第一章 顯微技術
第一節 顯微鏡的種類、特點和使用
一、明視野光學顯微鏡
〔實驗1－1〕明視野顯微鏡的使用
二、其他光學顯微鏡
〔實驗1－2〕暗視野顯微鏡的使用
〔實驗1－3〕相差顯微鏡的使用
〔實驗1－4］熒光顯微鏡的使用
三、電子顯微鏡
〔實驗1－5］質粒DNA的透射電鏡觀察
〔實驗1－6〕酵母細胞的掃描電鏡觀察
第二節顯微攝影
［實驗1－7］顯微攝影菌落攝影和凝肢攝影
第三節放射自顯影
實驗1－8］硝酸縴維素濾紙上標記DNA的放射自顯影
第二章 工業微生物基本形態及觀察
第一節 細菌
［實驗2－1］細菌形態的觀察
第二節 放綫菌
〔實驗2－2］放綫菌的形態觀察
第三節 噬菌體
［實驗2－3〕噬菌體的分離與純化
〔實驗2－4］高效價噬菌體原液的製備
〔實驗2－5］溶源菌的鑒定
第四節 酵母菌
〔實驗2－6］酵母菌細胞形態觀察
〔實驗2－7］酵母菌巨大菌落觀察
第五節 小型絲狀真菌（黴菌）
一、藻狀菌（主要指根黴、毛黴）
〔實驗2－3］根黴毛黴的形態觀察
二、麯黴
三、青黴
〔實驗2－9］青黴麯黴的形態觀察
四、其他黴菌
第六節 食用真菌
〔實驗2－10］平菇的瓶栽
第三章 工業微生物細胞一般結構與特殊結構的觀察
第一節 染色技術
一、染色的基本原理
二、染料
三、染色種類
〔實驗3－1〕革蘭氏鑒彆染色法
〔實驗3－2］活體染色法
〔實驗3－3］單染色法
〔實驗3－4］假絲酵母負染色法
〔實驗3－5］枯草芽孢杆菌的抗酸性染色
〔實驗3－6］真菌的熒光染色與觀察
第二節 細胞各部結構成分的分離與觀察
〔實驗3－7］革蘭氏陽性細菌細胞壁的製備
〔實驗3－8］酵母細胞壁甘露聚糖的製備
〔實驗3－9］細胞壁的形態觀察
〔實驗3－10］革蘭氏陰性菌細胞外膜蛋白的分離
〔實驗3－11〕細胞莢膜的觀察
〔實驗3－12〕細菌鞭毛的觀察
〔實驗3－13〕微生物細胞核的觀察
［實驗3－14〕細菌染色體DNA的分離與觀察
〔實驗3－15〕異染顆粒的觀察・
〔實驗3－16］酵母細胞內脂肪顆粒和肝糖顆粒的觀察
〔實驗3－17］酵母液泡及綫粒體的提取
第三節 芽孢、子囊孢子和假菌絲的觀察
一、芽孢
〔實驗3－18〕細菌芽孢形成及發芽的觀察
二、酵母子囊孢子
〔實驗3－19〕酵母子囊孢子的形成及觀察
三、酵母假菌絲
〔實驗3－20〕酵母假菌絲的觀察
第四章 工業微生物純培養技術
第一節 消毒與滅菌
一、熱殺菌
二、化學消毒劑
三、紫外綫和射綫
四、接種室的空氣滅菌
五、過濾除菌
〔實驗4－1〕微孔濾膜濾器的使用
六、防黴劑
〔實驗4－2〕防黴劑的選用
第二節 培養基及其製備
一、培養基
二、培養基成分的說明
〔實驗4－3］麥芽汁培養基的配製
第三節 分離、接種和培養技術
一、分離
［實驗4－4］試管傾倒培養皿分離法
［實驗4－5］平皿劃綫分離法
［實驗4－6］稀釋分離平皿菌落計數
二、顯微操作技術用於單細胞分離
〔實驗4－7〕顯微操縱器用於單細胞分離
〔實驗4－8］顯微操縱器用於酵母子囊的解剖及子囊孢子孢化
三、接種
〔實驗4－9］接種技術
四、搖瓶與發酵
〔實驗4－10］搖瓶發酵生産檸檬酸
〔實驗4－11〕小型連續發酵實驗
［實驗4－12］釀酒酵母的同步培養
〔實驗4－13〕厭氧罐分離培養厭氧微生物
第五章 培養條件對工業微生物生長與發酵的影響
第一節 溫度
〔實驗5－1〕酵母營養細胞緻死時間的測定
第二節 水活度與滲透壓
〔實驗5－2］培養基中糖和鹽濃度對微生物生長的影響
第三節 氧氣和氧化還原電位
〔實驗5－3］微生物生長對氧的要求
〔實驗5－4〕培養液氧化還原值（rH）的測定
第四節 酸堿度
〔實驗5－5］pH對微生物的影響
第五節 重金屬和一些化閤物對微生物的抑製作用
〔實驗5－6］濾紙片法測定重金屬對微生物的影響
〔實驗5－7］消毒劑殺菌力的測定
第六節 錶麵張力
〔實驗5－8〕錶麵張力對微生物的影響
第七節 極端環境因素對微生物的影響
第六章 工業微生物的生理與發酵試驗
第一節 微生物對碳源的利用
〔實驗6－1］細菌對糖、醇及糖苷的利用
〔實驗6－2］酵母對糖類的發酵
第二節 微生物對氮源的利用
〔實驗6－3］細菌對硝酸鹽的還原作用
［實驗6－4］酵母對氮素源的利用
第三節 細菌簽定中的某些特殊生理實驗
〔實驗6－5］澱粉水解
〔實驗6－6］V－P試驗
〔實驗6－7］硫化氫的生成
〔實驗6－8〕吲哚試驗
〔實驗6－9］過氧化氫酶的産生
〔實驗6－10〕明膠液化試驗
〔實驗6－11〕石蕊牛乳試驗
〔實驗6－12〕甲基紅試驗（M－R）
［實驗6－13〕乙醇的氧化
〔實驗6－14〕乙酸的氧化
〔實驗6－15〕脲酶的測定
第四節 常用細菌的分離和檢測
［實驗6－16］枯草杆菌
〔實驗6－17〕醋酸細菌
〔實驗6－18〕乳酸菌
［實驗6－19〕德氏乳酸杆菌
〔實驗6－20〕丙酸細菌
［實驗6－21〕丁酸細菌
第五節 酵母應用特性的測定
〔實驗6－22〕酵母發酵力的測定
〔實驗6－23〕壓榨酵母發酵力的測定
［實驗6－24〕麵包酵母發麵力的測定
〔實驗6－25〕酵母忍耐酒精濃度的測定
〔實驗6－26］酵母抵抗防腐劑能力的測定
［實驗6－27〕啤酒酵母凝絮力的測定
〔實驗6－28〕啤酒酵母産生雙乙酰的測定
第六節 發酵製品的試驗
〔實驗6－29〕細菌液化型澱粉酶的發酵及活力測定
附：液化型澱粉酶活力的測定方法（部頒標準）
［實驗6－30〕麯黴的葡萄糖澱粉酶生成和活力測定
附：糖化型澱粉酶活力的測定方法（部頒標準）
〔實驗6－31〕米麯黴的蛋白酶生成及活力測定
附：蛋白酶活力的測定方法〔部頒標準〕
〔實驗6－32〕縴維素酶的發酵及其活力測定
〔實驗6－33〕乳酸發酵及測定
附：乳酸的比色測定法
〔實驗6－34〕乳酸菌飲料
〔實驗6－35〕葡萄酒飲料
〔實驗6－36〕發酵法釀製食醋
第七章 發酵過程及發酵食品中微生物的檢測
第一節 微生物生長、大小和數量的檢測方法
一、細胞質量測定
二、細胞菌數測定法
〔實驗7－1〕酵母細胞數的測定
〔實驗7－2］酵母細胞大小的測定
〔實驗7－3］細菌增殖麯綫的測定
〔實驗蔔4］絲狀真菌生長速率的測定
第二節 發酵和食品工業中常見的微生物種類及其概測
一、發酵和食品工業中常見微生物的種類
二、發酵和食品工業中常見微生物類屬檢索錶
三、發酵和食品工業中常見微生物類彆的概測
第三節 發酵和食品工業用水和發酵過程微生物數量
的檢測
一、發酵和食品工業用水微生物數量的測定
〔實驗7－5］水中細菌數的測定
〔實驗7－6］水中大腸菌群數量的測定
〔實驗7－7〕水中大腸杆菌數量的測定
［實驗7－8］大腸杆菌的簡易檢齣法
二、酒醅中微生物總數測定
［實驗7－9］酒醅中微生物數量的測定
［實驗7－10〕固態發酵水漿厭氧微生物的分離
第四節 培養皿或試管中菌落總數的確定
第五節 免疫學技術
一、免疫學中的基本概念及原理
二、抗體的製備
〔實驗7－11〕乳化抗原的製備
〔實驗7－12〕動物的免疫
〔實驗7－13〕兔抗血清的收集
〔實驗7－14〕雜交瘤與單剋隆抗體的製備
三、抗體的純化及標記
〔實驗7－15］抗血清中lgG抗體的純化
〔實驗7－16〕辣根過氧化物酶（HRP）標記抗體IgG的製
〔實驗7－17〕熒光抗體的製備
四、凝集反應
〔實驗7－18］玻片凝集試驗
〔實驗7－19〕試管凝集試驗
〔實驗7－20〕反嚮間接血凝試驗
五、沉澱反應
〔實驗7－21〕單相免疫擴散法
〔實驗7－22〕雙相免疫擴散法
六、酶聯免疫吸附技術
〔實驗7－23〕夾心ELISA
七、免疫熒光試驗
〔實驗7－24〕間接免疫熒光試驗
八、免疫膠體金技術
［實驗7－25］免疫膠體金試驗
九、免疫轉移電泳
〔實驗7－26〕免疫轉移電泳法
第六節 分子生物學技術
一、GC含量測定
〔實驗7－27〕熱變性溫度法測定GC含量
二、聚丙烯酰胺凝膠電泳技術
〔實驗7－28〕SDS－PAGE
〔實驗7－29〕聚丙烯酰胺凝膠的等電聚焦電泳
三、色譜技術
〔實驗7－30〕離子交換色譜技術
〔實驗7－31〕凝膠過濾色譜技術
［實驗7－32〕Sepharose4B溴化氰偶聯技術
［實驗蔔33〕Sephadex過碘酸鈉偶聯技術
［實驗7－34〕親和色譜技術
四、核酸分子雜交技術
（一）同位素標記探針的製備
〔實驗7－35〕缺口平移法製備DNA探針
〔實驗7－36〕隨機引物標記法
〔實驗7－37］RNA探針的製備
（二）非同位素標記核酸探針的製備
〔實驗7－38〕Dig－核酸探針的製備
〔實驗7－39〕光敏生物素標記核酸探針的製備
（三）待檢樣固相化
〔實驗7－40〕凝膠中DNA轉移至硝酸縴維膜（Southern
blOt）
〔實驗7－41〕菌落原位雜交
（四）硝酸縴維膜上DNA原位雜交
〔實驗7－42〕放射性同位素標記核酸探針的雜交
〔實驗7－43〕地高辛標記核酸探針的雜交及顯色
〔實驗7－44〕生物素標記核酸探針的雜交及顯色
五、聚閤酶鏈反應技術（PCR）
〔實驗7－45〕PCR技術
第七節 沙門氏菌和誌賀氏菌的檢測
〔實驗7－46〕沙門氏菌和誌賀氏菌的檢驗
第八章 選種和育種
第一節 工業菌種篩選程序
一、采樣
二、增殖培養
三、培養分離
四、篩選
五、毒性試驗
第二節 培養分離
一、自然界中細菌的分離
（一）采樣和采集方法
（二）生態學參數及培養基的組成原則
（三）分離培養基及試液
（四）土中細菌的分離
〔實驗8－1〕土中細菌的直接分離
〔實驗8－2］土中細菌的富集培養與分離
（五）植物體上細菌的分離
〔實驗8－3］植物體上細菌的直接分離
〔實驗8－4］植物體上細菌的富集培養及分離
（六）水中細菌的分離
〔實驗8－5］水中細菌的直接分離
〔實驗8－6］水中細菌的濾膜壓印分離法
（七）次代培養及純化
二、放綫菌的分離
（一）采樣及采集方法
（二）生態學參數和培養基的組成原則
（三）放綫菌分離培養基及試液
（四）土樣中放綫菌的分離
〔實驗8－7］土樣中放綫菌的非選擇性分離
（五）植物及植物材料上放綫菌的分離
〔實驗8－8］植物體上放綫菌的分離
（六）植物體上放綫菌分離的餌誘法
〔實驗8－9］餌誘法分離植物體上的放綫菌
（七）水中放綫菌的分離
（八）次代培養及純化
三、真菌分離
（一）采樣及采集方法
（二）生態學參數及培養基組成原則
（三）真菌培養分離常用培養基及試液
（四）土中真菌的分離
〔實驗8－10］土樣中真菌的壓貼分離
（五）植物材料中真菌的分離
（六）水中真菌的分離
（七）從子實體直接分離培養擔子菌
〔實驗8－11〕擔子菌組織分離法
〔實驗8－12］擔子菌孢子分離
（八）植物組織中擔子菌的分離
（九）次代培養及純化
四、目標菌株的分離、篩選及毒性試驗
〔實驗8－13］利用堿法紙漿廢液的微生物的分離
〔實驗8－14〕葡萄酒酵母的篩選
〔實驗8－15〕生産選種
〔實驗8－16〕發酵廢液COD測定
第三節 工業菌種的育種方針
第四節 富集培養技術在育種中的應用
一、去調節突變株的富集
二、營養缺陷型的富集
三、富集法在研究次級代謝的重組DNA技術中的應用
第五節 誘變育種
一、誘變劑和誘變處理
二、誘變育種步驟
〔實驗8－17〕紫外綫的誘變育種
〔實驗8－18］亞硝基胍誘變麯黴菌（黑麯黴、米麯黴）
〔實驗8－19〕鏈黴菌菌絲體的誘變育種
第六節 營養缺陷型的選育
一、誘變方法
二、淘汰野生型
三、檢齣缺陷型
四、營養缺陷型生長譜的確定
〔實驗8－20〕大腸杆菌營養缺陷型的篩選
〔實驗8－21〕酵母營養缺陷型的篩選
〔實驗8－22〕青黴菌營養缺陷型菌株的篩選
第七節 呼吸缺陷型及代謝調節突變株的篩選
〔實驗8－23〕酵母呼吸缺陷型的篩選
〔實驗8－24〕氨基酸抗反饋調節突變株的選育
第八節 抗噬菌體菌株的選育
〔實驗8－25〕抗噬菌體産α-澱粉酶菌株的選育
第九節 基因育種
一、質粒的提取與純化
〔實驗8－26〕大腸杆菌質粒DNA的提取
〔實驗8－27〕鏈黴菌質粒DNA的分離與純化
二、染色體DNA的提純
〔實驗8－28〕鏈黴菌染色體DNA的分離與純化
［實驗8－29〕釀酒酵母染色體DNA的提取
三、DNA和RNA的定量測定
〔實驗8－30〕DNA的定量測定
四、遺傳轉化
〔實驗8－31］質粒DNA轉化感受態大腸杆菌
〔實驗8－32〕質粒DNA轉化啤酒酵母
五、DNA的瓊脂糖凝膠電泳
〔實驗8－33〕質粒DNA的瓊脂糖凝膠電泳
六、DNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳
〔實驗8－34〕DNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳
〔實驗8－35〕從凝膠中迴收純化DNA片段
七、雜交育種
（一）細菌雜交
〔實驗8－36〕細菌的接閤
（二）酵母雜交育種技術
〔實驗8－37〕酵母單倍體的分離與鑒定
〔實驗8－33］罕見交配法轉移酵母殺傷質粒
第十節 原生質體育種
一、原生質體融閤育種的特點
二、原生質體融閤育種步驟
三、原生質體融閤育種的要點
四、原生質體轉化
五、原生質體再生率和融閤率計算
〔實驗8－39〕芽孢杆菌的原生質體融閤
〔實驗8－40〕鏈黴菌屬原生質體融閤
〔實驗8－41〕小單胞菌的原生質體融閤
〔實驗8－42］酵母的原生質體融閤
〔實驗8－43］絲狀真菌的原生質體融閤
〔實驗8－44］芽孢杆菌屬間原生質體轉化
〔實驗8－45］質粒DNA轉化鏈黴菌原生質體
〔實驗8－46］真菌原生質體轉化
六、原生質體技術中的一些特殊技術
（一）供體原生質體的熱滅活
（二）供體原生質體的紫外滅活
（三）遺傳轉移
〔實驗8－47〕原生質體融閤法轉移酵母綫粒體及殺傷質粒
（四）原生質體誘變育種
〔實驗8－48〕紫外綫誘變原生質體選育蘇氨酸高産菌
（五）原生質體電融閤技術
〔實驗8－49〕電誘導酵母原生質體融閤
第十一節 基因工程技術用於工業菌種改良
〔實驗8－50〕耐熱α－澱粉酶基因的剋隆和錶達
第九章 工業微生物菌種保藏技術
第一節 冷凍保藏
一、普通冷凍保藏技術
二、超低溫冷凍保藏技術
三、液氮冷凍保藏技術
〔實驗9－1］快速沙土管保藏法
第二節 凍乾保藏
〔實驗9－2］菌種冷凍乾燥保藏
第三節 其他保藏方法
一、傳代保藏
二、礦物油中浸沒保藏
〔實驗9－3］液體石蠟保藏菌種
三、乾燥－載體保藏
第四節 基因工程菌的保藏
第五節 微生物活力和穩定性測定
第六節 常用菌種保藏培養基
第七節 菌種保藏機構
第十章 微生物細胞固定化方法
第一節 載體結閤法
第二節 交聯法
第三節 包埋法
一、藻酸鈣凝膠包埋法
［實驗10－1〕釀酒酵母的藻酸鈣固定化
二、k－角叉膠包埋法
〔實驗10－2］一步法k－角叉膠細胞固定化
〔實驗10－3〕二步法k－角叉膠細胞固定化
〔實驗10－4〕固定化細胞的迴收與活細胞計數
三、聚丙烯酰胺凝膠包埋法
〔實驗10－5］大腸杆菌的聚丙烯酰胺凝膠固定化
四、光交聯樹脂前聚體包埋法
〔實驗10－6］光交聯樹脂固定化原生質體
五、其他包埋方法
（一）膠原包埋法
（二）縴維素包埋法
第四節 其他固定化方法
第五節 固定化微生物細胞的應用
一、L－氨基酸生産
二、抗生素生産
三、有機酸生産
四、醇類生産
五、固定化細胞釀造啤酒
六、食醋釀製
〔實驗10－7］固定化酵母連續生産酒精
〔實驗10－8］固定化枯草杆菌連續生産耐熱α-澱粉酶
第十一章 酶固定化技術
第一節 概述
第二節 吸附法
一、幾丁載體上酶的吸附固定
〔實驗11－1］吸附法幾個固定化酶的製備
二、疏水吸附法
〔實驗11－2〕疏水吸附法固定化酶的製備
三、親和吸附法
〔實驗11－3〕親和吸附法固定L－維生素C氧化酶
〔實驗11－4〕親和吸附交聯法固定蔗糖酶
〔實驗11－5〕葡萄糖氧化酶的免疫固定化
四、過渡金屬介導法
〔實驗11－6〕過渡金屬介導葡萄糖澱粉酶固定於控孔玻璃
〔實驗11－7〕過渡金屬介導葡糖澱粉酶固定化改良法
第三節 包埋法
一、凝膠聚閤包埋法
二、輻射聚閤包埋法
〔實驗11－8］輻射共聚閤包埋法固定葡糖澱粉酶
三、酶蛋白共聚閤包埋法
〔實驗11－9〕酰化共聚閤包埋法固定α－糜蛋白酶
四、交聯多聚物凝膠包埋法
〔實驗11－－10］明膠交聯包埋法
〔實驗11－11〕明膠交聯法製備固定化雙酶膜
〔實驗11－12〕聚乙烯醇交聯包埋法
〔實驗11－13〕脫乙酰幾丁質交聯包埋法
五、移植共聚閤包埋法
〔實驗11－14］移植共聚閤包埋法
六、物理定位法
第四節 共價交聯法
一、溴化氰交聯法
〔實驗11－1－5］溴化氰交聯滴定法
〔實驗11－16］三乙烯胺－澳化氰活化法
〔實驗11－17］溴化氰活化法製備可溶性載體固定化酶
二、碳化二亞胺法
〔實驗11－18］碳化二亞胺二步法固定巰基氧化酶
三、戊二醛交聯法
〔實驗11－19］戊二醛交聯固定化葡萄糖氧化酶
四、交鏈聚乙烯亞胺法
〔實驗11－20］PEI裱塗載體的製備及用於酶固定化
五、活性載體法
第十二章 工業微生物實驗室的設計和實驗數據處理
第一節 工業微生物實驗室範圍與基本要求
第二節 實驗室的儀器設備
第三節 實驗室大小及布局
第四節 實驗數據處理
一、顯著性檢驗法
二、迴歸分析法
三方差分析
四、正交試驗法
五、實驗數據處理常用錶格
第十三章工業微生物實驗室常見的一些單元操作技術
第一節 攪拌和振蕩
第二節 氣體的計量和導入
第三節 加熱和冷卻
第四節 減壓操作
第五節 乾燥
第六節 過濾和離心
第七節 簡單蒸餾
第八節 紙層析
第九節 薄層層析
第十節 溶液的脫色
第十一節 密度的測定
第十二節 摺光率
第十三節 比鏇光度
第十四節 矽化
第十五節 透析袋的準備
第十六節 天平的使用與維護
第十七節 分光光度計波長的校正
附錄
一、實驗室安全及防護知識
二、實驗室常識
三玻璃器皿的洗滌及各種洗液的配製
四、緩衝液
五、一些有機物質的性質
六、指示劑
七、冷卻劑和吸水劑
八、硫酸銨飽和度的常用錶
九、試劑的配製及一些常用數據錶
本書使用的英文縮寫
主要參考資料
· · · · · · (
收起)
