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出版者:东南大学出版社

作者:邵义祥 编

出品人:

页数:389

译者:

出版时间:2003-12

价格:34.00元

装帧:

isbn号码:9787810894050

丛书系列:

图书标签:

• 医学实验动物学
• 实验动物
• 动物模型
• 实验技术
• 医学研究
• 动物福利
• 伦理学
• 实验室动物
• 生物医学
• 动物实验

《现代生物医学研究方法与技术》 书籍简介 本书旨在为生物医学领域的科研人员、研究生以及相关专业人员提供一本全面、系统、深入的实验方法与技术手册。在当前生命科学飞速发展的时代，掌握扎实的实验技能和前沿的技术应用是推动科研进步的关键。本书跳出了传统学科分类的局限，聚焦于现代生物医学研究中最为核心和通用的技术平台和操作规范，致力于构建一个实用性强、涵盖面广的研究技术知识体系。 第一部分：分子生物学基础技术平台 本部分深入探讨了分子生物学领域的基础与前沿技术，这些技术构成了现代生物医学研究的基石。 1. 核酸提取与纯化： 详细阐述了从不同生物样本（血液、组织、细胞、微生物等）中高效、高纯度提取基因组DNA、质粒DNA、总RNA和特定RNA亚型（如miRNA）的经典方法和新型技术。重点对比了酚氯仿抽提法、硅胶柱离心法、磁珠法在效率、成本和适用性上的差异，并针对临床样本的特殊性提供了优化方案。 2. 聚合酶链式反应（PCR）及其衍生技术： 全面覆盖了标准PCR、定量实时荧光PCR（qPCR）的原理、仪器设置、引物设计原则、反应体系优化。同时，深入讲解了反转录PCR（RT-PCR）、数字PCR（dPCR）在绝对定量和罕见序列检测中的应用。 3. 基因克隆与测序技术： 详述了从片段获取、载体选择、连接（酶切连接、Gibson Assembly、TA克隆等）到转化和阳性筛选的全流程。在测序方面，本书详细介绍了Sanger测序的原理与应用，并对新一代测序技术（NGS）的文库制备、测序平台（Illumina, PacBio, Oxford Nanopore）及其在全基因组测序、外显子组测序、转录组测序中的具体操作流程和数据解读基础进行了系统梳理。 4. 蛋白质分析核心技术： 涵盖了蛋白质提取、定量（BCA, Bradford法）、分离纯化（亲和层析、离子交换层析）。重点解析了凝胶电泳（SDS-PAGE）、蛋白质印迹法（Western Blot）的细节控制，包括抗体选择、封闭液配制、显影条件优化。对于蛋白质组学研究，本书介绍了二维凝胶电泳（2D-PAGE）和基于质谱的蛋白质组学（Shotgun Proteomics）的样品制备流程。 第二部分：细胞生物学与组织学技术 本部分聚焦于活细胞和组织样本的培养、处理及功能分析技术，是理解生命活动和疾病机制的关键。 1. 细胞培养与无菌操作： 详细讲解了原代细胞、永生化细胞系、干细胞（ES/iPS细胞）的培养基配制、传代、冻存与复苏的最佳实践。强调了生物安全柜的使用规范、无菌技术的重要性以及污染的识别与处理。 2. 细胞功能性分析： 涵盖了细胞增殖（MTT, CCK-8, EdU标记）、凋亡（Annexin V/PI双染流式分析、Caspase活性测定）、迁移和侵袭（Transwell实验）等关键功能实验的设计与实施。对流式细胞术（FACS）的基本原理、仪器操作和数据分析进行了专门论述。 3. 组织学与免疫组化（IHC/ICC）： 详细指导了组织固定、包埋、石蜡切片（或冰冻切片）的制作流程。重点解析了IHC实验中抗原修复的原理和方法选择（热修复、酶修复），一抗/二抗的孵育条件，以及显色系统的选择与优化，旨在获得清晰、特异的信号。 4. 活细胞成像技术： 介绍了荧光显微镜、共聚焦显微镜（Confocal Microscopy）的基本原理。特别强调了延时成像（Time-lapse Imaging）在观察细胞动态变化中的应用，以及荧光漂白恢复（FRAP）等技术在分子动力学研究中的部署。 第三部分：动物模型构建与体内研究方法 针对转化医学和疾病机制研究的需要，本部分系统介绍了体内实验的设计、操作与伦理规范。 1. 标准实验动物管理与伦理： 阐述了实验动物福利与伦理审查的重要性，详细说明了不同等级屏障系统（IVC/OB/SPF）的管理要求，以及动物福利评估体系。 2. 疾病模型构建技术： 全面介绍了化学诱导模型（如糖尿病、炎症模型）、手术干预模型（如缺血再灌注模型）的标准化操作流程。重点详述了基因工程动物（转基因、基因敲除/敲入、条件性敲除）的构建策略和验证方法。 3. 体内给药与样本采集： 规范了不同给药途径（静脉、腹腔、皮下、口服）的剂量计算和操作技术。详细指导了高质量血液、尿液、脑脊液、组织匀浆等生物样本的规范化采集、处理和保存流程，确保后续分析的准确性。 4. 生物安全性与生物标志物检测： 涉及实验过程中生物样本的生物安全性处理规范。在生物标志物检测方面，重点介绍了ELISA（酶联免疫吸附试验）在定量检测体内蛋白、细胞因子水平中的优化与应用。 第四部分：生物信息学基础与数据分析入门 鉴于大数据在现代科研中的地位，本部分提供了面向实验科研人员的生物信息学基础工具入门。 1. 实验数据管理与质量控制： 强调了原始数据的规范化存储、备份策略。介绍了常见的Excel/GraphPad Prism在基础统计分析（t检验、ANOVA、生存分析）中的应用。 2. 基因组与转录组数据初步分析： 简要介绍了SRA/GEO数据库的结构，指导读者如何检索和下载公开数据。以RNA-seq数据为例，初步讲解了差异表达基因（DEG）的筛选流程、热图（Heatmap）和火山图（Volcano Plot）的解读，以及通路富集分析（KEGG/GO）的基本概念。 全书特色： 本书注重“操作性”与“可重复性”，每一个技术章节均包含“关键步骤”、“常见问题与对策”、“质量控制点”三个模块，旨在帮助读者规避实验中的常见陷阱，确保研究结果的可靠性。内容紧跟国际前沿，同时兼顾国内实验室的实际操作环境和资源配置，是一本不可多得的生物医学实验技术实用参考书。

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**评价四：跨学科视野的融合度探讨** 当代生物医学研究越来越强调多学科交叉融合，一本优秀的教程应当能够体现出这种趋势。遗憾的是，这本书的视角似乎还停留在传统的动物饲养和管理阶段。例如，在探讨“模型评价”时，对于如何运用现代影像学技术（如Micro-CT或PET成像）来实时、无损地监测体内病理变化这一前沿方法，几乎没有提及。又或者，在讨论特定疾病模型（如肿瘤模型）时，这本书鲜有关于肿瘤微环境分析、免疫细胞浸润情况如何通过流式细胞术等技术进行量化评估的内容。这种视野的局限性，使得这本书在面对那些要求高通量、精准化测量的现代科研项目时显得力不从心。我期待看到作者能够引入更多生物信息学分析的视角，例如如何利用基因表达数据来优化动物模型的选择，或者如何通过统计学原理来设计更具代表性的分组，而不仅仅停留在描述动物本身的生理特性上。

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**评价一：内容深度与广度探究** 这本书的篇幅着实不小，但通读下来，总觉得在一些关键概念的阐述上，似乎还留有余地。比如说，对于某些常用实验动物模型的建立和筛选标准，书中的描述更多地停留在表面介绍，缺乏深入到细胞和分子层面的机制探讨。我期待能看到更多关于基因编辑技术在动物模型构建中的具体应用案例，以及这些模型在不同科研方向上的局限性和适用性分析。此外，动物伦理和实验设计规范的部分，虽然有所提及，但与当前国际前沿的“3R原则”（替代、减少、优化）的实践结合得不够紧密。例如，在麻醉和手术操作的细节描述上，如果能提供更具操作性的指南和风险预估，对于初入实验室的研究生来说会非常有帮助。整体而言，这本书更像是一本扎实的入门手册，但要支撑起高水平的学术研究，可能还需要读者自行去查阅大量更专业的期刊文献来补充其深度。希望未来的修订版能在理论深度上有所突破，将动物学知识与现代生物医学研究的最新动态更紧密地融合起来。

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**评价三：实践指导性与操作细节的缺失** 作为一本“教程”，我非常看重其实用性和可操作性。然而，在实际操作层面的指导上，这本书的力度明显不足。比如，描述到如何进行尾静脉注射时，文字只是简单地提到了“选取合适的血管”，但对于新手而言，如何准确地定位、如何控制进针角度和深度、以及注射过快或过慢可能导致的后果，几乎没有涉及。同样，在动物的个体识别和健康监测部分，虽然提到了常用的标记方法，但对于如何建立一个科学有效的电子化记录系统以追踪个体动物的长期生理变化，这本书没有给出任何建设性的建议。我希望书中能包含更多“操作陷阱”的提示，比如哪些操作在不同年龄段的动物身上需要特别注意，哪些是绝对禁止的禁忌操作。现在的状态是，读者读完后对理论知识有所了解，但真正站在操作台前，仍旧会因为缺乏具体操作流程的细致指导而感到手足无措，需要大量依赖经验丰富的同事或导师进行现场教学弥补。

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**评价五：对新兴实验动物物种的覆盖情况** 随着研究需求的不断变化，例如对非哺乳动物模型（如斑马鱼、非洲爪蟾）以及新型转基因小鼠品系（如条件性敲除小鼠、人源化小鼠）的需求激增，一本与时俱进的教程理应对此有所侧重。然而，这本书对于这些新兴物种的讨论篇幅明显不足，更多地还是将笔墨集中在传统的SPF级大鼠和小鼠的常规饲养管理上。以模式生物斑马鱼为例，虽然有简要的提及，但关于其胚胎发育过程中的特殊养护要求、光照周期控制、以及针对其特异性疾病模型（如神经退行性疾病模型）的维护细节，都显得过于粗略。对于需要利用这些前沿物种开展工作的研究者来说，这本书提供的参考价值有限，我们不得不转而依赖于专业的网络数据库或物种特异性的指南。如果不能及时跟进这些在国际上已成为主流的实验系统，这本书的参考价值将在未来几年内迅速下降。

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**评价二：图文排版与阅读体验反馈** 拿到这本书时，首先吸引我的是其厚重的质感，但翻开内页后，阅读体验却有些令人失望。插图的清晰度和色彩还原度有待提高，尤其是涉及组织学切片和动物解剖结构的部分，很多细节在低分辨率的图片上模糊不清，这对于需要对照学习的读者来说，无疑是一个障碍。很多重要的图表信息，例如药物在不同物种间的药代动力学对比数据，如果能用更直观的柱状图或折线图来呈现，而不是大段的文字堆砌，理解起来会高效得多。版面的设计略显陈旧，行距和字号的编排没有充分考虑长时间阅读下的视觉疲劳问题。我花了一个下午试图啃完关于啮齿类动物饲养环境标准的那一章，但因为缺乏明确的图示来标示不同环境参数的控制点，阅读过程显得非常枯燥和费力。一本科学技术类的书籍，优秀的排版设计是辅助理解知识的利器，这本书在这方面显然还有很大的提升空间，亟需进行一次现代化的视觉升级。

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