:104
译者:
出版时间:2005-8
价格:18.00元
装帧:简裝本
isbn号码:9787502569150
丛书系列:
图书标签:
  • 生物
  • 流式细胞术
  • 细胞分析
  • 免疫学
  • 生物技术
  • 科研方法
  • 实验指南
  • 医学实验
  • 生物医学
  • 细胞生物学
  • 实验室技术
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具体描述

本书为“生物实验室系列”图书之一。

流式细胞术是生命科学和医学研究中常用的对单个细胞或其他生物微粒进行快速定量分析与分选的高新技术。本书从实用角度出发,简洁地介绍了新型流式细胞仪的特点和常用数据分析方法,着重阐述了流式细胞术的最新应用进展。这些应用既包括细胞倍性分析和细胞周期测定等传统领域,还包括肿瘤细胞表面特征研究、免疫表型分析和树突状细胞功能确定等特殊应用,为初学者提供了简明的入门指南。更有价值的是本书详论了流式细胞术在艾滋病(AIDS)防治、精子定量及活性分析、寄生虫药物反应和细胞毒性研究等医学临床研究领域,以及基因转移效率和细胞毒性评价等生命科学前沿领域和临床前试验中的最新应用及其实例,极大地拓展了流式细胞术的应用领域,为熟练使用流式细胞仪的研究人员开拓新的研究方向提供了重要而实用的参考。

本书是从事细胞生物学、遗传学和分子生物学等生命科学及免疫学、血液学、寄生虫学、男科学、艾滋病防治和基因治疗等医学基础与临床研究的科研人员、实验技术人员和高校学生不可缺少的指导手册。

突破性的生物医学研究方法:现代显微成像技术在分子生物学中的前沿应用 本书简介 本书聚焦于现代显微成像技术在分子生物学和细胞生物学前沿研究中的突破性应用。它并非探讨流式细胞术,而是深入阐述一系列光学、电子与先进成像技术,如何以前所未有的分辨率和特异性揭示生命活动的微观机制。全书旨在为生物医学研究人员提供一套全面的、基于成像科学的工具箱,以应对当前生物学领域中最复杂的结构与功能解析挑战。 第一部分:超分辨显微成像的理论基石与技术革新 本部分从基础光学原理出发,系统梳理了从传统宽场显微镜到现代超分辨成像(Super-Resolution Microscopy, SRM)的演进历程。重点解析了突破衍射极限的关键技术,包括: 1. 荧光共振能量转移(FRET)与谱学成像: 详细介绍了FRET在蛋白质相互作用、膜内结构动态变化监测中的应用,并结合波长偏移分析(Spectral Shifting)技术,讨论如何利用不同荧光探针的空间接近性来量化分子事件。 2. 结构光照明显微镜(SIM)的优化与应用: 分析了SIM如何通过莫尔条纹重建实现分辨率的提升,并着重讨论了其在活细胞三维(3D)成像、低光毒性(Low Phototoxicity)下长时间动态观察中的优势,特别是针对神经元或快速分裂细胞的成像策略。 3. 基于单分子定位的超分辨技术(SMLM): 全面覆盖从STED(受激发射损耗)到PALM/STORM(光活化/随机光激发显微成像)的经典与新型技术。内容涵盖了如何通过精确控制荧光分子的开关状态来实现空间信息的采集与重构。特别对新型发色团(Fluorophores)的开发及其对成像速度和稳定性的影响进行了深入探讨。 4. 电子显微镜与光镜的集成(Correlative Light and Electron Microscopy, CLEM): 阐述了如何将高通量、功能性的光学成像信息与高分辨率的结构信息(如冷冻电镜或聚焦离子束电镜)进行完美配对。本书提供了一系列关于样本标记、配准算法(Registration Algorithms)以及数据融合的实践指南。 第二部分:活细胞动态成像与生物物理学测量 本部分将重点从“静态结构”转向“动态过程”的实时观测,强调物理参数的量化。 1. 活细胞成像环境控制与样本制备: 详细阐述了设计用于维持细胞生理状态的成像腔室、精确的温度/pH/气体控制系统,以及避免光漂白与光毒性的策略。重点讨论了新型水凝胶支架在三维培养模型中的应用。 2. 细胞器动力学与物质转运追踪: 涵盖了使用光漂白法(如FRAP,荧光恢复后漂白)和光劫持技术(Photokinesis)来测量膜蛋白的侧向扩散系数、细胞骨架的组装与解聚速率。引入了先进的粒子追踪算法,用于分析高密度或低对比度样本中的分子运动。 3. 膜电位与离子通道成像: 介绍了一系列基于电压敏感染料(Voltage-Sensitive Dyes)和基因编码电压指示器(GEVIs)的新型探针,用于实时监测细胞膜电位的细微变化,这对于神经科学和免疫学研究至关重要。讨论了如何通过计算成像方法消除背景噪声,以实现对单个离子通道开放事件的检测。 4. 活体/整体组织成像技术: 扩展至多光子显微镜(Multiphoton Microscopy)在深层组织成像中的应用。重点介绍了体内成像时如何应对散射和吸收问题,以及使用共聚焦拉曼成像技术对特定生化成分进行无标记(Label-free)分析的方法。 第三部分:数据处理、定量分析与人工智能辅助 随着成像数据量的爆炸式增长,数据处理和分析能力已成为衡量研究成果的关键因素。本部分专门探讨现代数据科学工具在处理复杂图像数据中的应用。 1. 图像去噪与增强算法: 详细分析了基于傅里叶变换、小波变换以及深度学习(如卷积神经网络 CNN)的图像重建算法,它们如何从低信噪比或低剂量采集的数据中恢复出高质量的结构信息。 2. 图像分割与三维重建的自动化流程: 介绍了如Ilastik、Imaris等专业软件的高级功能,并提供了自定义脚本(基于Python或MATLAB)来实现特定生物学标记的自动分割和定量分析。重点讨论了细胞形态学特征(如核仁、线粒体网络)的拓扑学分析方法。 3. AI在生物成像中的前沿应用: 探讨了使用生成对抗网络(GANs)进行图像超分辨率增强、使用深度学习模型对特定细胞事件(如凋亡、吞噬作用)进行实时分类和预测,以及利用机器学习优化显微镜参数以提高成像效率的实践案例。 4. 数据的可视化与报告标准: 提供了将复杂三维定量数据转化为清晰、信息丰富图表的最佳实践,并强调了在科学出版物中报告成像参数和数据分析方法的透明度与可重复性要求。 目标读者 本书面向生命科学、生物工程、生物物理学、医学影像学等领域的博士研究生、博士后研究人员、高校教师及工业界研发人员。它假定读者具备基础的分子生物学知识和显微镜操作经验,但致力于将他们的成像技术水平提升至当前科研前沿。通过阅读本书,读者将能根据具体研究问题,选择并掌握最合适的先进显微成像技术,实现对生命系统更深入、更精确的理解。

作者简介

目录信息

第一章 流式细胞术对医学生物学的重要性及入门
一、什么是流式细胞术?流式细胞术有什么重要性?
二、流式细胞仪是怎样工作的?
参考文献
第二章 流式细胞仪概述
一、FACSCaliburTM
二、BD LSR
三、细胞分选仪器的特点和应用范围
四、Beckman Coulter
五、MOFlo○R细胞仪
六、非商业生产的流式细胞计数器
七、PartecTMFlow Cytometers(CyFlow○R和PAS○R)
第三章 流式细胞仪的数据分析:CellQuest 软件
一、设门
二、直方图与可信区间的设定
三、散点图
四、轮廓图和密度图
五、数据分析的其他软件:FlowJoTM/ WinMDiTM
参考文献
第四章 DNA分析: DNA定量与细胞周期分析
一、细胞DNA含量的流式细胞分析
二、细胞周期分析
三、DNA含量分析
四、典型的细胞周期分析的实例
参考文献
第五章 分子细胞计量术
一、用于细胞显微操作的流式细胞术/细胞分选
二、FISH(荧光原位杂交)细胞计量
三、分子细胞计量术中的PCR和实时PCR
四、图像及共聚焦显微镜分析
参考文献
第六章 应用多色分析法进行表面染色和免疫表型分型
一、白血病和淋巴瘤样品的免疫表型分型
二、表面分析和免疫表型分型的其他应用
参考文献
第七章 样品处理:生物安全染色
第八章 细胞内抗原、细胞因子及病毒抗原的研究
第九章 流式细胞仪评估精子质量和细胞周期分析
参考文献
第十章 用流式细胞仪检测利什曼原虫前鞭毛体对别嘌呤醇的易感性
参考文献
第十一章 流式细胞术检测HSV扩增子载体的转导效率和细胞毒性
一、转导效率
二、载体细胞毒性作用
参考文献
第十二章 流式细胞术检测树突状细胞的免疫表型及功能性研究
一、用流式细胞术评价人树突状细胞的表面标志
二、其他流式细胞分析技术对人树突状细胞和人树突状细胞系的研究
三、用流式细胞术评价DC细胞标志和其他功能研究
四、用流式细胞术检测树突状细胞免疫表型
五、流式细胞分析技术测定DC摄取的抗原
六、用流式细胞术评价细胞因子调节的树突状细胞****
七、用CDSE染色后检测树突状细胞的增殖
八、用流式细胞术评价体外细胞毒性实验
九、用流式细胞术评价体内细胞毒性实验
参考文献
第十三章 总结
第十四章 操作指南
一、蛋白质的荧光素标记
二、藻红蛋白结合法操作流程
三、多聚甲醛溶液的制备
四、用流式细胞仪在全血中检测白细胞表面抗原
参考文献
附录一 网络上有关流式细胞仪的商业资源
附录二 流式细胞术中的缩略语
索引
· · · · · · (收起)

读后感

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用户评价

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这本关于流式细胞术的“简明手册”,虽然名字听起来像是一本入门读物,但实际阅读体验远超预期。它并非那种堆砌晦涩术语的教科书,而是更像一位资深实验室导师的亲切指导。作者在讲解复杂概念时,总能找到那个恰到好处的比喻,让初学者也能迅速抓住核心。比如,书中对细胞分群的描述,就像是带领读者在城市的街道上寻找特定的建筑,每一步都清晰明确,没有丝毫含糊。尤其是在优化实验方案的部分,它强调了“流程重于参数”的理念,这一点在实际操作中至关重要,很多时候实验失败不是因为试剂问题,而是流程上的微小疏忽。这种注重实践操作的深度剖析,使得这本书不仅是一本理论参考,更像是一本“避坑指南”。它把流式细胞术从一个高高在上的技术,拉回到了日常科研的跑道上,让读者感到触手可及。

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这本书的语言风格,如果用一个词来形容,那就是“精准的克制”。它避免了华丽的辞藻,直击科学内核,但这种简洁背后蕴含着深厚的功力。阅读过程中,我多次停下来,反复琢磨作者对某个关键概念的定义,发现其措辞之精炼,几乎可以作为教科书的标准表述。更值得称赞的是,书中对不同应用场景的案例分析。例如,在免疫学研究中如何利用多参数流式筛选T细胞亚群,以及在血液病诊断中如何快速识别异常细胞群。这些案例不仅仅是展示技术,更像是提供了一个完整的“问题-方法-结论”的微型研究报告。这对于正在构思自己课题的学生或者青年研究员来说,提供了极佳的范本和启发,它展示了流式技术在解决真实世界问题中的强大能力。

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阅读这本书的过程,简直像是一场精心策划的学术探索之旅。作者的叙事节奏感极强,时而娓娓道来,细致解析技术的演进历史,让你感叹科学的迭代之快;时而又陡然提速,直击当前科研前沿的热点技术,比如空间流式或者多参数整合分析。这种张弛有度的写作风格,使得阅读体验非常舒畅,不会产生阅读技术手册时常见的疲劳感。最让我印象深刻的是,书中对数据分析的深入探讨,它不仅仅停留在软件操作层面,而是深入挖掘了统计学原理在细胞群体鉴定中的应用。不同于其他书籍只是简单罗列软件功能,这本书教会我如何“质疑”数据,如何识别伪阳性或伪阴性结果。这对于需要进行高水平研究的科研人员来说,是极其宝贵的财富,它提升了我们对实验结果的批判性思维,而非盲目接受。

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老实说,我抱着极大的怀疑打开这本书,因为市面上标榜“简明”的专业书籍,十有八九是内容贫乏的。然而,这本书彻底颠覆了我的看法。它在保持专业深度的同时,巧妙地避开了不必要的冗余信息。内容编排的逻辑性达到了一个极高的水准,从基础的荧光原理到复杂的细胞周期分析,层层递进,结构严谨得像一座精密的仪器。我尤其欣赏它对“实验设计伦理”的提及,这在纯粹的技术手册中是罕见的。作者强调了高质量对照组设置的重要性,甚至探讨了如何根据预算和研究目标来权衡使用哪种级别的仪器和试剂。这体现了一种成熟的、面向实际科研需求的价值观,教会读者如何做“聪明的科研”,而不是“昂贵的实验”。这种务实的态度,让这本书的价值远超其定价。

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这本书给我的感觉,更像是一份高水平的“工具箱”,而非单纯的“说明书”。它并没有试图去涵盖流式细胞术的每一个细枝末节,而是专注于提炼出那些支撑整个技术体系的基石和创新点。例如,它对不同激光波长和滤光片组合的解析,不是简单地罗列参数表,而是从物理学角度解释了为何某些组合是最优解,这对于理解仪器的“黑箱”操作至关重要。此外,书中对质量控制(QC)流程的描述详尽而实用,它提供了一套可以立即投入使用的、可量化的QC标准。很多手册往往对QC一带而过,但这本手册却将其提升到了与实验设计同等重要的地位。总而言之,这本书在保持简明的同时,实现了极高的信息密度和极强的实战指导性,是每个接触流式细胞术的人案头必备的参考书。

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外国人写的东西,很本质,不过实用性就差些了。

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